微生物菌剂对叶菜废弃物堆肥过程的影响

2024-06-16 12:52陈芙蓉熊伟仡尹娇张小卓韩宇邓毅书
中国农业科技导报 2024年3期
关键词:微生物菌剂

陈芙蓉 熊伟仡 尹娇 张小卓 韩宇 邓毅书

摘要:为研究微生物菌剂对叶菜废弃物堆肥过程中相关理化指标之间的动态变化的影响,以叶菜废弃物为主料,玉米秸秆为辅料,添加VT-1000、群林发酵菌、反应堆专用菌种001、SUKAAgre-C3009/C 共4种外源微生物菌剂进行发酵,以不添加菌剂为对照,测定相关指标并进行综合对比分析。结果表明,发酵第24天时,所有堆体均达到完全腐熟,添加菌剂处理的堆体种子发芽指数(germination index,GI)均明显高于对照处理,其中,添加VT-1000菌剂的堆体GI最高,为113%;添加菌剂的堆体在第2天均可升温至60 ℃以上,且可保持6~8 d的高温期(≥50 ℃),比对照组多3~5 d,其中,添加VT-1000菌剂的温度最高,达69.9 ℃,高温持续时间为8 d,有效解决了叶菜含水率高影响堆肥品质的问题;各处理养分含量分析表明,添加VT-1000菌剂处理的有机质降解率和全氮含量最高,分别为21.0%和25.8 g·kg-1。施用添加VT-1000菌剂的自制有机肥能显著提高土壤有机质和全效养分含量,可以有效改善土壤的理化性质,且自制有机肥的成本最低,仅为其他2种肥料的1/10左右。以上结果表明,添加微生物菌剂能促进堆肥腐熟,提高堆体温度,延长高温期持续时间,提升堆肥品质。综合来看,添加VT-1000菌剂的效果最好。

关键词:叶菜废弃物;微生物菌剂;堆肥腐熟;堆肥品质

doi:10.13304/j.nykjdb.2022.0826

中图分类号:S141.4 文献标志码:A 文章编号:1008‐0864(2024)03‐0146‐09

蔬菜是我国种植业中仅次于粮食的第二大产业。据云南省统计局数据,2020年云南省蔬菜产量达2.5×107 t[1],各类蔬菜的尾菜比率为16.5%~63.5%,平均达33.6%,由此估算,2020年我国蔬菜废弃物总产量约为2.52×108 t,2021年云南省蔬菜废弃物总产量约为9.24×106 t[2‐3]。这些蔬菜废弃物大部分被弃置在蔬菜产区、集散点等,利用率较低,且其含水量较高,若不及时处理,很快就会腐烂变质并产生大量渗滤液,进而对土壤、河流、湖泊及地下水等造成面源污染[4]。目前,我国大部分蔬菜种植区常以深埋、堆弃等方式处理蔬菜废弃物,也有部分地区采用自然沤肥、产沼等方式进行处理[5],固废利用率较低且一般不能满足无害化处理要求。因此,需要针对蔬菜废弃物的特性采取更加有效的资源化处理方式。根据国内外经验,有机固体废弃物的处理应以资源化利用为主导方向,主要的途径就是通过生物堆肥处理实现废弃物的减量化、无害化和资源化[6]。在堆肥过程中添加一定量外源菌剂,有利于加快堆体升温,促进有机固体废弃物分解,延长高温持续时间[7]。研究表明,在畜禽粪便好氧发酵过程中加入一定量的发酵菌剂可显著缩短发酵时间[8]。Duan 等[9]研究发现,在牛粪和麦秸混合堆体中添加0.5%枯草芽孢杆菌可显著提高堆肥中总有机碳和腐殖质碳的含量,并明显提高堆肥产品的质量。白慧[10]研究表明,接种复合菌剂对蔬菜废弃物堆肥中的有机质降解有显著作用,根据接种菌剂类型的不同,对相同物料配比的堆肥也具有不同的效果。李玮琳等[11]研究发现,接种抗生素降解菌剂可显著促进猪粪堆肥升温,加速去除堆体水分,增加堆肥产物中总养分含量和萝卜种子发芽指数(germination index,GI),还能提高堆肥产物中稳定性有机质含量。已有的关于添加不同种类外源菌剂对堆体发酵的影响研究较为深入,但都是在基于堆体中有畜禽粪便的前提下。云南蔬菜产量位居全国前列,但由此产生的蔬菜废弃物利用率却较低,不利于实现资源化利用。为监测不同菌剂对蔬菜废弃物发酵的影响,通过测定相关指标,探究堆肥过程中相关理化性质的动态变化,为蔬菜废弃物提供一种高效、低成本的处理方式。本研究以叶菜废弃物为原料,用玉米秸秆调节碳氮比(C/N),在无畜禽粪便加入的前提下,研究添加不同菌剂条件下叶菜废弃物堆体的温度、含水率、pH和有机质等的变化特征,分析添加不同菌剂对有机质降解速率、堆体养分吸收等的影响,探究对堆肥效果最好的菌剂品种,并优化堆肥条件,为实现叶菜废弃物低成本高效率、原位处理、就地还田的生态处理方式提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 堆肥原料 供试叶菜类蔬菜废弃物取自云南省蔬菜主产区,用切割机切割至2~4 cm,并进行晾晒处理,水分晾晒至70%±5%。玉米秸秆取自云南省玉米主产区,用粉碎机粉碎至1~2 cm。供试原料的理化性质如表1所示。

1.1.2 微生物菌剂 试验所用微生物菌剂共4种,分别为:①北京沃土天地生物科技有限公司提供的VT-1000堆肥接种剂,主要菌群为侧拖芽巧杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌、黑曲霉,活菌数≥2×109 CFU·mL-1;②北海群林生物有限公司提供的发酵菌,主要菌群为枯草芽孢杆菌、细黄链霉菌、光合细菌等,活菌数≥2×109 CFU·mL-1;③山东天合生物工程技术有限公司提供的反应堆专用菌种001,主要菌群为双歧杆菌等,活菌数≥2×109 CFU·mL-1;④山东苏柯汉生物工程股份有限公司提供的SUKAAgre-C3009/C发酵剂, 主要菌群为40% 的凝结芽孢杆菌、20% 巨大芽孢杆菌、20%棕色固氮菌、10%胶质芽孢杆菌、5%米曲霉和5%的长柄木霉,活菌数≥3×109 CFU·mL-1。

1.1.3 供试土壤及肥料 供试土壤为云南农业大学后山试验地红壤土。取0—20 cm的土壤风干、捣碎、过0.5 cm筛,备用,同时取一部分过1 mm筛待测。土壤理化性质为:pH 6.92,可溶性盐含量即电导率(electrical conductivity,EC)0.79 mS·cm-l,有机质25.80 g·kg-1,全氮1.39 g·kg-1、全磷1.87 g·kg-1、全钾2.71 g·kg-1、碱解氮126.80 mg·kg-1,速效磷12.30 mg·kg-1,速效钾142.30 mg·kg-1。

供试肥料:ZF为添加VT-1000菌剂的自制有机肥,有机质482.7 g·kg-1,全氮23.17 g·kg-1,全磷11.79 g·kg-1,全钾29.37 g·kg-1;市售有机肥(SF),曲靖市枫茂鸭业发展有限公司生产,有机质462.30g·kg-1,全氮35.87 g·kg-1,全磷27.24 g·kg-1,全钾22.20 g·kg-1;蔬菜复合肥(HF),青海云天化国际蔬菜复合肥有限公司生产,复合肥的养分含量为N≥15%、P2O5≥5%、K2O>25%。

1.2 试验设计

1.2.1 堆肥发酵试验 堆肥环境温度为21~33 ℃,湿度为40%~90%。采用四周均匀打孔的泡沫箱为好氧发酵装置(长60 cm、宽45 cm、高36 cm,容积约100 L)进行堆肥。试验共设4种外源添加菌剂处理,分别为VT-1000 堆肥接种剂(F1)、群林发酵剂(F2)、反应堆专用菌种001(F3)和SUKAAgre-C3009/C(F4),微生物菌剂分别添加(按干物质量计算)4‰、4‰、4‰和1.3‰,F1、F2、F3活菌数≥2.9×107 CFU·mL-1,F4活菌数≥9.5×107CFU·g-1,以不添加菌剂为对照(CK),每个处理3个重复,共15个堆体。堆肥物料为蔬菜废弃物和玉米秸秆,将物料按照C/N 为25∶1 的比例充分混匀,调节含水率为60%左右,接种微生物菌剂混匀后填入好氧发酵装置。发酵箱随机摆放,箱与箱间隔0.5 m。试验周期为24 d,每3 d翻堆1次,充分混匀,共翻堆7次。取样方法选用多点混合取样法,上、中、下3层,前、后、左、右、中5点取样,每次每处理取样前样品充分混合,经四分法取约300 g样品。一部分样品于4 ℃冰箱中保存,用于测定pH、EC和GI等指标;另一部分样品风干后粉碎过1 mm 筛,用于测定样品中有机质(organic matter,OM)、全氮(total nitrogen,TN)、全磷(total phosphorus,TP)和全钾(total potassium,TK)等指标。

1.2.2 土壤肥效试验 试验于2021年9—10月在云南农业大学后山温室大棚内进行。根据等氮原则设计施肥,纯氮(N)的施用量为0.2 g·kg-1土,试验设计及施肥量见表2。土壤肥效试验设置3个处理,分别为施加自制有机肥(ZF)、施加市售有机肥(SF)、施加蔬菜复合肥(HF),以不施肥为对照(CK1),每个处理设3 个重复,共12 盆,每盆4株。每盆装(2 000.00±0.01)g风干土,按表2将土壤和肥料混匀后,置于花盆中压实,放置1 d,用蒸馏水浇透后,播种小白菜种子,每盆4穴,每穴5粒种子。播种完成后,每盆覆盖约1 cm厚的干土,置于保温大棚内,定期浇水,试验田间管理措施一致。待白菜采收后,土壤自然风干过筛后测定有机质、全氮、全磷、全钾含量。

1.3 项目测定与方法

1.3.1 物理指标测定 采用TP101金属探杆温度计每天定时测定堆体温度,分别测定堆体上层(0—12 cm)、中层(12—24 cm)、下层(24—36 cm)的温度,同一深度5个测样点温度的平均值作为堆肥该深度的温度,最后将堆体上、中、下层的温度取平均值作为堆肥的温度,同时记录当天大棚内的温度。

采用烘干法测定含水率:取3个干净铝盒,在105 ℃条件下烘2 h至恒重,称重记为W1,称取堆肥鲜样放入已经恒重的小铝盒中,称重记为W2,将其放入105 ℃条件下鼓风干燥至恒重,称重记为W3。根据下列公式计算含水率。

含水率=(W2-W3)/(W2-W1)×100% (1)

取5 g堆肥样品与50 mL去离子水混匀(堆肥样品∶水=1∶10),室温下在180 r·min-1转速的摇床上连续振荡30 min,再静置30 min,取上清液,用pH计(PHS-3C,上海仪电科学仪器股份有限公司)和EC 计(STARTER Series,上海邦典机电设备有限公司) 分别测定酸碱度(pH)和电导率(electricity conductivity, EC)。

1.3.2 化学指标测定 参照NY/T 525—2021《有机肥料》[12]的方法分别测定堆体有机质、全氮、全磷和全钾含量。

称取10 g鲜样,按照固液比1∶10(g·mL-1)加入100 mL 去离子水,在25 ℃下200 r·min-1 振荡30 min,将混合液过滤后备用。取10 mL上清液于垫有2张定性滤纸的9 cm培养皿中,其上均匀放入10粒颗粒饱满的黄瓜种子,在(25±2) ℃的培养箱中避光培养48 h,统计发芽率并测量主根长,同时以蒸馏水作空白试验。根据下列公式计算种子发芽指数(germination index,GI)。

GI=(有机肥浸提液组种子发芽率×种子根长)/(对照组种子发芽率×种子根长)×100% (2)

土壤有机质含量依据NY/T 1121.6—2006《土壤检测 第6部分:土壤有机质的测定》[13]中的滴定法测定。土壤全氮含量依据NY/T 1121.24—2012《土壤检测 第24部分:土壤全氮的测定 自动定氮仪法》[14]中的方法测定;土壤全磷含量依据NY/T88—1988《土壤全磷测定法》[15]中的方法用分光光度计进行测定;土壤全钾含量依据NY/T 87—1988《土壤全钾测定法》[16]中的方法用火焰原子吸收仪进行测定。

1.4 数据处理

采用Microsoft Excel 2016软件对数据进行初步统计与分析,采用SPSS 20.0软件对试验数据进行单因素方差分析(One-way analysis of variance,ANOVA)、差异显著性检验(P<0.05),采用Origin2021软件作图。

2 结果与分析

2.1 微生物菌剂对堆体温度及含水率的影响

由图1可知,所有堆体在0~5 d时温度迅速升高,并在5~10 d时维持高温,10 d后温度迅速下降并逐渐接近室温。在第1天时,F2、F4处理的堆体温度即达到50 ℃以上,分别为51.4、50.3 ℃;第2天时,4 个处理均达到50 ℃以上,分别为62.5、66.8、61.5和63.8 ℃;CK在发酵第6 天堆体温度才达到50 ℃以上,为50.7 ℃。CK、F1、F2、F3 和F4处理的最高温度分别为58.3、69.9、66.8、65.4、67.2 ℃,堆体温度在50 ℃以上分别保持了3、8、8、6和8 d。其中,F1的堆体温度最高,高温持续时间为8 d。随堆肥时间的推进,0~3 d时含水率逐渐升高,在第3天达到最高,之后持续下降。24 d时,CK、F1、F2、F3 和F4 的含水率分别为34.1%、20.5%、25.4%、24.9% 和28.9%,添加菌剂处理的含水率均低于未添加菌剂处理。以上结果表明,添加菌剂能加快堆体升温速度,提高堆体温度,延长高温持续时间,并明显降低堆体含水率。

2.2 添加微生物菌剂处理下堆体pH 和EC 的动态响应分析

pH和EC的变化趋势如图2所示,所有堆体的pH呈先升高后降低趋势,在0~3 d时pH增长速度快,3~18 d时增长速度慢,均于18 d时达到最高,CK、F1、F2、F3和F4处理的最高pH 分别为8.09、8.25、8.21、8.18和8.14;18 d之后逐渐下降,至24 d时,CK、F1、F2、F3 和F4 处理的pH 分别下降至7.79、8.13、8.04、8.08和7.88,各处理pH增长率分别为14.6%、19.9%、16.4%、21.9% 和14.7%。随着堆肥时间的推进,所有堆体EC 值均呈逐渐上升趋势。24 d时,CK、F1、F2、F3和F4处理的EC值分别为1.48、1.42、1.35、1.42 和1.49 mS·cm-1,与初始物料EC值相比分别增加19.4%、21.4%、19.5%、31.0%和31.1%。以上结果表明,添加菌剂可提高有机质的降解率,并可促进有机酸和无机盐的分解。

2.3 微生物菌剂对堆体养分含量的影响

由图3和表3可知,所有堆体有机质含量均呈先下降后趋于平缓的变化趋势。24 d时,CK、F1、F2、F3、F4 处理的有机质含量分别为61.8%、53.3%、56.0%、58.1%、56.8%,与初始物料相比分别降低7.15%、21.0%、16.3%、11.7%、14.1%,降幅依次为F1>F2>F4>F3>CK,添加菌剂处理的有机质降解率均大于对照,其中,F1处理有机质降解率最高。各处理全磷和全钾含量均随堆肥时间的推进呈逐渐上升趋势。24 d时,CK、F1、F2、F3和F4处理全磷和全钾含量分别为6.30、8.49、7.89、6.71、8.11 g·kg-1 和25.1、28.7、27.4、26.8、26.6 g·kg-1,相较于初始物料分别增加33.2%、63.0%、48.3%、55.3%、39.6% 和45.8%、67.4%、56.9%、61.0%、54.2%,F1处理全磷和全钾含量的增幅均明显高于其余处理。全氮含量变化则随堆肥时间推进呈先降低后升高趋势,3 d时各处理全氮含量下降到最低,24 d 时全氮含量达到最高,分别为22.9、25.8、25.1、23.8和24.7 g·kg-1,与初始物料处理相比分别增加30.6%、47.7%、40.1%、41.1% 和36.4%,添加菌剂的处理全氮含量增幅均高于对照,其中F1处理全氮含量增幅明显高于其余处理,表明添加VT-1000菌剂的堆体有机质降解最多,营养成分相对含量增加也最多。以上结果表明,添加菌剂能加快有机质降解速率和物料腐熟速度,缩短堆肥周期,且显著提高腐熟物养分含量。添加菌剂处理的有机质含量与对照有显著差异,对总体营养成分影响显著,有机质的降解与营养成分相对含量呈显著性相关。添加VT-1000菌剂效果最佳。

2.4 微生物菌剂对堆体种子发芽指数的影响

种子发芽指数(GI)的变化趋势如图4所示,所有堆体GI前期增长速度较快,后期趋于平缓。6 d 时,CK、F1、F2、F3 和F4 处理的GI 分别为33.2%、75.5%、62.1%、59.8% 和64.9%;12 d 时,F1、F2处理的GI均达到80%以上,分别达90.6%和87.5%;18 d时,添加菌剂的处理均已完全腐熟(GI>80%);24 d时,CK、F1、F2、F3和F4处理的GI分别为80.4%、113.0%、101.0%、105.0%和97.0%。以上结果表明,添加微生物菌剂可以加快堆料的降解,促使堆肥在短时间内达到腐熟,其中F1处理的腐熟时间最短,腐熟度最高。

2.5 土壤肥效影响及经济效益分析

由表4可知,所有处理土壤有机质含量均增加,CK、ZF、SF、HF 处理分别增加29.07%、136.43%、121.90%、97.95%,增加量分别为7.50、35.20、31.45、25.27 g·kg-1,ZF 处理土壤有机质含量及增加量均最高,显著高于其他3个处理。所有处理土壤全氮含量均显著增加,CK、ZF、SF、HF处理分别增加2.88%、86.21%、59.23%、58.27%,ZF处理土壤全氮含量及增加量均最高,显著高于其他3个处理。ZF、SF、HF处理土壤全磷含量均增加,分别增加3.21%、22.19%、1.07%,CK土壤全磷含量降低16.49%。ZF处理土壤全钾含量增加17.22%,显著高于其他3个处理,SF、HF、CK处理土壤全钾含量分别降低33.09%、7.75%、19.56%。以上结果表明,施用自制有机肥能显著提高土壤有机质和全效养分含量,可以有效改善土壤的理化性质。

由表5可知,在等氮量下ZF、SF、HF的肥料成本分别为864.90、10 263.00、9 000.00元·hm-2,表现为SF>HF>ZF,表明自制有机肥的成本最低,仅为其他2种肥料的1/10左右。由此可见,自制有机肥不仅能显著提高土壤中的有机质和全效养分含量,提升土壤肥力,改善土壤质地,还能极大地降低肥料投入和土壤改良的成本,减少农业生产投入。

3 讨论

3.1 添加微生物菌剂条件下堆体发酵阶段理化性质变化

本研究中,添加微生物菌剂的处理在堆肥第2天均可升温至60 ℃以上,且在50 ℃以上保持了6~8 d,未添加菌剂的对照在发酵第6 天温度升至50.7 ℃,在50 ℃以上仅保持3 d;添加菌剂处理最高温度比不添加菌剂处理高出7.1~11.6 ℃,高温持续时间长3~5 d,表明接种微生物菌剂可加快堆体升温速度,提高堆体温度并能延长高温持续时间,这与李天枢等[17]的研究结果一致,造成这种现象的原因主要是由于微生物菌剂在一定程度上增加了堆料中的微生物数量,加速了有机物质的分解,大量的代谢能量促使堆体温度迅速升高,缩短了达到稳定的时间,加快了腐熟进程[18]。从含水率来看,随着发酵的进行,含水率呈先升高后下降的趋势,且处理之间变化趋势基本一致。这是由于堆肥初期叶菜废弃物释放水分导致含水率升高,随着堆肥的进行,堆体温度迅速升高,水分大量蒸发,同时微生物活动强度高,其代谢需要消耗大量的水分,使物料的含水率急剧减少,高温和高温持续时间能有效解决叶菜废弃物含水率过高影响堆肥品质的问题。

堆肥过程中pH的动态变化也是评价堆肥进程的指标之一。葛梦娇[4]、耿凤展[19]和徐路魏[20]的试验证明,堆肥是堆体逐渐酸化的过程。本研究中pH变化趋势与该结论有一定差异,在堆肥初期及高温期,各处理pH迅速升高,随着堆肥的进行铵态氮一部分经硝化作用转化为硝态氮,另一部分则形成NH3挥发,导致pH有所下降,最终各处理pH在7.88~8.13,均满足国家有机肥腐熟标准(pH 5.5~8.5)[14]。EC反映好氧发酵物料中可溶性盐的含量,可以反映堆体中可溶性盐对植物的毒害作用,一般认为,堆体EC超过4 mS·cm-1时会对作物产生毒害作用[21‐22],在低于4 mS·cm-1 时则可以安全使用。各处理EC随着堆肥的进行呈不断升高的趋势,是由于在堆肥初期大量小分子有机酸和无机盐物质被微生物分解利用,导致EC升高,随着发酵的进行,硝化细菌利用有机物进行矿化作用产生NO-3,使EC 进一步升高。堆肥结束后各处理EC 小于4 mS·cm-1,均在安全使用范围内。

3.2 添加微生物菌剂条件下堆肥质量差异评价

通常情况下,发酵过程中有机质的含量呈下降趋势,且高温期有机质的降解速度最快[23]。本研究表明,4种菌剂处理的有机质降幅均明显高于对照,其中F1处理有机质分解转化速率最快,可能是添加微生物菌剂的处理提前进入高温期,在高温期时,有机物在微生物作用下快速降解,进入降温期后,含水率降低,微生物活性减弱,导致剩余有机物的降解减弱,有机质含量逐渐趋于稳定。

在堆肥初期,各处理全氮含量呈下降趋势,是由于在堆肥过程中一部分硝态氮会转化为铵态氮挥发,也有部分会随着渗滤液等途径损失,导致全氮含量下降,这与莫舒颖[24]在蔬菜废弃物堆肥中接种菌剂的研究结果一致。随着堆肥的进行,虽然有机质降解速率减小,总干重下降幅度减小,总氮上升速率也减小,但由于有机质的降解量大于氮素的损失量,所以总体来说总氮含量是增加的。本研究中,添加微生物菌剂的处理全氮增长率均高于对照,其中F1处理全氮增长率最高,这是由于添加微生物菌剂可以有效控制发酵过程中的营养代谢过程,减少NH3的损失,促进氮素向硝态氮的转化,固定了堆肥中更多的氮素营养。另外,各处理全磷和全钾含量也随着堆肥的进行不断增加,添加微生物菌剂的处理全磷和全钾增长率均高于对照,其中F1处理全磷和全钾含量增幅均明显高于其余处理,这与劳德坤等[25]在蔬菜废弃物堆肥中接种微生物能够缩短堆肥周期、提高氮磷钾等养分含量的研究结果一致。

堆肥初期,GI有所下降,是由于堆肥中有机物质被微生物分解产生了有机酸抑制种子的生长。从第3天开始,添加了微生物菌剂的处理GI迅速升高,是由于有机酸被矿化形成铵态氮,铵态氮进一步转化成硝态氮,从而降低了堆肥的毒性,而对照组到发酵第6天才呈迅速升高趋势,表明添加微生物菌剂可以加快堆肥腐熟的速度。发酵第12天,F1、F2处理最先达到完全腐熟,发酵18 d后,除CK外均达到完全腐熟,发酵第24天时,各处理均达到完全腐熟,表明添加微生物菌剂可加快物料腐熟速率。其中,F1处理GI最高,为113%,表明堆肥物料腐熟程度最高,腐熟效果最好,这与刘成琛等[26]、王若斐等[27]的研究结果一致。

参 考 文 献

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(责任编辑:胡立霞)

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