万年青质量标准研究

【摘要】目的：了解贵州省范围内万年青的分布状况、生长环境及质量现状，建立万年青质量控制方法，提高药材质量，保护民族药资源，促进其可持续发展。方法：考证万年青的生长环境分布、性状特征，建立显微鉴别方法、薄层色谱鉴别方法，并测定水分、总灰分、浸出物。结果：明确了万年青的性状特征，初步建立了万年青的显微鉴别、薄层色谱鉴别、水分、总灰分及浸出物的测定方法。结论：万年青的性状特征、显微特征明显，薄层色谱斑点清晰、分离效果及重现性好，水分、总灰分、浸出物测定方法可行，可为今后规范万年青药材资源及质量评价提供科学依据。

【关键词】万年青；显微鉴别；薄层色谱鉴别；质量标准

【中图分类号】R927.2；R284.1

【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2024）21-0037-04

DOI：10.3969/j.issn.1007-8517.2024.21.zgmzmjyyzz202421008

Study on the Quality Standard of Rohdea Japonica（Thunb.）Roth

LI TianyouCAI Yuandong

Bijie inspection and testing center of administration for maeket supervision，Bijie 551700， China

Abstract：Objective To understand the distribution， growth environment and quality status of Rohdea japonica（Thunb.）Roth in Guizhou province， establish quality control methods of Rohdea japonica（Thunb.）Roth， improve the quality of medicinal materials， protect the resources of ethnic medicine， and promote its sustainable development.Methods To investigate the growth environment distribution and character characteristics of Rohdea japonica（Thunb.）Roth， establish a microscopic identification method， TLC identification method， and determination of water， total ash， extract.Results The characteristics of Rohdea japonica（Thunb.）Roth were defined， and the methods for microscopic identification， TLC identification， determination of moisture， total ash and extracts were established. Conclusion The characteristics and microscopic characteristics of Rohdea japonica（Thunb.）Roth are obvious， the spots of thin layer chromatography are clear， the separation effect is good and the reproducibility is good， the determination method of water， total ash and extract is feasible， which can provide scientific basis for the standardization of medicinal resources and quality evaluation of Rohdea japonica（Thunb.）Roth.

Keywords：Rohdea japonica（Thunb.）Roth; Microscopic Identification; TLC Identification; Quality Standard

万年青为百合科植物万年青Rohdea japonica（Thunb.）Roth的干燥根茎。冬季采挖，除去茎叶及须根，洗净，干燥或鲜用^［1］。万年青为贵州省少数民族用药，具有清热解毒、强心利尿、凉血止血的功效，主治咽喉肿痛、疮疡肿毒、蛇虫咬伤、心力衰竭、咯血、吐血、崩漏等^［1］。为了有效控制万年青的质量，保证民族药用药安全有效，本研究对万年青生长环境、性状特征等进行考证，建立了万年青显微特征鉴别、薄层色谱鉴别、水分、总灰分及浸出物的测定方法，为万年青质量标准的制定提供了参考，也为今后提高药材质量，促进民族用药的可持续发展做出一定贡献。

1材料与仪器

LEICA DM2500显微照相系统、电热恒温水浴锅、岛津电子分析天平（AY120）以及常规显微制片的载玻片、盖玻片。水合氯醛、稀甘油、乙醇、石油醚、乙酸乙酯、异丙醇、甲醇、氨水、二氯甲烷、香草醛、纯化水等试剂均为分析纯。硅胶G预制板（青岛海洋化工有限公司制造，批号：20171208）。本研究用样品原植物腊叶标本经原贵州省药品检验所李扬老师鉴定为百合科植物万年青Rohdea japonica（Thunb.）Roth，标本存放于毕节市市场监督管理局检验检测中心。样品来源见表1。

2方法与结果

2.1草本考证据《中华本草》^［2］考证，万年青始载于《履峻岩本草》，原名千年润，按药作部位分根茎、叶、花分别记载。在《本草纲目拾遗》《植物名实图考》《全国中草药汇编》《中药大辞典》等著作中均有记载。《贵州民间方药集》^［3］万年青［Rohdea japonica （Thunb.）Roth］，别名诸总管、冬不凋、癀药等，全草入药。《贵州中药资源》^［4］万年青［Rohdea japonica （Thunb.）Roth］，别名青龙胆，药用部位为叶节、花、根。《贵州中草药资源研究》^［1］万年青［Rohdea japonica （Thunb.）Roth］，别名铁扁担、搜山虎，药用部位为根、根茎，为贵州苗族、侗族用药。通过铜仁市江口县、凯里市、都匀市、贵阳市白云区、花溪区、安顺市西秀区、六盘水市钟山区、六枝特区、毕节市七星关区、赫章县、大方县、威宁县、纳雍县等地走访调研情况来看，全省各地均有使用习惯，为我省少数民族用药，药用部位多为干燥或新鲜的根茎。综上所述，本标准研究药用部位为根茎。目前收载原植物为万年青的有《江苏省中药材标准》（1989年版，干燥根茎）和《上海中药材标准》（1994年版，干燥成熟果实）。

2.2生长环境及分布万年青多栽培于庭院和村舍附近，常盆栽，或野生于阴湿的林下、山谷。全省各地以及长江流域中下游及其以南各省区均有分布。生长环境如图1所示。

2.3性状特征通过对采集的10批药材样品的大小、形状、颜色、质地、断面等特征进行对比观察和描述，该药材的性状鉴别特征如下：本品呈圆柱形，稍弯曲，长5～18 cm，直径1～3 cm。表面灰黄色或灰褐色，皱缩，具密集的波状环节，并散有圆点状须根痕，偶残留有长短不等的须根；顶端有时可见地上茎痕和叶基，呈淡灰褐色，硬纸质。质韧，折断面不平坦，断面类白色或淡棕色，散有黄色维管束斑点。气微，味微苦、辛。性状特征如图2所示。

2.4鉴别

2.4.1显微鉴别^［5］230通过对万年青常规粉末制片，应用光学显微镜对其组织结构、细胞形态、后含物等进行观察、测量，其特征如下：本品粉末黄白色。草酸钙针晶较多，单个或成束散在，或存于粘液细胞中，针晶多呈棱柱形，少数呈针状，两端尖锐，长40～110 μm，直径4～13 μm。薄壁细胞较大，类圆形、类多角形，纹孔明显。木栓细胞成片，淡黄色，呈多角形，或类方形，壁多微波状，有时呈多层重叠状。显微特征如图3所示。

2.4.2薄层色谱鉴别取编号wnq01-wnq06样品粉末各1 g，加二氯甲烷25 mL，45 ℃水浴回流1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加二氯甲烷1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取编号wnq08样品粉末1 g作为对照药材，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验^［5］59，吸取上述供试品溶液与对照药材溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-氨水（4∶3∶2∶2∶0.8）溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%香草醛硫酸溶液，置105 ℃加热至斑点显色清晰。置日光下检视，供试品色谱中，在与对照药材相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果分离效果较好，斑点较多且清晰。薄层色谱图如图4所示。

2.5水分测定按《中华人民共和国药典》2020年版（通则0832）水分测定第二法进行^［5］114。10批样品测定结果见表2。

2.6总灰分测定按《中华人民共和国药典》2020年版（通则2302）总灰分测定法测定^［5］234。10批样品测定结果见表2。

2.7浸出物测定按《中华人民共和国药典》2020年版（通则2201）浸出物测定法测定^［5］232。分别用水、30%乙醇、70%乙醇、95%乙醇作为溶剂，采用热浸法测定同一批万年青浸出物含量，浸出物测定结果为：30%乙醇＞水＞70%乙醇＞95%乙醇。根据测定结果，用30%乙醇作溶剂，以热浸法测定10批样品，10批样品测定结果见表2。

3讨论

万年青性状特征及显微特征明显，在对万年青横切面显微鉴别进行研究时，发现其硬度大且易粉碎，极不容易切片，故未作进一步研究。水分、总灰分、浸出物测定方法可行。因10批样品酸不溶性灰分平均值为0.61%且每批样品酸不溶性灰分均小于1.0%，无限度制定意义，故未作进一步研究。

薄层色谱鉴别分别考察了水、乙酸乙酯、乙醇、甲醇及二氯甲烷等不用溶剂的提取方法，对展开系统进行了优化调整，也进行了方法学耐用性考察，所得结果斑点清晰、分离效果好、重现性好，说明所建立方法可行。因中国食品药品检定研究院目前没有万年青对照药材标准物质，故未建议列入标准正文，但可以为今后建立万年青薄层色谱鉴别方法时提供参考依据。

查阅相关文献，万年青主要含强心苷类、螺甾烷类成分，还有脂肪酸等成分^［2］。强心苷类主要有万年青苷（rhodexin）A、B、C、D等^［6］；螺甾烷类成分有万年青皂苷元（rhodeasapogenin），异万年青皂苷元（isorhodeasapogenin）等^［7］。

随着中医药现代化与国际化，民族药资源的开发、利用及其保护尤为重要。万年青为贵州省内少数民族常用药，目前省内相关标准未进行收载，为了能更好控制该药材质量和保证用药安全，本研究可以为标准的制定提供一定的参考价值。

参考文献

［1］何顺志，徐文芬.贵州中草药资源研究［M］.贵阳：贵州科技出版社，2007：744.

［2］国家中医药管理局，《中华本草》编委会.中华本草第8册第二十二卷［M］.上海：上海科学技术出版社，1999：151-154.

［3］杨济秋，杨济中.贵州民间方药集［M］.贵阳：贵州人民出版社，1978：455.

［4］贵州省中药资源普查办公室，贵州省中药研究所.贵州中药资源［M］.北京：中国医药科技出版社，1992：895.

［5］国家药典委员会编.中华人民共和国药典（四部）［S］. 北京：中国医药科技出版社，2020：230，59，114，234，232.

［6］王国强.全国中草药汇编（卷一）［M］.3版.北京：人民卫生出版社，2014：35.

［7］南京中医药大学.中药大辞典［M］.2版.上海：上海科学技术出版社，2006：211-213.

（收稿日期：2024-02-22编辑：陶希睿）