消炎止咳胶囊质量标准研究

【摘要】目的：提升消炎止咳胶囊的质量标准。方法：制订民族药黄荆子和胡颓子叶的薄层色谱鉴别以及特殊管理药品罂粟壳中吗啡的 HPLC法含量测定。吗啡含量测定的色谱条件：以Xtimate C8色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）为分离柱；以乙腈-0.01 mol/L磷酸氢二钾溶液 - 0.005 mol/L庚烷磺酸钠溶液（18∶41∶41）为流动相；检测波长为220 nm；柱温为30 ℃；流速1.0 mL/min。结果：薄层色谱鉴别中，供试品色谱在与黄荆子对照药材色谱相应的位置上，紫外灯光（365 nm）下显相同颜色主斑点；在与胡颓子叶对照药材色谱相应的位置上，紫外光灯（365 nm）下显相同颜色的荧光斑点。HPLC 法含量测定中，吗啡的浓度在1.1890～23.7805 μg/mL（R2 =0.9999）范围内与峰面积线性关系良好，平均加样回收率为99.7%（RSD=1.8%）。结论：建立了消炎止咳胶囊黄荆子和胡颓子叶的薄层色谱鉴别、吗啡的含量测定方法，可有效控制该制剂的质量。

【关键词】质量标准；消炎止咳胶囊；黄荆子；胡颓子叶；TLC

【中图分类号】R282.5

【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2024）21-0032-05

DOI：10.3969/j.issn.1007-8517.2024.21.zgmzmjyyzz202421007

Quality Standards of Xiaoyan Zhike Capsules

LIN TinglongLIU Zhihai*PENG QiliWANG DandanJIN Zhao

Guizhou Province Qianxinan Institution for Tnspection and Testing Center，Xingyi 562400，China

Abstract：Objective To improve the quality standard of Xiaoyan Zhike capsules.Methods To establish the thin layer chromatography（TLC）identification of the leaves of the national medicine vitex negundo and folium elaeagni and the determination of morphine in the special management drug poppy shell by HPLC. The chromatographic conditions for determination of morphine content were as follows： C8 column of Xtimate （250 mm×4.6 mm， 5 μm） was used for the separation， the mobile phase was acetonitrile - 0.01 mol/L dipotassium hydrogen phosphate solution - 0.005 mol/L sodium heptane sulfonate solution （18∶41∶41）. The detection wavelength was 220nm. The column temperature was 30 ℃， the flow rate was 1.0 mL/min.Results TLC identification， son of the chromatography with vitex negundo contrast medicinal chromatographic corresponding position， under ultraviolet light （365 nm） show the same color the main spots; The same color spots were observed under ultraviolet light （365 nm） at the position corresponding to the control medicinal materials. The concentration of morphine showed a good linear relationship with the peak area in the range of 1.1890-23.7805 μg/mL （R2=0.9999）， and the average recovery was 99.6% （RSD=1.8%）. Conclusion The method of TLC identification and morphine content determination of Xiaoyan Zhike capsules can effectively control the quality of this preparation.

Keywords：Quality Standard; Xiaoyan Zhike Capsules; Vitex Negundo; Folium Elaeagni; TLC

消炎止咳胶囊为贵州省黔西南州特色民族医药制剂，由胡颓子叶、麻黄、桔梗、黄荆子、太子参、南沙参、百部、穿心莲、罂粟壳组成，功效为消炎、镇咳、化痰、定喘。用于咳嗽痰多、胸满气逆、气管炎。通过对该药品质量标准分析发现，标准较为单一，未对民族药材黄荆子^{［1- 2］}、胡颓子叶^［3-4］建立质量控制点，药味黄荆子、胡颓子叶均为该处方中的君药，对整个制剂的疗效起着至关重要的作用；制剂处方中含有特殊管理药材罂粟壳^［5］，而现有标准中缺乏罂粟壳指标成分吗啡的含量控制。为有效地控制该制剂的量，本实验建立了黄荆子和胡颓子叶的薄层色谱鉴别以及吗啡的含量测定。提高后的质量标准方法操作简便、重现性好、专属性强，结果科学准确。

1材料

1.1仪器Waters e2695型高效液相色谱仪，Empower 色谱数据工作站（沃特世公司）；CPA225D电子天平（北京赛多利斯仪器有限公司，十万分之一）；AUY220电子天平（日本岛津公司，万分之一）；超声波清洗器（天津上达仪器有限公司）；电热恒温水浴锅（天津市泰斯特仪器有限公司）；三用紫外分析仪（上海顾村光电仪器厂）。

1.2试药黄荆子对照药材（中国食品药品检定研究院121277-201802），胡颓子叶对照药材（中国食品药品检定研究院121301-201202），吗啡（中国食品药品检定研究院171201-201324）；消炎止咳胶囊（批号：20220201、20220202、20220203、20220204、20220205 ）均由贵州省德良方药业有限公司生产并提供；乙腈为色谱纯（德国默克），水为超纯水，其余试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1TCL鉴别

2.1.1黄荆子取本品内容物1 g，加乙醇15 mL，超声处理15 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2 mL使溶解，作为供试品溶液，另取黄荆子对照药材0.5 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（通则 0502）试验吸取上述两种溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸丁酯-甲醇-水（3∶1∶1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯光（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱上，显相同颜色的荧光主斑点。如图1。

2.1.2胡颓子叶取本品内容物1 g，加水30 mL，乙酸乙酯30 mL，超声处理30 min，滤过，滤液置分液漏斗中，取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作为供试品溶液。另取胡颓子叶对照药材0.5 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（通则 0502）试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各5～10 μL，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以正已烷-三氯甲烷-甲醇（3∶5∶[KG-*3/5]1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10% 的硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰，置紫色光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。如图2。

2.2吗啡的含量测定

2.2.1色谱条件以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈 - 0.01 mol/L磷酸氢二钾溶液 - 0.005 mol/L庚烷磺酸钠溶液（18∶ 41∶41）为流动相；检测波长为220 nm，体积流量为1 mL/min；柱温30 ℃。

2.2.2对照品溶液的制备取吗啡对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加含5% 醋酸的20% 甲醇溶液制成每1 mL含12 μg的溶液，即得。

2.2.3 供试品溶液的制备取装量差异项下的本品内容物，混匀，研细，取约2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入含5% 醋酸的20% 甲醇溶液50 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250 W，频率20 kHz）30 min，取出，放冷，再称定重量，用含5% 醋酸的20% 甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.4专属性实验分别取对照品及供试品溶液制备项下的对照品溶液和供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，照上述色谱条件测定，结果表明，供试品溶液色谱图中均有吗啡的吸收峰。如图3。

2.2.5线性关系考察取吗啡对照品（中检院 171201-201324）适量，精密称定，置棕色量瓶中，加含5% 醋酸的20% 甲醇溶液分别制成1.1890 μg/mL、2.3780 μg/mL、4.7561 μg/mL、9.5122 μg/mL、19.0244 μg/mL、23.7805 μg/mL共6份对照品溶液，分别精密吸取对照品溶液10 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。该方法的线性回归方程为y=30652x-5201.7，R2=0.9999，线性范围在1.1890～23.7805 μg/mL。

2.2.6精密度实验精密吸取12.4995 μg/mL的吗啡对照品溶液10 μL，注入液相色谱仪，连续测定5次，峰面积的RSD为0.9%，RSD值小于2.0%，精密度较好。

2.2.7重复性实验取消炎止咳胶囊（20220206）内容物6份，按2.5.1 项下“供试品溶液的制备”，同法操作，制备供试品溶液，分别吸取供试品溶液20 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。计算其制剂中吗啡的含量，测定结果见表1 吗啡重复性试验表。结果为：重复6次测定制剂中吗啡含量的平均值64.4721 μg/g，RSD值为1.7%，RSD值小于2.0%，表明该方法重现性好。

2.2.8加样回收率实验分别取消炎止咳胶囊（20220201）内容物6份，混匀，研细，取约1 g （约相当于含吗啡64 μg），精密称定，分别置具塞容量瓶中，精密加入11.89 μg/mL的吗啡对照品溶液5 mL，其余步骤按2.2.3 项下“供试品溶液的制备”，同法操作，制备供试品溶液，分别吸取6份供试品溶液20 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。以线性回归方程y=30652x-5201.7，R2=0.9999，计算其制剂中吗啡的加样回收率，测定数据见表2 吗啡准确度试验表。结果为：吗啡的加样回收率平均值为101%，RSD值为1.8%，表明吗啡的回收率较好。

2.2.9含量测定取5批样品，按2.2.3 项下“供试品溶液的制备”，同法操作，制备供试品溶液，分别吸取供试品溶液20 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。以线性回归方程y=30652x-5201.7，R2=0.9999，计算其制剂中吗啡的含量。测定结果见表3。

3讨论

本实验经过反复比较供试品提取方法和展开条件，优选了正文中黄荆子、胡颓子的 TLC 方法，并做了相应的方法学考察，结果表明专属性强，重现性好，且操作较简便。

3.1含量测定方法考察

3.1.1检测波长选择通过紫外-可见分光光度法，在200～400 nm波长范围内对吗啡对照品溶液进行扫描，最大吸收波长为220 nm，故选择220 nm为检测波长，在此波长处供试品溶液各组分色谱峰达到完全分离。

3.1.2流动相选择在流动相选择上，参考了《中国药典》罂粟壳项下含量测定^［6］流动乙腈-0.01 mol/L磷酸氢二钾溶液- 0.005 mol/L庚烷磺酸钠溶液（20∶40∶40），经试验表明该条件下吗啡对照品的色谱峰较好，但供试品中吗啡色谱峰与其它相邻杂峰分离度较差，将乙腈比例降低，流动相调整为0.01 mol/L磷酸氢二钾溶液-0.005 mol/L庚烷磺酸钠溶液（18∶41∶41）后，供试品中吗啡与其他相邻杂峰达到分离要求，且主成分峰峰形较好，单针运行时间较短。

4结论

消炎止咳胶囊处方药味较多，可消炎、镇咳、化痰、定喘。未对君药胡颓子叶、黄荆子建立质量控制指标；且制剂中含有特殊管理药品罂粟壳，而现有标准中缺乏罂粟壳指标成分吗啡的含量控制。因此为有效地控制该制剂的质量，本实验建立了黄荆子和胡颓子叶的薄层色谱鉴别以及吗啡的HPLC法含量测定。提高后的质量标准可全面地控制该制剂的质量。

参考文献

［1］赵丽娟，周小青，刘宏栋，等.黄荆子化学成分、药理作用、临床应用研究进展［J］.中成药，2023（2）：521-535.

［2］贵州省药品监督管理局.贵州省中药材民族药材质量标准（第一册）［S］.贵州：中国医药科技出版社，2019：64.

［3］黄丽杰，刘伟，崔永霞.胡颓子叶化学成分的研究［J］.中成药，2015，37（4）：797-799.

［4］贵州省药品监督管理局.贵州省中药材、民族药材质量标准［S］.贵州：贵州科技出版社，2003：175.

［5］宋光胜，宋文骞，李宏秋.《中国药典》2020年版（一部）中收载含罂粟壳成方制剂的汇总与分析［J］.药学研究，2023（6）：429-431.

［6］国家药典委员会.中国药典（一部）［M］.北京：中国医药科技出版社，2020：386.

（收稿日期：2024-02-07编辑：陶希睿）