毛细管气相色谱法测定丙酸倍氯米松中3种有机溶剂残留量

叶海青，傅应华

（1.浙江余姚市人民医院，余姚市 315400；2.嘉兴学院医学院，嘉兴市 314001）

丙酸倍氯米松系一种强效外用糖皮质激素类药物，为《中国药典》2005年版二部收载的品种[1]，剂型主要有气雾剂和乳膏剂，其中气雾剂可用于预防和治疗常年性及季节性的过敏性鼻炎和血管舒缩性鼻炎。目前，丙酸倍氯米松质量标准尚未收载残留溶剂检测项目，文献也未见报道。为了提高药品质量及用药安全，本文依据《中国药典》2005年版[1]，对其生产工艺中使用的正己烷、乙酸乙酯和二氧六环等有机溶剂，参考有关文献[1～3]，建立了毛细管气相色谱法同时测定上述3种溶剂残留量的方法。结果表明，该方法简单、灵敏、准确。

1 材料

1.1 仪器

6890N气相色谱仪，配置氢火焰离子化检测器（FID）、7683B自动进样器、10µL微量注射针、ChemStation色谱工作站（美国安捷伦公司）；AE240电子天平（瑞士梅特勒-托利多仪器有限公司，精度：±0.01 mg）。

1.2 试药

丙酸倍氯米松原料药6批（某药厂提供，批号：080115、080118、080121、080211、080215、080220，按干燥品计算，含量分别为99.3%，98.9%，100.2%，99.6%，99.8%，101.1%）；正己烷、乙酸乙酯均为分析纯，二氧六环、二甲基亚砜（DMSO）均为色谱纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

HP-INNOWAX（PEG-20M）毛细管柱（30 m×0.32 μm×0.25 μm）；柱温：程序升温，初始温度60 ℃，保持5 min，并以45 ℃·min－1速率升温至200 ℃，保持3 min；载气：高纯氮气，流速1.5 mL·min－1；FID：250 ℃；进样口温度：200 ℃；进样方式：分流进样，分流比1∶1；燃气：氢气，流速30 mL·min－1；助燃气：空气，流速400 mL·min－1；尾吹气：氮气，流速25 mL·min－1；进样量：1µL。

2.2 对照品溶液制备

分别精密称取正己烷5.80 mg、乙酸乙酯100.0 mg、二氧六环7.60 mg，置于加有适量DMSO的20 mL容量瓶中，用DMSO稀释至刻度，摇匀，作为残留溶剂贮备液；再精密量取1 mL，置于10 mL容量瓶中，用DMSO稀释至刻度，摇匀，作为混合对照溶液。

2.3 专属性考察

分别取“2.9”项下样品溶液（批号：080121）和混合对照溶液，注入气相色谱仪，结果见图1。

图1 气相色谱图A.混合对照溶液；B.样品溶液；1.正己烷；2.乙酸乙酯；3.二氧六环Fig 1 GC chromatographyA.mixture control；B.sample；1.n-hexane；2.ethyl acetate；3.dioxane

图1结果表明，各残留溶剂分离较好。

2.4 精密度

精密量取混合对照溶液1µL，注入气相色谱仪，重复进样6次，测定峰面积，计算正己烷、乙酸乙酯、二氧六环的RSD分别为2.6%、1.1%、1.4%，表明精密度良好。

2.5 线性关系考察

分别取正己烷、乙酸乙酯、二氧六环各25 mg，精密称定，置于25 mL容量瓶中，加DMSO至刻度，摇匀；精密量取上述溶液适量，用DMSO逐级稀释制成0.5、0.2、0.1、0.05、0.02 g·L－1的溶液，按上述色谱条件测定，所得峰面积（Y）与相应残留溶剂对照品浓度（X）作线性回归处理。结果正己烷、乙酸乙酯、二氧六环的回归方程分别为Y＝－18.428+2288.3X（r＝0.9999），Y＝－3.897+1800.7X（r＝0.9999），Y＝0.404+1581.1X（r＝0.9999）。结果3种溶剂检测浓度线性范围分别为0.0211～1.055、0.0215～1.074、0.0229～1.147 mg·mL－1。

2.6 溶液稳定性试验

取混合对照溶液，分别于0、2、4、6、8 h取样测定峰面积，结果峰面积均无明显差别，正己烷、乙酸乙酯、二氧六环的RSD分别为2.3%、1.8%、2.0%，表明溶液在8 h内稳定。

2.7 最低定量限

精密量取线性关系项下的0.02 mg·mL－1溶液适量，用DMSO逐级稀释，依法测定，按S/N＝10计算最低定量浓度。结果，正己烷为0.027 μg·mL－1，乙酸乙酯为0.033 μg·mL－1，二氧六环为0.095 μg·mL－1。

2.8 加样回收率试验

取经105℃干燥至恒重的样品（批号为080115）约1g，置于10 mL容量瓶中，精密称定，共9份，分别精密加入上述残留溶剂贮备液0.8、1、1.2 mL，再加DMSO使溶解并稀释至刻度，摇匀；再取混合对照溶液，依法测定，计算回收率。得高、中、低3个浓度的回收率（n＝3）分别为正己烷100.8%、101.7%、102.5%，RSD分别为1.8%、2.4%、2.8%；乙酸乙酯分别为101.0%、99.3%、100.8%，RSD 分别为1.6%、1.5%、2.2%；二氧六环分别为99.5%、98.9%、101.2%，RSD分别为2.5%、1.7%、2.6%。

2.9 样品中残留溶剂含量测定

取 批 号 为 080115、080118、080121、080211、080215、080220的6批丙酸倍氯米松各1 g，精密称定，置于10 mL容量瓶中，加DMSO使溶解并稀释至刻度，依法测定，结果除批号080118和080215样品中检出乙酸乙酯含量分别为0.10%与0.15%外，其余各批号均未检出上述3种有机残留溶剂。

3 讨论

3.1 溶剂的选择

丙酸倍氯米松不溶于水，但在DMSO中溶解，故选择DMSO作为溶剂。

3.2 色谱柱与柱温的选择

考虑到正己烷、乙酸乙酯、二氧六环极性依次增强，经试验在PEG-20M极性色谱柱上分离效果良好。由于二氧六环和DMSO沸点较高，若采用等柱温法，出峰时间长；为了缩短分析时间，改用程序升温法，在正己烷、乙酸乙酯出峰后，快速升高柱温加速二氧六环和DMSO出峰。结果，在给定的色谱条件下，正己烷、乙酸乙酯、二氧六环与DMSO之间均达到基线分离，一次进样在12 min内完成测定，达到了快速分析的目的。

3.3 溶剂限度的拟定

根据《中国药典》2005年版二部[1]规定，正己烷、二氧六环为二类溶剂，限度分别为0.029%、0.038%；乙酸乙酯为三类溶剂，限度为0.5%。因此，本品检查结果合格。

[1]国家药典委员会编.中华人民共和国药典（二部）[S].2005年版.北京：化学工业出版社，2005：79、附录ⅧP.

[2]栾成章，祝 波，王尊文，等.顶空气相色谱法测定夫西地酸中有机溶剂残留量[J].中国药房，2006，17（7）：535.

[3]张 军，孙会敏，李 科.气相色谱法测定阿德福韦酯的10种残留溶剂[J].药物分析杂志，2005，25（6）：660.