广西习用中药材番石榴叶不同季节采集对槲皮素含量的影响

董俊萍，王国振，支文星

（1.石家庄阳光药业有限公司，河北 石家庄 050000； 2.山西省中医药研究所，山西 太原 030012）

番石榴叶为桃金娘科植物番石榴 Psidium guajava L.的干燥叶及带叶嫩茎，始载于《广西中药志》[1]，含有β-谷甾醇、槲皮素、番石榴苷、无色矢车菊素、番石榴酸等成分。现代药理研究表明，从番石榴叶中提取的总黄酮苷及单黄酮苷具有降血糖作用[2]。其单味药制剂消渴降糖胶囊收载于《卫生部药品标准·中药成方制剂（第十五册）》，用于轻度及中度成年糖尿病的治疗。番石榴叶分布于我国广西、广东、海南、贵州及四川等地，目前市场上销售的番石榴叶主要来自广西。笔者对不同月份的广西产番石榴叶药材进行了质量考察，以期对药材的应用提供参考。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪，包括515泵、2487紫外检测器（美国Water公司）；N-2000型色谱工作站（浙江大学）；TU-1900型紫外分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）。广西番石榴叶；槲皮素对照品（中国药品生物制品检定所，批号为10081-200505）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Puresil C18柱（150 mm ×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇 -0.5%磷酸溶液（58 ∶42）[3-4]；检测波长：372 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：30℃；进样量：20 μL。理论塔板数按槲皮素计不低于3 000。

2.2 溶液制备

取同一批次的番石榴叶粉末约0.1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入含5%盐酸的甲醇溶液25 mL，称定质量，超声处理45 min，放冷，再称重，用含5%盐酸的甲醇溶液补足损失的质量，摇匀，滤过，即得供试品溶液。精密称取槲皮素对照品适量，加甲醇制成每1 mL含0.025 mg的溶液，即得对照品溶液。

2.3 方法学考察

线性关系考察：称取槲皮素对照品20.0mg，精密称定，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，用流动相分别稀释成0.005，0.025，0.050，0.100，0.200 mg/mL 的对照品溶液。分别取20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积（Y）对槲皮素质量浓度（X）绘制标准曲线，回归方程为 Y=612 288 X-439.67，r=0.999 9（n=5）。结果表明，槲皮素进样量在 0.01 ～4.04 μg的范围内与峰面积呈良好的线性关系。

稳定性试验：精密吸取同一批次的药材供试品溶液20 μL，于0，2，4，6，8 h 时进样测定，记录色谱图。结果的 RSD 为1.5%（n=5），表明供试品溶液在8 h内基本稳定。

精密度试验：精密吸取对照品溶液，连续进样6次，记录色谱图。结果的 RSD为1.8%（n=6），表明仪器有良好的精密度。

重现性试验：取同一批药材6份，分别按供试品溶液制备方法操作，按拟订的色谱条件测定，记录色谱图。结果的 RSD为1.6%（n=6），表明方法有良好的重现性。

加样回收试验：取同一批药材9份，样品量约为供试品溶液制备方法的一半量，精密加入槲皮素对照品，按供试品溶液制备方法操作，按拟订的色谱条件测定，记录色谱图并计算加样回收率。结果见表1。

表1 槲皮素加样回收试验结果（n=9）

2.4 样品含量测定

在不同月份采集番石榴叶，自然晒干，按供试品溶液制备方法处理，依法测定含量。结果 6，7，8，9，10，11，12 月份采集的样品中槲皮素含量分别为0.30%，0.32%，0.40%，0.44%，0.42%，0.50%，0.56%。

3 讨论

称取槲皮素对照品适量，加甲醇制成适量的溶液，在200～800nm波长范围内绘制槲皮素的紫外吸收图谱。结果槲皮素在372 nm左右的波长处有较大吸收，故选372 nm作为检测波长。

同样是产自广西的番石榴叶，采集的时间不同，其槲皮素含量相差较大，其中以11月、12月产的番石榴叶含量最高，6月、7月产的番石榴叶质量较差。上述药材只是样品，代表性不是很强，尚需继续研究，但从采集时间的不同可以看出，药材存在较大的质量差异。本试验为以后制订番石榴叶质量标准提供了参考。

[1]广西壮族自治区卫生厅.广西中药志（第1册）[M].南宁：广西人民出版杜，1959：190.

[2]国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草（第五册）[M].上海：上海科学技术出版社，1998：642.

[3]朱长福，同利琪，王国振，等.番石榴叶的质量标准研究[J].中草药，2006，37（6）：942-943.

[4]亢泽坤，丁文学，王国振，等.不同产地番石榴叶中槲皮素含量测定[J].中国药业，2008，17（8）：31.