临夏州脱毒马铃薯原原种高产优质繁育技术研究

夏正林，任佐录，王慧莉，刘小琅，徐国平，丁国文，朱琳花，何小琴

（临夏回族自治州农业科学院，甘肃 临夏 731100）

马铃薯属茄科1 a 生草本植物，是世界第四大粮食作物，可作为粮食和工业原料。临夏州气候冷凉，适宜马铃薯的生长。生产的马铃薯产量高、表皮光滑、色泽鲜亮、口感风味较好，深受广大消费者的喜爱[1]。马铃薯是临夏州第二大粮食作物，种植面积2.67×104hm2，在保证全州粮食安全和脱贫致富中发挥了重要的作用[2]。然而马铃薯是无性繁殖作物，种植需要切块，容易造成病毒侵染，随着种植世代的增加，病毒会逐渐传递并积累，以致马铃薯品种退化，产量降低、抗病性弱、品质差[3]。马铃薯组织脱毒培养技术是解决品种退化、提高产量的主要途径之一，马铃薯原原种的繁育是这项技术的高效普及应用[4]。为了提高马铃薯原原种繁育的产量和质量，增加繁殖系数、降低生产成本、缩短生长周期、扩大生产规模，临夏州农业科学院在北塬现代试验站组培实验室、原原种繁育网棚内，开展了脱毒马铃薯原原种高产优质繁育技术研究，利用茎尖脱毒技术、组织培养技术、组培苗切断快繁技术、脱毒苗移栽和网棚栽培技术，研究出适用于临夏州地区马铃薯脱毒原原种繁育生产关键技术，以期为种植户提供技术参考。

1 马铃薯脱毒组培苗

1.1 材料准备

选择适宜在临夏州种植高产优质的马铃薯品种。在田间选取具有本品种的各种性状、长势好、无病害、单株结薯多、商品薯率高的健康单株[5]。

1.2 马铃薯茎尖剥离

将收获的健康种薯放置在室内暗光条件下进行催芽处理，长白色簇生芽后置于自然散射光下继续萌芽，芽长1 cm 时取芽[6]。取芽用纱布包裹，置于自来水下冲洗30 min，无菌水冲洗3次，用滤纸吸干芽上的水分，再用质量分数为0.1%～0.2%的氯化汞溶液浸泡5 min（不断摇晃），无菌水冲洗3次，最后用质量分数为75%的酒精浸泡3 s，无菌水冲洗3 次，然后在无菌操作台上将芽接种到有MS 培养基的培养瓶中（每个瓶中只有1 个芽）。放置在组培室，培养温度20～22 ℃，光照强度2 000 lx，每天光照12 h。待芽长到一定长度，变温处理（22～34 ℃），每隔1 h 变温1 次，处理2～3 周。在超净工作台上用40 倍解剖镜取茎尖分生组织0.1～0.2 mm，接种于MS+6BA 1 mg/L+GA 30.2 mg/L 活性炭0.5 g/L 培养基上，每瓶接种1个茎尖组织，置于室内培养，直至长出完整的植株。

1.3 病毒检测

选取1～2 个月能长成3～4 片叶的小植株，单节切断扩繁，并标明编号，扩繁3～4瓶后，取其中一瓶进行病毒检测。

1.4 脱毒苗快繁

经病毒检测,确认不带病毒的试管苗，在生产之前还需要在田间种植，进行真实性鉴定。通过田间种植，观察是否符合所繁品种全部生物学特性及农艺性状。确认符合所繁育的种薯性状后才能进行扩繁生产。脱毒苗快繁采用单节切段方法，将鉴定完全脱毒的组培苗剪成带1～2 个腋芽的茎段,均匀接种到MS 培养基上，瓶装培养基可接15～20个茎段。组培室培养温度（25±2）℃，湿度75%，光照强度初期1 000 lx，1周后2 000 lx，壮苗在4 000 lx、光照时长12 h/d 的条件下培养25 d，组培苗长约10 cm，继续进行切断扩繁。

2 网棚建立

马铃薯原原种生产网棚可选择建立在海拔高度为1 700～2 400 m、气候冷凉、昼夜温差大、光照充足、通风性好、砂壤土、交通便利的地方，并且要求在10 m 范围内没有马铃薯病虫害的侵染源，保证水源充足、排灌良好。网室构架采用镀锌钢管，拱高3.2 m，网室长60 m、宽8 m。网棚上盖塑料棚膜，用于保温保湿；搭设40～60目的防虫网，防止蚜虫等进入，传播病毒；脱毒苗移栽后前期较敏感，需配置遮阳网；喷灌设施，按照网室面积安装吊挂微喷系统，入口设缓冲间，工作人员进入时进行消毒，预防病虫害人为传播。

3 苗床准备

网棚地块除去杂草、整平，配方施肥并喷施杀虫杀菌剂。在整理好的地表面用无菌新砖分成小区，网棚中间及沿棚长方向用砖砌出人行道。每个小区地面铺一层纱网，将基质（蛭石等，颗粒直径2～4 mm）倒入小区内，厚度为6～8 cm，浇透水分，再翻松、刮平基质，并根据行距划线。定植组培苗前，喷施辛硫磷，关闭棚口，使棚内温度升高，持棚内温度达60 ℃左右杀菌6～7 d。

4 炼苗移栽

临夏州4月中旬温度上升，马铃薯脱毒组培苗可进行炼苗移栽。将生长20 d、无污染、健壮的脱毒瓶苗从组培室转移到网棚，均匀摆放，3 d 后打开瓶盖，炼苗4 d，脱毒苗适应外部环境，叶片增绿，茎秆粗壮即可移栽。脱毒苗移栽前,网棚蛭石充分浇水，网棚需要75%透光率的遮阳网遮阴。移栽时将脱毒苗从瓶中取出，轻轻去掉根部培养基，再用自来水冲洗掉残留部分。打孔移栽，株距为5 cm，行距为9 cm。移栽时，用镊子轻轻夹住组培苗根部插入打好的基质孔中，用手压实根部蛭石，移栽后及时浇水。

5 网棚管理

5.1 水分管理

组培苗生长前期需要大量的水分，在移栽后1周保证网棚空气湿度，使组培苗缓苗后处于挺拔的状态，及时补换。为了减少水分蒸发，幼苗生长前期需要搭建小拱棚。5～7 d 后，幼苗缓苗结束，揭去拱棚的薄膜，并进行水分控制。棚内水分蒸发较快，因此要及时补充水分，为保持苗床的湿润，要求在前期要勤浇水，每天浇水2 次，采用小型喷灌设备或者微喷带进行灌溉，人工浇水作为补充，使基质湿度保持在50%～60%。等到小苗根系发达后，每隔2～3 d 浇水1 次，生长后期逐渐减少水分供应，收获前2～3周停止浇水。

5.2 营养管理

组培苗生长的栽培基质是蛭石，所含养分较少，因此苗子生长所需养分通过后期追施。定植苗成活后，离地种植的要每间隔7 d 喷施一次MS 大量元素及微量元素营养液。待苗长到40 d 左右，隔7～10 d 喷施1 次0.2%尿素、0.2%磷酸二氢钾，代替营养液交替使用，降低成本。收获前2～3周停止浇营养液。

5.3 光温管理

试管苗移栽初期加盖遮阳网，防阳光灼伤小苗和水分蒸发。后期直接利用自然光照，促进光合产物的积累。网棚温度＞26 ℃时，需要打开拱棚四周进行通风降温，温度＜10℃时，需要放下网棚外保温帘。

6 病虫害防控

6.1 晚疫病

晚疫病属于真菌性病害，主要侵害叶、茎和薯块。茎部或叶柄染病现褐色条斑。湿度大时病斑周围有白霉，尤以叶背最为明显；干燥时病斑变褐、质脆、不见白霉。病害的发生与生长环境中的气象因子（如温度、湿度及降水）有密切关系。相对湿度达到85%以上，温度为20～23 ℃易发病。病菌借助气流传播再进行侵染，形成发病中心。防治措施：发病初期用58%甲霜灵锰锌粉剂500 倍液，或30%百菌清500 倍液喷雾防治，每隔7 d喷施1次，连续喷施3次。

6.2 早疫病

早疫病是制约马铃薯生长的主要病害之一，为害叶片、叶柄、茎和薯块。在叶上可形成褐色病斑，有清晰的同心轮纹。温度15℃以上、相对湿度80%以上时开始发病。防治措施：用70%代森锰锌可湿性粉剂600倍液喷施防治早疫病，每隔7 d喷1次，连续配施3 次。

6.3 蚜虫

蚜虫通常在马铃薯叶的背部吸取汁液，从而使叶片卷皱变形，直至干枯，并在取食过程中传播病毒，间接为害马铃薯植株。防治措施：定植后10 d，用10%吡虫啉可湿性粉剂2 000 倍液防治蚜虫，每隔7～10 d 喷药1次。

7 原原种收获

扦插的试管苗生长60～90 d后，薯块长至1.5 g以上时即可收获。在收获前2～3周停止浇营养液和水，促进薯块表皮老化，以提高薯块的耐贮藏性。蛭石等基质栽植的原原种要人工手工收获。收获后，按脱毒种薯单薯质量分级，并装入网袋中，内外挂好标签标注品种、等级、数量。

8 原原种贮藏

原原种入窖前，打扫干净窑内卫生，可以用40%的甲醛和高锰酸钾熏蒸消毒。1 d 后打开门窗通风，入窖后，贮藏库内温度逐渐降至2 ℃后，块茎进入休眠状态，生理活性降到最低，产生热量很少。定期检查库内温湿度，防止种薯受热或受冻。播种前20 d，打开窖库通风换气，提高窖温，保证块茎已经渡过休眠期，促进发芽。