分化型甲状腺癌中 ADAM9的表达及其与临床病理因素的关系

陈 启 冯吉焕 张 莹 赵一军 许俊龙

近年来研究表明金属蛋白酶解离素 9(a disintegrin and metalloproteinase 9,ADAM9)高表达与乳腺癌、肝癌、胰腺癌、胃癌等多种肿瘤侵袭转移关系密切[1～4]。关于 ADAM 9在分化型甲状腺癌侵袭转移过程中的作用,目前,国内、外少见文献报道。为此,我们采用免疫组化 SABC法检测了 42例甲状腺癌组织中ADAM9的表达,旨在探讨 ADAM9在分化型甲状腺癌侵袭转移过程中的作用及临床意义。

1 材料与方法

1.1 资料

标本取自聊城市人民医院病理科(2007～2008年)手术切除的甲状腺癌标本,共 42例,男性 13例,女性 29例,年龄 18～75岁,中位年龄 38岁。所有病例均经术后病理确诊,其中乳头状癌 34例,滤泡状癌 8例。有颈淋巴结转移者 20例,无颈淋巴结转移者 22例;肿块限于甲状腺内者 35例,累及或超出甲状腺被膜者 7例;按 1987年 UICC制定的国际 TNM分期:Ⅰ期 22例 ,Ⅱ期 12例,Ⅲ期 8例。

1.2 试剂和方法

鼠抗人 ADAM9单克隆抗体购自 Santa Cruz公司,工作浓度为 1∶100。即用型 SABC试剂盒和 DAB显色试剂均购自武汉博士德试剂公司。将存档的石蜡块重新制成 4μm厚切片,进行免疫组化 SABC法染色观察。具体操作技术按说明书进行。每批染色均用已知的阳性切片作为阳性对照,PBS代替一抗作阴性对照。

1.3 结果判断

采用半定量积分法,将染色强度分为 3级:无着色记 1分,浅着色记 2分,棕黄色记 3分;按阳性细胞的百分比分 3级:≤25%为一级记 1分,26%～75%为二级记 2分,≥76%为三级记 3分。每张切片最后的得分为两次评分的乘积(1～9),≥3分为阳性,＜3分为阴性。

1.4 统计学分析

应用 SPSS 13.0统计软件对数据进行统计分析,采用 χ2检验。

2 结果

2.1 ADAM9在甲状腺癌中的表达情况

ADAM9以胞质着色为主,部分胞膜着色。甲状腺癌组织中 ADAM 9的阳性率为 64.3%(27/42)。

2.2 ADAM9表达与甲状腺癌临床病理因素的关系

ADAM9表达与浸润程度和颈淋巴结转移有关(P＜0.05),而与病理分型和 TNM分期无关(P＞0.05),见表 1。

表1 ADAM 9表达与甲状腺癌临床病理因素的关系

3 讨论

ADAM9是金属蛋白酶解离素家族中的一员,在多种肿瘤中高表达,能提高肿瘤细胞的侵袭和转移的能力,并和预后有关[1～4]。Lendeckel等[1]研究发现,ADAM9在乳腺癌中高表达,有淋巴结转移者更明显,主要表达于癌细胞的胞质中,并且和乳腺癌的预后有关。ADAM9通过其蛋白水解活性改变细胞分子表面活性状态,清除表皮生长因子的部分底物,促进肿瘤细胞的增殖生长。Mazzocca等[2]研究发现,ADAM9通过和肿瘤间质相互作用分解层黏连蛋白增强肝癌细胞的侵袭性,其高表达在肿瘤与基质的连接处,尤其在周围基质与肿瘤紧密连接处的细胞中,而肝脏细胞中 ADAM9阴性表达。ADAM9通过作用于肝肿瘤细胞与细胞间的基质使原发肿瘤细胞进入淋巴管或血管内,使肿瘤细胞在远处器官种植。Yamad等研究发现[3],ADAM9在胰腺癌中高表达,并参与肿瘤进展。ADAM 9还在胃癌中高表达,和胃癌的发生发展有关[4]。

本研究结果显示 42例甲状腺癌中有 64.3%表达ADAM9,与文献报道的其它系统肿瘤情况相符[1～4]。本研究还发现,累及或超出甲状腺被膜的甲状腺癌中ADAM9表达明显高于肿块限于甲状腺内者;伴颈淋巴结转移的甲状腺癌中 ADAM9表达明显高于不伴颈淋巴结转移者。这提示 ADAM9高表达与甲状腺癌的浸润转移及病期进展有关。ADAM9主要通过 Nortch和EGFR途径参与肿瘤的发生发展和侵袭转移[5]。ADAM9的这些作用和 TNF-α、EGF、整和素家族等有关[5]。本研究还发现,ADAM9表达与病理分型和TNM分期无关。

综上所述,ADAM9可能是甲状腺癌易出现浸润转移的 1个重要生物学指标,对评估甲状腺癌生物学行为及进展程度可能具有一定的临床价值。至于 ADAM9在甲状腺癌侵袭转移过程中的分子生物学机制目前尚不清楚,有待于进一步研究阐明。

[1] Lendeckel U,Kohl J,Amdt M,et al.Increased expression of ADAM fam ily members in human breast cancer and breast cancer cell lines〔J〕.J Cancer Res Clin Oncol,2005,131(1):41.

[2] Mazzocca A,Coppari R,De Franco R,et al.A secreted form of ADAM 9 p romotes carcinoma invation through tumor-stromal interactions〔J〕.Cancer Res,2005,65(11):4728.

[3] Yamad D,Ohuchida K,Mizumoto K,et al.Increased expression of ADAM 9 and ADAM 15 Mrna in pancreatic cancer〔J〕.Anti-cancer RES,2007,27(2):793.

[4] Carl-McGrath S,Lendeckel U,Ebert M,et al.The disintegrin-metalloproteinases ADAM9,ADAM 12,and ADAM15 are upregulated in gastric cancer〔J〕.Int JOncol,2005,26(1):17.

[5] Mazzocca A,Coppari R,De Franco R,et al.A secreted form of ADAM 9 promotes carcinoma invation through tumor-stromal interactions〔J〕.Cancer Res,2005,65(11):4728.