食管胃连接处腺癌患者血清VEGF-C、VEGF-B水平变化及对短期预后不良的预测效能

布力布·吉力斯汉，李俊杰，王薇，达热拜·热达提

新疆医科大学附属肿瘤医院消化内科，乌鲁木齐 830001

食管胃连接处通常是指食管下段、贲门及胃上段的连接处，由于特殊的解剖学结构，此处好发远端食管鳞状细胞癌、食管胃连接处腺癌（AEG）等恶性肿瘤［1］。AEG 在国内外尚缺乏统一的分期、分型标准，临床常用Siewert 分型对肿瘤所在部位进行划分［2］。随着饮食结构的改变及环境因素的变化，AEG 发病率呈逐年上升趋势，且大部分患者5 年生存率及预后均较差［3］。如何早期诊断，并在侵犯周围组织、淋巴结前进行干预，是提高AEG患者生存率的关键。任何肿瘤增殖、侵袭及转移均需要肿瘤微血管的支撑，为肿瘤细胞提供大量的营养及氧气；除此之外，局部或全身炎症水平也与肿瘤细胞的侵袭性具有密切关联。微血管密度是衡量肿瘤新生微血管的重要临床指标，与胃癌、肺癌、食管癌等多种恶性肿瘤的发生发展均具有密切联系［4］，血管内皮生长因子（VEGF）是最常见、促血管生成作用最显著的细胞因子，与肿瘤新生微血管的形成密不可分［5］。尽管食管癌组织中VEGF 水平、炎症因子与肿瘤侵袭性及患者不良预后具有相关性，但关于AEG 患者血清中VEGF、炎症因子的水平变化及其对患者预后的预测价值研究尚少［6］。本研究观察了AEG 患者血清血管内皮生长因子-C（VEGF-C）、血管内皮生长因子-B（VEGF-B）水平变化及对短期预后不良结局的预测效能，旨在为更准确的评估AEG 患者预后提供特异性生物学标志物。

1 材料与方法

1.1 临床资料 选取2019 年1 月—2022 年12 月新疆医科大学附属肿瘤医院收治的AEG 患者85例。纳入标准：①患者一般状况良好，符合手术治疗适应证；②术后病例确诊为AEG；③未发生远端组织转移；④未接受新辅助化疗；⑤患者一般临床资料及实验室检验结果完整可取。排除标准：①合并其他类型恶性肿瘤；②合并急性、慢性感染性疾病；③合并上消化道出血或胃穿孔；④合并基础代谢性疾病、心血管疾病或自身免疫性疾病；⑤患者无法耐受手术治疗；⑥术后发生早期严重并发症或死亡者；⑦患者临床资料及实验室检验结果缺失。85 例AEG 患者按照术后6个月内是否发生癌症复发、转移或癌症相关性死亡将患者划分为短期预后良好组和短期预后不良组。短期预后良好组60 例，男38 例、女22 例，年龄29～86 岁（45.6 ± 17.2）岁，肿瘤直径2.0～8.4（5.8 ± 1.8）cm，Siewert 分型中Ⅰ型3 例、Ⅱ型30例、Ⅲ型27例，TNM分期Ⅰ期17例、Ⅱ期31 例、Ⅲ期12 例，全胃切除35 例、近端胃切除25 例，术后接受化疗45 例；短期预后不良组25 例，男16 例、女9例，年龄28～84（43.2 ± 18.5）岁，肿瘤直径2.0～8.2（5.1 ± 2.1）cm，Siewert 分型Ⅰ型2 例、Ⅱ型13例、Ⅲ型10 例，TNM 分期Ⅰ期5 例、Ⅱ期14 例、Ⅲ期6 例，全胃切除14 例、近端胃切除11 例，术后接受化疗17例。两组一般临床资料比较无统计学差异，具有可比性。

1.2 VEGF-C、VEGF-B 及血清肿瘤标志物检测方法 分别于手术前收集患者外周静脉血3 mL，在室温下以1 500 r/min 速度离心15 min（10 cm 有效半径），获得上层血清，采用化学发光免疫分析法检测血清VEGF-C、VEGF-B、糖类抗原199（CA199）、糖类抗原724（CA724）。

1.3 血清炎症因子检测方法 分别于手术前收集患者外周静脉血3 mL，在室温下以1 500 r/min 速度离心15 min（10 cm 有效半径），获得上层血清，采用化学发光免疫分析法及酶联免疫吸附法检测血清IL-2、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、C 反应蛋白（CRP）。

1.4 统计学方法 采用SPSS20.0 统计软件。符合正态分布的计量资料以表示，组间比较采用独立样本t检验；各指标相关性分析采用Spearman 相关分析法；采用多因素Logistic 回归分析法分析AEG 患者短期预后不良的危险因素，并通过ROC 评估各危险因素对患者短期预后不良结局的预测效能。P＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清VEGF-C、VEGF-B 及肿瘤标志物比较 两组血清VEGF-C、VEGF-B 及肿瘤标志物水平比较见表1。

表1 两组血清VEGF-C、VEGF-B及肿瘤标志物比较（）

表1 两组血清VEGF-C、VEGF-B及肿瘤标志物比较（）

注：与短期预后良好组比较，*P＜0.05。

组别短期预后不良组短期预后良好组CA724（U/L）8.54 ± 3.78 7.62 ± 2.68 n 25 60 VEGF-C（ng/L）185.30 ± 21.45*165.84 ± 30.52 VEGF-B（ng/L）146.06 ± 32.43*123.53 ± 27.29 CA199（U/L）24.37 ± 9.20 22.83 ± 6.89

2.2 两组血清炎症因子水平比较 两组血清炎症因子水平比较见表2。

表2 两组血清炎症因子水平比较（）

表2 两组血清炎症因子水平比较（）

注：与短期预后良好组比较，*P＜0.05。

组别短期预后不良组短期预后良好组CRP（mg/L）18.07 ± 4.73*15.32 ± 4.35 n 25 60 IL-2（ng/L）9.02 ± 3.20 8.38 ± 2.69 IL-6（ng/L）13.43 ± 6.55*10.34 ± 3.57 IL-8（ng/L）174.32 ± 35.14*156.32 ± 30.00 TNF-α（ng/L）267.92 ± 35.94 263.31 ± 28.65

2.3 VEGF-C、VEGF-B、炎症因子与AEG 患者短期预后不良的相关性 对短期预后不良赋值=1、短期预后良好赋值=0，VEGF-C、VEGF-B、IL-6、IL-8、CRP 取原数值。Spearman 相关性分析显示，AEG 患者血清VEGF-C、VEGF-B、IL-6、IL-8、CRP 水平与短期预后不良呈显著正相关性（r分别为0.317、0.321、0.257、0.225、0.220，P均＜0.05）。

2.4 AEG患者短期预后不良危险因素分析结果 多因素Logistic回归分析显示，血清VEGF-C及VEGF-B水平是AEG 患者短期预后不良危险因素，详见表3。

表3 AEG患者短期预后不良危险因素分析结果

2.5 血清VEGF-C、VEGF-B对AEG患者短期预后不良的预测效能 血清VEGF-C（最佳截断值为179.78 ng/L）单独、VEGF-B（最佳截断值为135.24 ng/L）单独及VEGF-C联合VEGF-B预测AEG患者短期预后不良的AUC（95%CI）分别为0.701（0.587～0.815）、0.703（0.573～0.834）及0.749（0.635～0.862），其中VEGF-C联合VEGF-B 的预测价值最高（Z=2.401、2.387，P＜0.05），详见图1。

图1 血清VEGF-C、VEGF-B水平预测AEG患者短期预后不良的ROC

3 讨论

AEG 是位于食管远端、胃食管交界处的恶性肿瘤，其发病率及病死率呈上升趋势，如何早期诊断、治疗及评估AEG 患者预后是临床研究的重要方向。传统肿瘤标志物对于AEG 的辅助诊断、预后判断具有一定临床价值，例如CA199、CA724等是消化道肿瘤常见肿瘤标志物，对于辅助诊断、监测病情严重程度具有一定临床意义，在食管癌复发、远端转移及淋巴结转移中具有一定预测及参考价值［7-8］。但目前临床中广泛应用的常规肿瘤标志物通常特异性较低，因此进一步挖掘与AEG 患者短期预后情况相关的生物学指标是临床亟待解决的问题之一［9-10］。肿瘤细胞的增殖总是伴随新生血管的生成。一方面，肿瘤新生血管可满足肿瘤细胞增殖所需的大量营养物质及氧气；另一方面，交织分布的肿瘤新生血管会协助肿瘤细胞实现血行转移，为肿瘤远端转移提供基础［11-12］。而肿瘤血管生成及VEGF 的相互作用始终是消化系统癌症微环境的研究热点之一。

VEGF 是一类强效促肿瘤血管生成的细胞因子，其在肺癌、食管癌、胃癌等多种恶性肿瘤组织中呈高表达水状态，且与肿瘤淋巴结转移情况、TNM分期具有密切联系［13-15］。多项前瞻性队列研究［16］也发现，生存期较短、预后较差的消化系统癌症患者，常表现为VEGF 表达水平增高。VEGF-B及VEGF-C是VEGF 家族中分布较为广泛的两种亚型，在多种组织的血管内皮中均可检测到，具有促进血管内皮细胞增殖、抑制血管内皮凋亡、增加微血管通透性及营养外渗等作用，两种亚型的发现扩大了VEGF 家族对内皮细胞调节功能的复杂性［17］。高水平表达的VEGF-B 及VEGF-C 可能通过促进肿瘤新生血管生成，使AEG 细胞获得更多氧气及营养，进而加快了肿瘤生长，同时也增加了肿瘤细胞通过血液循环系统发生远端侵袭的可能性［18］。此外，VEGF-B 及VEGF-C 也可能通过与内皮细胞表面特异性受体直接结合促进肿瘤组织的生长，而在增殖过程中脱落的肿瘤细胞也会进入密度较高的微血管中进一步加速远端转移的出现。此外，食管鳞癌患者中发现VEGF 可能与靶细胞特异性受体结合并辅助肿瘤细胞逃避免疫监视作用［19］。本研究显示，短期预后不良组血清IL-6、IL-8、CRP 水平高于短期预后良好组，且血清IL-6、IL-8、CRP 水平与患者预后不良成正相关，但上述炎症因子对于患者预后的预测价值不高。本研究还发现，短期预后不良组血清VEGF-C、VEGF-B水平高于短期预后良好组，VEGF-C、VEGF-B是AEG 患者短期预后不良的危险因素，二者联合预测的价值较高。既往结果与本研究结论均指出，VEGF-B、VEGF-C 等VEGF 家族对于包括AEG 在内的多种肿瘤发生、发展、转移及预后均具有重要调节作用，因此也是潜在的高效能预测指标。

总之，AEG 患者血清VEGF-C、VEGF-B 水平升高，是AEG 患者短期预后不良结局的危险因素，检测两指标有助于预测AEG患者短期预后不良结局。