通心络胶囊对糖尿病合并动脉粥样硬化大鼠内皮素、血管紧张素Ⅱ的影响

韩景辉 李 真△ 杨海燕 符 宇

通心络胶囊对糖尿病合并动脉粥样硬化大鼠内皮素、血管紧张素Ⅱ的影响

韩景辉1李 真1△杨海燕1符 宇2

目的探寻通心络胶囊对2型糖尿病合并动脉粥样硬化病变的作用机理。方法将SD大鼠制备糖尿病合并动脉粥样硬化模型，随机分为空白组、模型组、对照组(贝那普利)和治疗组(通心络胶囊)。分别予相应药物灌胃8周后取材，放免法检测血清内皮素(ET)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量。结果治疗组大鼠的血清ET、AngⅡ水平较模型组降低，差异有统计学意义;同对照组相近。结论通心络胶囊具有改善糖尿病合并动脉粥样硬化病变内皮功能的作用，其机制可能与降低ET、AngⅡ水平有关。

通心络胶囊 糖尿病合并动脉粥样硬化 内皮素 血管紧张素Ⅱ

1河南中医学院第一附属医院(郑州450000)

2河南中医学院(郑州450000)

△通信作者

血管内皮功能受损是糖尿病血管并发症发生的基础之一，亦是动脉粥样硬化(AS)重要的始动因素，贯穿于糖尿病发展的始终。因而保护内皮功能己成为糖尿病合并动脉粥样硬化疾病预防及治疗的重要目标之一。不少实验和临床研究证实，内皮功能障碍可以通过药物和非药物性的干预被逆转或者较大程度上得以纠正。本研究旨在观察通心络胶囊对糖尿病合并动脉粥样硬化大鼠血清内皮素(ET)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的影响。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 (1)实验动物:SD大鼠90只，均为清洁级，雄性、1月龄，体质量90～120g，由河南省实验动物中心提供。(2)主要仪器:γ－放射免疫计数器(GC－911型，中国科学技术大学科技实业总公司生产)。(2)药物与试剂:链脲佐菌素(STZ，美国Sigma公司产)，ET试剂盒 (北京普尔伟业生物科技有限公司产)，AngⅡ试剂盒(北京北方生物技术研究所提供)，盐酸贝那普利片(北京诺华制药有限公司生产)，通心络胶囊(河北以岭制药有限公司生产)。

1.2 方法 (1)造模:实验大鼠每笼4只，饲养于河南中医学院第一附属医院动物实验室，饲养温度(22±1)℃，湿度:59% ～61%，每天光照与黑暗时间各12h。所有笼具、饲料、垫料、饮水均高压灭菌。实验期间的灌胃、换水、添加饲料等操作均在超净工作台内进行，由专人管理。实验期间动物自由进食、饮水。参照文献[1－2]方法制备糖尿病大鼠模型。喂食高脂高糖饲料(由基础饲料加入脂肪15%、蔗糖20%、蛋黄粉5%、胆固醇1%、食盐0.1%，经辐照处理)共4周，诱导胰岛素抵抗。大鼠隔夜空腹12h后右侧腹腔注射2%STZ 40mg/kg(未成模者在注射后1周再注射1次)，并在此期间继续喂以高糖高脂饲料。空白组大鼠右侧腹腔注射柠檬酸－柠檬酸钠缓冲液0.1mmol/L(pH4.2)，并喂以普通颗粒饲料。糖尿病合并动脉粥样硬化大鼠模型的制备:糖尿病模型成功大鼠，继续喂食高脂高糖饲料，共12周。(2)造模标准:糖尿病判定标准:注射后第7、14日测定血糖，如随机血糖≥16.9mmol/L，或出现多饮、多尿、消瘦、乏力、懒动等糖尿病症状且连续2次随机血糖＞11.1mmol/L，即视为糖尿病建模成功。(3)分组及治疗:糖尿病合并动脉粥样硬化模型成功大鼠(不成功模型弃用)，按照随机数字表法分为模型组、对照组和治疗组各9只。对照组按1.6mg/(kg·d)灌胃贝那普利悬液(质量浓度为0.16mg/mL)，治疗组按1g/(kg·d)灌胃通心络胶囊悬液 (质量浓度为0.1g/mL)，模型组按10mL/(kg·d)灌胃生理盐水。另设同周龄SD大鼠作为空白对照组，按10mL/(kg·d)灌胃生理盐水。各组均每日灌胃1次，连续8周。(4)标本采集:大鼠在实验8周后处死，处死前禁食不禁水12h，按2mL/kg腹腔注射戊巴比妥钠麻醉，取腹部正中切口，分离腹主动脉采血，备测 ET、AngⅡ。

1.3 统计学处理 应用SPSS 13.0统计分析软件。计量资料以(±s)表示，首先进行方差齐性检验，方差齐时对多个样本均数间的多重比较应用SNK－q检验;方差不齐时应用Tamhane’s T2进行检验。

2 结果

见表1。与空白组比较，模型组ET、AngⅡ增高(P ＜0.01);与模型组比较，对照组和治疗组ET、AngⅡ均降低 (P ＜0.05)，治疗组与对照组相近(P＞0.05)。结果 表明，贝那普利和通心络胶囊可改善大鼠内皮因子水平。

表1 各组大鼠血清ET、AngⅡ比较 (pg/mL，±s)

与空白组比较，＊P ＜0.01;与模型组比较，△P ＜0.05

组别空白组模型组对照组治疗组n9999 ET 323.05 ±17.83 496.24 ±16.35＊346.13 ±12.15△379.79 ±19.33△AngⅡ576.17 ±17.28 835.59 ±26.01＊663.43 ±17.90△736.07 ±20.45△

3 讨论

内皮功能障碍是糖尿病合并动脉粥样硬化发病的重要机制，血管内皮细胞结构和功能的改变是动脉粥样硬化发生的始动环节，主要表现为缩血管因子如ET、AngⅡ等水平的升高及舒血管因子如一氧化氮(NO)、前列环素2等水平的降低。调节血管内皮因子水平是预防糖尿病合并动脉粥样硬化疾病的关键。

通心络胶囊为治疗“脉络－血管系统病”代表方药，多用于冠心病心绞痛的治疗。临床报道其具有改善血管内皮的功能。尤士杰等[3]在通心络胶囊用于急性心肌梗死血运重建后的有效性和安全性研究中，表明通心络胶囊可明显增加血清NO含量，降低血清ET水平，从而改善血管内皮功能。

本实验结果表明，糖尿病合并动脉粥样硬化病变模型大鼠存在ET、AngⅡ水平增高，考虑内皮功能异常同糖尿病合并动脉粥样硬化并发症密切相关。通心络胶囊能够降低ET、AngⅡ水平，同贝那普利作用相近，提示通心络胶囊可能具有改善血管内皮功能、减缓或预防糖尿病血管并发症发生的作用。

[1]张芳林，李果，刘优萍，等.2型糖尿病大鼠模型的建立及其糖代谢特征分析[J].中国实验动物学报，2002，10(1):16－20.

[2]黄霖，李迎新，刘华.实验性糖尿病大鼠动脉粥样硬化模型的建立[J].中国中医急症，2007，16(9):1111 －1113.

[3]尤士杰，杨跃进，陈可冀，等.通心络胶囊在急性心肌梗死血运重建后的有效性和安全性研究[J].疑难病杂志，2004，3(4):193－196.

Effect of Tongxinluo Capsule on the Expression of ET and AngⅡin Rats with Diabetic Atherosclerosis

HAN Jing-hui， LI Zhen， YANG Hai-yan， et al
The First Affiliated Hospital of Henan University of TCM(Zhengzhou 450000)

Objective:To study the mechanisms of Tongxinluo Capsule on diabetic atherosclerosis.MethodsThese male SD rat models were divided randomly into the normal group， the model group， the control group (with benazepril)， the treatment group(with Tongxinluo Capsule).With corresponding drug intragastric administration in each group for 8 weeks， the ET content and the AngⅡ level were detected by the radioimmunological method.ResultsThe ET and the AngⅡin the treatment group were lower than those in the model group.These levels were similar to those in the control group.ConclusionThe mechanism that the endothelial function of the diabetic atherosclerosis could be improved by the Tongxinluo Capsule might be related to the reduction the ET level and the AngⅡcontent.

Tongxinluo Capsule;Diabetic atherosclerosis;ET;AngⅡ

R285.5

A

1004－745X(2010)09－1553－02

2010－04－26)