14种消毒剂体外抑菌效果评价

邓淼汐 蒋清蓉 邱荣斌

基金项目：蛋鸡产业技术创新体系建设项目（项目编号：2022ZYDF077）

摘  要：为了筛选体外抑菌效果较好的消毒剂，本文对碘制剂类、季铵盐类和复方戊二醛类这三类共14种消毒剂的体外抑菌效果进行评价。采用最小抑菌浓度法对14种消毒剂杀灭大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的效果进行对比。结果显示：14种消毒剂中，季铵盐类消毒剂对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的消毒效果最好，其次是复方戊二醛类，最后是碘制剂类。其中季铵盐类消毒剂月苄三甲氯铵对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度最小，抑菌效果最好，其次是癸甲溴铵，再次是苯扎溴铵。本试验为后续开展鸡场带鸡消毒试验选择消毒剂提供了参考依据。

关键词：消毒剂；体外抑菌；效果

中图分类号：S859.79 文献标志码：A 文章编号：1001-0769（2024）02-0030-04

消毒剂是指能够杀灭传播媒介中的病原微生物，从而达到无害化要求的制剂。其主要作用机理是改变微生物赖以生存的环境，使微生物的内外结构发生改变，导致主要代谢机能出现障碍，生长发育受阻，从而丧失活性失去致病力[1]。不同类型的消毒剂有不同的消毒效果。消毒剂按其作用水平可分为灭菌剂、高效消毒剂、中效消毒剂、低效消毒剂。近几年，消毒剂已广泛应用于工业、医疗卫生、农业等各个行业，人们对消毒剂的应用研究有了很大的进展[2]。

本试验选用季铵盐（苯扎溴铵）、复方戊二醛（戊二醛癸甲溴铵）、碘制剂（聚维酮碘）三类消毒剂。季铵盐消毒剂是20世纪Jacobs等首次合成的季铵盐类化合物，主要产品之一为苯扎溴铵[3]；戊二醛癸甲溴铵可以广谱、高效杀灭各种细菌、真菌、病毒、支原体和衣原体。聚维酮碘作为一种优良的皮肤黏膜消毒剂和外用药已被许多国家的药典收录[4]。随着消毒剂的频繁使用，抗药菌株不断出现，有必要定期测定以评价不同消毒剂的消毒效果。

1  材料与方法

1.1 菌株

大肠杆菌标准菌株（C83907）和金黄色葡萄球菌菌株由铁骑力士集团冯光德实验室保存。

1.2 消毒剂

14种消毒剂由多个厂家提供，产品信息如表1。

1.3 試验试剂

营养琼脂、营养肉汤培养基购自杭州微生物试剂有限公司。

1.4 试验方法

1.4.1 培养基的制备

营养琼脂培养基的制备：称取营养琼脂33 g于试剂瓶中，加入1 000 mL水，121 ℃高压灭菌15 min，在超净工作台中倒板，每个培养皿15～20 mL。

营养肉汤培养基的制备：称取营养肉汤1.8 g于试剂瓶中，加入100 mL水，121 ℃高压灭菌15 min，置于超净工作台中备用。

1.4.2 消毒剂的配制

消毒剂按照其产品使用说明进行配制，稀释比例如表2。

1.4.3 细菌培养

吸取3 μL大肠杆菌菌种保存液，接种于8 mL营养肉汤中，37 ℃恒温培养器中培养16～18 h进行菌种活化及增殖。无菌吸取1 mL活化菌液至9 mL营养肉汤中，充分振荡摇匀，得到稀释10-1的菌液，照此方法依次制成稀释10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7的菌液，每个稀释度更换无菌吸管。分别吸取0.1 mL不同稀释度的菌液到营养琼脂平板上，将菌液涂布均匀，倒置，放37 ℃恒温培养箱中培养16～18 h，计菌落数。最终配制菌液：大肠杆菌活菌数为1.5×108 CFU/mL，金黄色葡萄球菌活菌数为3.6×108 CFU/mL。

1.4.4 最小抑菌浓度测定

将配制好的消毒液分成14组，每组10个EP管，各组第1个EP管分别为0.5 mL原液，第2～10个EP管中加入0.5 mL营养肉汤，从第 1个EP管开始依次往后稀释。在稀释好的各管消毒液中加入3 μL菌液，每管做好标记，放37 ℃恒温培养箱培养24 h，然后每组在      2个营养琼脂平板上分隔划线，继续放37 ℃恒温培养箱培养16 h，观察结果，判断最小抑菌浓度（minimal inhibit concentration，MIC）。最小抑菌浓度越低，代表消毒剂的抑菌效果越好。

2  结果与分析

2.1 消毒剂对大肠杆菌的最小抑菌浓度

3种碘制剂消毒剂（A、B和C）对大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为50、50、100 μL/mL，如图1-图6。

3  结论

消毒是贯彻“预防为主”方针的一项重要措施，目的是消灭外界环境中的病原体，以切断传播途径，阻止疫病继续蔓延。本试验采用最小抑菌浓度法对14种消毒剂的抑菌效果进行了快速有效的评价。不同种类的消毒剂抑菌效果各不相同，同一类消毒剂的抑菌效果也存在微小差异。对两种病原菌的抑菌效果来看，碘制剂中的B消毒剂对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度最小，抑菌效果最好；季铵盐中的D和E消毒剂对大肠杆菌的最小抑菌浓度最小，抑菌效果最好；F和G消毒剂对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度最小，抑菌效果最好；复方戊二醛中的K消毒剂对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度最小，抑菌效果最好。使用安全高效的消毒剂可以减少病原体传染的概率，从而增加养殖收益[5]。养殖场在实际消毒过程中，消毒对象、温度、湿度、作用时间、污染程度等因素都会对消毒效果产生一定的影响，因此养殖场选择消毒剂要根据消毒对象选择适当类型的消毒剂，并根据消毒条件调整消毒剂使用比例，以达到理想的消毒效果。

参考文献

[1] 郑举，刘红云，陈静，等．消毒剂的作用机理及在养殖业中的应用[J]．现代农业科技，2019（8）：14-15.

[2] 王洁琼，赵玉杰，周薇帆，等．不同消毒剂抑菌效果观察[J]．河南畜牧兽医（综合版），2017，38（1）：6-7.

[3] 张朝武．应用广泛的季铵盐类消毒剂[J]．现代预防医学，2006，33（5）：855-857.

[4] 苏润雨，聂伯尧，杨百亮．3种消毒剂对金黄色葡萄球菌杀菌作用的研究[J]．天津农学院学报，2016，23（3）：51-54.

[5] 董雯雯，李峰，张世栋，等．家禽养殖场常用消毒剂及消毒效果评价方法研究进展[J]．家禽科学，2019（9）：53-56.