大鼠心脏插管留置术的探讨

梁成结，钟欢妹，罗灿峤，杨文敏

（1.广州医学院实验动物研究中心；广州 510182；2.增城市人民医院检验科；广州 510095；3.中山大学医学院病理教研室；广州 510089；4.广州市儿童医院 510120）

大鼠心脏插管留置术过程中极易出现如下几个难题，致使实验无法完成：（1）由于所插颈外静脉入口比所用的导管口径还要小，所以要求初学者进行“大管插细管”尤其感到困难。（2）所用的导管应插多深？（3）留置导管设备固定后很易被大鼠破坏。④最关键的是留置管固定后：若方法不当，所固定的管和弹簧极易被大鼠咬断或破坏。即使“插管留置术”固定方法得当，若加药方法不当也可能出现：术后几个小时或超过24h，插入的导管往往只能成为加药的通道，而不能成为抽血的通道，致使检验所需血样本不易获得。

以上5点：只要有一点出现问题，就意味着实验无法进行。本文通过深入探讨这个实验，希望能为“大鼠心脏插管留置术”摸索出一套可行的具体方法，增加其成功率!

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物：无特定病原体（SPF）级雄性SD大鼠20只，体重250～300g，由广东省医学实验动物中心提供，动物合格证号0037291、0038975。

1.1.2 实验器材：一次性使用连续硬膜外麻醉导管（广州蓝波医疗器械设备有限公司）；消毒手术包；消毒动物血管夹；腰椎穿刺针；三通管［1］；弹簧：长40～50cm；直径：0.42cm；弹簧的钢丝直径：0.05cm（广州市越秀区新标力弹簧经管部提供）。非吸收性外科手术缝线规格：2/0（原7#），扩张强度（N）≤14.10。

1.1.3 实验药品：2％戊巴比妥钠（40mg/kg）；肝素液125U/mL。

1.2 方法

1.2.1 插管操作方法：20只大鼠全部进行心脏导管插入操作，心脏导管插入管完成后分成2组（导管穿弹簧正内孔组和导管穿弹簧侧边入内孔组）。

操作过程如下：2％戊巴比妥钠（40mg/kg）腹腔注射麻醉，仰卧固定，常规备皮消毒，无菌条件下分离并暴露右颈外静脉约1cm长，用手术缝线结扎颈外静脉远心端，尽量结扎最远端，以便有更长的颈外静脉暴露，便于操作。然后用手稍按心脏位，使心脏血返流到所结扎的血管，反复按心脏几次，返流血最充盈时用动脉夹夹住颈外静脉近心端。血管充盈后静置约5～8min，再用眼科剪剪一V型小口，迅速把直径约1.0mm的一次性使用连续硬膜外麻醉导管插入颈外静脉（插入血管后，配合操作松开动脉夹）约3cm左右进入右心房（经解剖证实），用注射器抽到回血后，结扎固定导管于血管上。顺导管方向，用腰椎穿刺针把导管从大鼠颈背引出，缝合消毒颈下解剖口，导管内注满生理盐水和抗凝剂（图1）。

图1 颈外静脉Fig.1 The external jugular vein

1.2.2 插管动物的分组：将完成插管的20雄性大鼠随机分成：导管穿弹簧正内孔组、导管穿弹簧侧边入内孔组，每组10只。导管穿弹簧正内孔：即是导管固定后由颈背部引出，从弹簧内孔中间穿入弹簧内（如图2B所示）；导管穿弹簧侧边入内孔组：即是导管固定后由颈背部引出，导管从弹簧一端（离端约0.4处稍分离两弹簧环形成一个“小口”）侧边“小口”进入弹簧穿行（如图2A所示）。

1.2.3 导管穿弹簧正内孔组和导管穿弹簧侧边入内孔组操作：完成心脏导管插管手术后，为了固定导管不被大鼠咬断或用爪拔出，通常用小弹簧把导管套住，再与三通管等相关设备连接。

导管穿弹簧正内孔组：这组动物在完成上述导管插入操作后，将从颈背引出的导管正穿入弹簧内孔，如图2B所示。用用较粗非吸收性外科手术缝线把弹簧与体表皮肤缝合固定，使弹簧与大鼠体表近平行相贴，这样导管穿入弹簧口处就会有一段导管外露。

导管穿弹簧侧边入内孔组：这种固定方法（如图2A所示），在“图2A”箭头处形成弹簧“一长一短”两段，用较粗非吸收性外科手术缝线（规格同上）把弹簧“一长一短”两段紧贴体表皮肤缝合固定。这种方法固定时要把“一长一短”弹簧缝合固定住皮肤，使弹簧更多面积与体表相贴，受力面积更大，更加紧贴皮肤，而且体表弹簧接口处导管不会外露。

图2 两组大鼠导管与弹簧连接比较Fig.2 Comparison of the two routes of catheter insertion into the steel spring.A：Lateral insertion into the spring；B：Direct insertion into the spring.

以上两组模型操作“导管”固定后由颈背部引出，穿过弹簧，弹簧一端固定于颈背部皮肤，另一端固定于饲养笼外的支架上，导管外端接注射帽等设备，术毕用125U/mL肝素液0.2mL保留冲洗导管，封管备用［2］。

2 结果

由表1可见，完成心脏导管插管手术后，导管与弹簧等设备固定时的效果：“导管穿弹簧侧边入内孔组”明显比“导管穿弹簧正内孔组”理想，实验期间“导管穿弹簧侧边入内孔组”设备无一遭到破坏，可顺利采血与加药。经过反复实验证明：这套心脏插管留置术方法是高效可行的。

3 讨论

在研究脓毒症，在进行临床前药理（如抗菌抗内毒素、肾上腺素等）研究中，在进行药代动力学、药效学及疾病发生机制等多方面的研究，经常需要对动物进行多次给药、采血等操作。这种情况，“导管大鼠模型”是最好的解决办法。本实验实际也属于“导管大鼠模型”范畴，本实验的研究目的就是探讨出一套“具体可行”的制作“导管大鼠模型”方法，使更多人掌握这项技术并少走弯路。导管大鼠模型是近年国外开展应用的动物实验模型，具有快捷稳定、使用时间长，具有药品用量少、动物需求量少，数据偏差小，实验结果重复性好、节约时间等优点。［3］

由于专门介绍如何“大鼠心脏的导管插管留置术”的文章太少，甚至查不到。所以有必要对该术式的细节进行探讨。

首先，导管从颈外静脉插入右心房，其深度约为导管自身3刻度格左右（每格1cm），即约3cm左右。由于插入导管的深度与大鼠体重有关，通常大鼠的体重在250～300g时，所插入要求的深度大约是3cm，同时这样体重大鼠的血管相对也粗些——导管易插入，实验操作也相对容易。当然大鼠的体重与年龄由实验需要而定，当大鼠体重在200g以下时，血管相对小些，心脏导管插入难度加大，所插入深度也相对浅些。因而对于不同体重的大鼠，行导管插入术之前须经解剖实验确定插入的深度。

其次，插入导管前必须充盈静脉血管约5～8min（操作方法即文章的前面的“插管操作方法”）。这是由于颈外静脉血管相对小而导管大，导管很难插入。实验证明这种短时充盈血管的方法可使导管较易插入右心房，而且值得注意的是：用眼科剪剪开颈外静脉血插入口时，一定要迅速把导管插入血管，否则血管会很快收缩，导管难以插入。

再次，两组大鼠导管固定方法的优缺点比较：

导管穿弹簧正内孔组：这种弹簧固定法（如图2B所示），弹簧与大鼠紧贴体表固定时，受力面不够大，且接口处导管有一小段外露，固定程度远没有“一长一短”缝合固定好。有些人处理弹簧与导管连接时，通常还有两种情况：1）弹簧与大鼠体表有个较大的夹角，受力点集中在一点上，严重影响大鼠的自由活动，同时固定不良，极易被大鼠破坏；2）只用弹簧简单套住导管无缝线固定，则弹簧极易随着大鼠活动而移位，导管外露，从而易被大鼠抓坏或咬坏。这三种情况：设备极易受到大鼠咬坏或用爪抓坏（咬断导管或把导管拔出）；或弹簧接触点受力不均，影响大鼠活动等，可至实验无法进行下去。

表1 两组大鼠导管固定时不同方法比较Tab.1 Comparison between the two groups of rats with different methods of catheter fixation

导管穿弹簧侧边入内孔组操作：这种方法（如图2A）可使弹簧紧贴体表，导管不外露，导管进入弹簧接口处使弹簧形成的“一长一短”两端与体表皮肤缝合固定非常牢固，弹簧导管设备不容易被大鼠破坏。经过多次实验，设备未曾被大鼠咬坏或抓坏。由于弹簧紧贴大鼠体表，受力面积大且较均匀，最大程度减少大鼠对弹簧等设备在体表连接的不适，所以大鼠自由活动性好。

最后，当留置导管多次采血时，在每次抽完血后，必须用生理盐水抗凝剂配液冲洗导管，否则就会出现采血不畅的现象。这是由于每次抽完血后，导管内必留有血液，若无进行生理盐水抗凝剂配液冲洗导管，导管内血液极易出现凝固，赌塞导管通道。

综上所述：本实验提倡的“导管穿弹簧侧边入内孔组”，操作起来每一步思路及注意事项都非常清楚，常人很快就会操作，具有成功率高等优点。但本实验在导管插入心脏前的准备工作所需时间还有待缩短。

［1］杨文敏，曾其毅.肾上腺素对内毒素致大鼠炎症性肝损害的保护作用［J］.中国循证儿科杂志2007，12（04）：276-281.

［2］王宁，郑江，郭毅斌，等.心导管留置术对大鼠脏器功能影响的实验研究［J］.第三军医大学学报，2006，（14）：1473-1475.

［3］Beno DW，KimuraRE.Nonstressed rat model ofacute endotoxemia that unmasks theendotoxin-inducedTNF-alpha response［J］.Am J Physiol，1999，276（2 Pt2）：H671-H678.

［4］徐叔云.药理学实验方法［M］.北京：人民卫生出版社.1991：546.