板党硒多糖对大鼠肢体缺血/再灌注后心肌损伤的影响

谭志鑫,肖本见,廖艳华

1.湖北民族学院医学院(湖北 恩施 445000)

肢体创伤、断肢再植及腹主动脉瘤手术等可引起肢体缺血/再灌注 (1imb ischemia reperfusion，LIR)损伤，常累及肺、肾、脑、心等远位器官(remote organ)[1-3]，是骨外科手术引发多器官功能障碍综合征(multiple organ dysfunction syndrome，MODS)的常见原因。因此，探讨急性LIR后心脏的保护途径有很重要的临床意义。湖北恩施板党(因产于恩施板桥镇)，1981年7月被全国中药材品种质量鉴定会议命名为“中国板党”， 简称“板党”。板党中含有丰富的硒，可形成天然结合产物——硒多糖，经原子吸收法测定板党含硒量达0.886 mg/kg[4]。目前国内外对板党硒多糖的研究报道还很少，本研究通过观察板党硒多糖对大鼠LIR后左心室功能、心肌酶和抗氧化酶的影响，探讨其对大鼠LIR后心脏功能的保护作用。

1 材料与方法

1.1动物及分组健康SD大鼠，由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供，♀♂各半，体重206±19.1 g，随机分为3组(n=10)：(1)对照组，用生理盐水灌胃4周；(2)模型组，用生理盐水灌胃4周；(3)治疗组，用2%板党硒多糖灌胃4周。三组剂量都是每只10 ml/kg，每天一次，并常规饮食。

1.2仪器与药品BL-420生物信号处理系统，UV-756MC型紫外可见分光光度计，TL-16G型高速冷冻离心机；LDH、α-HBDH和CK试剂盒均为山东潍坊3 V生物工程集团有限公司提供；SOD测定试剂盒、GSH-PX测定试剂盒、MDA测定试剂盒均为南京建成生物研究所产品。

板党由湖北恩施峰岚板桥党参有限公司提供。板党硒多糖的提取参考文献[2]，由本院中药实验室进行：精密称取药材100 g，置索氏提取器中，依次用石油醚(60～90℃)、乙醚和85%乙醇回流提取4 h，残渣挥干溶剂后，再继续以水回流4 h，减压浓缩至一半体积，加入0.1%活性碳，脱色，滤过。滤液加入95%乙醇，使溶液含醇85%，静置过夜，滤过。残渣用乙醚、无水乙醇反复洗涤得多糖，60℃烘干。用时配制成2%的液体。

1.3实验方法三组动物于末次灌胃后，参照赵利军等[5]的方法，复制肢体缺血再灌注模型，观察各指标的变化。在再灌注3 h时，用20%氨基甲酸乙脂溶液对大鼠行腹腔注射麻醉，剂量为1.0 g/kg，仰卧位固定于鼠台，分离右侧颈外静脉并插管(便于再灌注4 h时取血测GSH-Px、SOD、MDA、LDH、α-HBDH和CK)，分离左侧颈总动脉，行左心室插管，用BL-420系统在再灌注4 h时描记左心室功能参数 (LVSP、LVEDP和±dp/dtmax)。

2 结果

2.1左心室功能参数的变化模型组与对照组比较：LVSP和±dp/dtmax降低、LVEDP升高(P<0.01、P<0.05)；板党硒多糖治疗组与模型组比较：LVSP和±dp/dtmax升高(P<0.01、P<0.05)，LVEDP变化不明显(表1)。

表1 左心室功能参数的变化

2.2血清LDH、α-HBDH和CK变化模型组与对照组比较：LDH、α-HBDH和CK均升高(P<0.01)；板党硒多糖治疗组与模型组比较：LDH、a-HBDH和CK均降低(P<0.01、P<0.05),表2。

2.3血清SOD、GSH-Px活性和MDA含量的变化模型组与对照组比较：SOD和GSH-Px活性明显降低、MDA含量明显增加(P<0.01)；板党硒多糖治疗组与模型组比较：SOD和GSH-Px活性增高、MDA含量减少(P<0.01,见表3。

表2 血清LDH、α-HBDH和CK的变化

表3 血清SOD、GSH-Px活性和MDA含量的变化

3 讨论

板党为桔梗科属植物的干燥根，其味甘性平，药食兼用。党参功效为补脾、益气、生津、养血，现代研究表明党参不但保护心肌收缩功能，而且对急性心肌缺血动物还具有相对增加心肌供血灌注压力的作用[6]，能明显降低小鼠低氧脑组织中兴奋性氨基酸含量，从而发挥对脑损伤的保护作用[7]，能减弱氟哌啶醇致大鼠的学习记忆障碍，维持实验大鼠学习记忆能力[8]。但目前对板党中硒多糖的研究还很少，本实验主要是观察大鼠肢体缺血再灌注后，板党硒多糖对较远器官心脏的保护作用。

本实验发现，LIR 4 h后，模型组与对照组比较：LVSP和±dp/dtmax降低、LVEDP增高；SOD和GSH-Px活性明显降低、MDA含量明显增加；LDH、α-HBDH和CK均明显增高，说明模型复制很成功，LIR造成了心脏的严重损伤。板党硒多糖治疗组与模型组比较：LVSP和±dp/dtmax增高；SOD和GSH-Px活性增高、MDA含量减少；LDH、α-HBDH和CK均降低。实验显示板党硒多糖对LIR损伤有明显的保护作用，这种作用可能是硒与多糖都能提高抗氧化酶的活性，从而减少了自由基对细胞膜的攻击，因此血清中MDA含量减少和心肌酶活性下降。但硒在其中的存在形态、价态及硒与多糖的结合方式还不清楚，具体机制还有待进一步研究。

恩施富硒板党营养丰富，清香味美，食药兼用，倍受大众喜爱，是一种很好的保健品。党参硒多糖的开发，可成为新的一类硒补剂产品。本研究以求为含有机硒药物或保健食品的开发提供理论依据，以拓宽党参的应用范围，丰富党参的产品类型，为进一步拓展其药用及保健方面的应用开发奠定理论基础。

[参考文献]

[1] Yassin MM, Harkin DW,Barros D，et al.Lower limb ischemia reperfusion injury triggers a systemic inflammatory response and multiple organ dysfunction[J].World J Surg，2002，26(1)：115-121.

[2] 赵利军，门秀丽，董淑云，等.骨骼肌缺血预适应对肢体缺血再灌注后心肌的远端保护作用[J].中国医科大学学报，2008，37(2)：168-170.

[3] 翟东升.肝缺血再灌注损伤及其PPARV研究进展[J].湖北民族学院学报(医学版)，2009，26(1)：73-75.

[4] 张驰，刘信平，周大寨，等.中国板党中硒多糖提取分离技术研究[J].食品科学，2006，27(10)：314-318.

[5] 赵利军，门秀丽，董淑云,等.L-精氨酸对大鼠肢体缺血/再灌注后心肌损伤的影响[J]．中国药理学通报,2008,24(6):827-830.

[6] 周晶亚，李玉山，肖本见.恩施板党对家兔心肌缺血再灌注损伤保护作用的研究[J]．湖北民族学院学报(医学版)，2008，25(2)：22-24.

[7] 肖本见，陈国栋，谭志鑫,等.富硒板党对低氧耐受小鼠兴奋性氨基酸的影响[J]．中国应用生理学杂志，2006，22(2)：151-152.

[8] 艾明仙，黄丽亚.富硒板党对大鼠学习记忆及抗氧化酶影响[J]．中国公共卫生，2007，23(6)：736-737.