参七虫草方通过ASS1/src/STAT3信号通路改善肺纤维化大鼠的炎症反应

摘要：目的观察参七虫草方对肺纤维化大鼠精氨酸琥珀酸盐合成酶-1（ASS1）/src 酪氨酸激酶（src）/信号转导和转化激活因子3（STAT3）通路相关因子表达的影响，探讨其治疗肺纤维化的作用机制。方法选择120只SPF级SD雄性大鼠，采用随机数字表法分为5组：空白组、模型组、参七虫草方组、吡非尼酮组、精氨酸脱亚胺酶（ADI）腹腔注射组（24只/组）。除空白组以外，4组均使用一次性气管内滴注博来霉素（BLM）诱导制备特发性肺纤维化的大鼠模型。造模成功后，参七虫草组予参七虫草方汤剂（0.423 g/kg）灌胃；吡非尼酮组予溶于生理盐水的吡非尼酮胶囊粉末（10 mL·kg-1 ·d-1）灌胃2 次；ADI腹腔注射组予以2.25 mg/（kg·d）腹腔注射，1次/3 d；空白组、模型组分别以10 mL/（kg·d）生理盐水灌胃；给药疗程28 d。于第7、14、21、28天分4批处死大鼠，分离肺组织并计算肺指数。采用苏木素-伊红、马松染色观察大鼠肺组织的组织病理学；吉姆萨染色分析BALF中不同种类的炎症细胞；采用酶联免疫吸附测定法检测血清趋化因子配体2（CCL2）、转化生长因子β1（TGF-β1）的含量；蛋白免疫印迹法测定肺组织src、p-srcTry529、STAT3、p-STAT3Try705的蛋白表达；采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术检测肺组织ASS1、src、STAT3的表达水平。结果参七虫草组、吡非尼酮组和ADI腹腔注射组各时间点中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞均低于同一时间点的模型组（Plt;0.05）。在相同时间点，参七虫草组、吡非尼酮组和ADI腹腔注射组大鼠血清CCL2、TGF-β1水平均低于模型组（Plt;0.05）。参七虫草组、吡非尼酮组和ADI 腹腔注射组的p-srcTry529、p-STAT3Try705蛋白表达水平及肺组织ASS1、src、STAT3 mRNA均低于同一时间点的模型组（Plt;0.05）。结论参七虫草方可以缓解大鼠的肺纤维化程度，其机制可能通过调控ASS1/src/STAT3信号通路的活化从而缓解BLM大鼠肺纤维化的炎症反应。

关键词：参七虫草方；精氨酸；特发性肺纤维化；ASS1/src/STAT3信号通路；炎症反应

特发性肺纤维化（IPF）是一种慢性、进行性和纤维化的肺退行性疾病［1］。其发生发展过程是肌纤维细胞（MyoF）过度聚集和细胞外基质（ECM）沉积，正常肺组织被替换，肺泡结构被破坏，肺顺应性降低，气体交换不畅，最终引起呼吸衰竭，甚至死亡［2， 3］。临床上被批准用于治疗IPF的药物只有吡非尼酮和尼达尼布，其只能延缓肺功能的下降，并不能延长患者的生存期［4］。IPF患者临床症状多呈慢性进行性加重，其形成与炎症细胞和免疫效应细胞在间质聚集有密不可分的关系，此过程中诱发肺泡壁血管和气道损伤，形成不可逆转的肺纤维化。因此，及时干预IPF疾病初始阶段的炎症反应、免疫失衡、肺组织损伤修复和血管重塑的动态过程，是未来IPF综合防治措施的新目标。