黏虫体内两种微管蛋白基因ｃＤＮＡ序列的克隆与序列分析

樊　东　秦松柏　朴冬花　许艳丽

摘要以黏虫4龄幼虫为材料提取总RNA，利用RT—PCR和eDNA末端快速扩增技术(RACE)，分别扩增得到该虫的α和β微管蛋白基因的cDNA序列各1条。其中α微管蛋白基因的eDNA序列1443个碱基，包括一个1353个碱基的开放阅读框，编码一个含450个氨基酸的蛋白，分子量约为50.0ku。氨基酸的142～148位存在一个微管蛋白标志信号片段GGGTGSG，在氨基酸序列的C－端有一个酪氨酸残基，N－端存在一个对转录后调控非常重要的保守区MRECI序列，以上特点与其他昆虫α微管蛋白氨基酸序列相同。黏虫β微管蛋白基因cDNA序列含1906个碱基，开放读码框1 344个碱基，编码氨基酸447个，分子量约为50.2ku，等电点4.75。1～4个氨基酸MREI为β微管蛋白转录后调控信号，140～146GGGTGSG位同样存在一个微管蛋白标志信号片段。序列比对表明，克隆的α和β微管蛋白基因与其他昆虫的a和p微管蛋白基因在核苷酸和氨基酸水平上都是高度同源的，黏虫与家蚕(Bombyx morti)α微管蛋白的氨基酸序列同源性达到99.3％，与其他3种夜蛾科昆虫α微管蛋白的氨基酸序列同源性更是达到100％。黏虫与家蚕β微管蛋白的氨基酸序列同源性达到98.7％，与烟草天蛾p微管蛋白的氨基酸序列同源性达到99.6％。两个基因的cDNA序列已经登录GenBank并获得登录号分别为EUlOOOl6和EU234504。

关键词黏虫；α微管蛋白；β微管蛋白；克隆；序列分析

中图分类号Q 785，S 433.4

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