参姜止痢合剂治疗仔猪黄痢的临床疗效评价

郭志廷，付鹏程，张 康，刘 莲，张 凯，李建喜

（1.中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 农业农村部兽用药物创制重点实验室 甘肃省中兽药工程技术研究中心，兰州 730050；2.定西市安定区畜牧兽医局石泉畜牧兽医站，定西 743000）

仔猪黄痢是由致病性大肠杆菌引起的一种以肠炎和败血症为主要特征的传染病，主要侵害1～3日龄仔猪，临床上主要表现为仔猪排黄色稀粪和迅速发生死亡[1-3]。仔猪黄痢具有很高的发病率和死亡率，绝大部分养猪场都 有过发病，该病全年常发，几乎无季节性特征，给养猪业带来了严重的经济损失。由于致病性大肠杆菌血清型众多，很难针对所有病原生产出有效疫苗用于预防。目前，对于仔猪黄痢的防治主要以抗生素和化学合成抗菌药为主，但由于长期、不合理使用，不仅产生严重的细菌耐药性和菌群失调问题，且兽药残留超标直接危害食品安全和人类健康[4-6]。鉴于此，迫切需要研发高效、绿色环保的新兽药。中药由于疗效好、低毒低残留和可以提高机体免疫力，近年逐渐成为新药研发的热点之一。本团队根据仔猪黄痢的发病特性，经过认真的药物筛选，以苦参、生姜等中药进行组方，对临床自然发病的仔猪进行试验，验证此方剂治疗仔猪黄痢的临床疗效，旨在为下一步药物研发奠定基础。

1 材料与方法

1.1 药物 参姜止痢合剂，由苦参、生姜等中药组成，经传统水煎、浓缩制得，每毫升含生药1 g。

1.2 试剂与仪器 普通血平板培养基和大肠杆菌显色培养基均购自广东环凯微生物科技有限公司。ColonyDoc-It菌落计数仪购自北京赛百奥科技有限公司。

1.3 临床治疗方法

1.3.1 病例来源 2020年10月至2021年4月，从甘肃省白银市景泰县、兰州市永登县、定西市安定区分别选择一个养猪场，搜集自然发生黄痢的仔猪，经流行病学调查、临床症状观察进行初步诊断，通过实验室细菌学检查进行确诊。

1.3.2 药物治疗 每头病猪每天给药3～5 mL，每天1次，连用2～3 d。药物使用前摇匀，候温灌服。

1.3.3 诊断标准 临床上1～3日龄排出黄色稀粪，经实验室细菌学检查大肠杆菌感染的，确诊为仔猪黄痢。

1.3.4 治愈标准 给药后仔猪腹泻停止，精神状态和饮食恢复正常，实验室细菌学检查病猪粪便中大肠杆菌数量明显减少，即判为治愈。

1.4 大肠杆菌检查方法

1.4.1 普通血平板培养基 将临床上采集的粪便样本稀释200倍和400倍后，采用涂布的方法直接接种于普通血平板培养基，做好标识，置于35℃～39℃培养箱中避光培养18～24 h，之后观察结果。

1.4.2 大 肠杆菌显色培养基 在普通血平板试验基础上，将临床上采集的粪便样本稀释400倍后，采用涂布的方法直接接种于大肠杆菌显色培养基，做好标识，置于35℃～39℃培养箱中避光培养18～24 h，之后观察结果。

2 结果与讨论

2.1 仔猪黄痢的病因和防治 中兽医认为，仔猪是稚阴稚阳之体，形气不足，卫外不固，加之环境多雨潮湿，冷热不和，场圈污秽，仔猪感受疫疠之气而发病；治疗以清热解毒，涩肠止泻为原则[7-8]。现代医学认为，仔猪黄痢发病原因[9-11]包括：饲养管理不到位，比如未定期清理、消毒圈舍，导致圈舍环境卫生不良，母猪体内可能携带致病性大肠杆菌，随粪便排出时如果未能及时处理，导致仔猪接触病菌发生感染；产后母乳不足，仔猪免疫力低下容易感染；仔猪胃肠消化功能不健全，导致胃酸含量分泌不足，不能有效杀灭进入体内的大肠杆菌导致发病；寒冷、饥饿等应激因素也可诱发此病等。因此，科学预防对于控制仔猪黄痢非常重要，应加强母猪、仔猪的饲养管理，如怀孕母猪饲喂全价饲料，产后马上对圈舍、器具进行消毒；仔猪出生后尽快喂食母乳，提高免疫能力；及时补铁预防生长过慢；饲喂一些仔猪易消化的食物，以及及时接种疫苗等[12-14]。目前，仔猪黄痢的防治主要依靠抗生素，但由于长期、不合理使用导致耐药菌株产生、畜产品质量下降，严重影响食品安全[15]。中药普遍具有较强的抗菌消炎作用，其主要抗菌活性成分包括黄酮、有机酸、生物碱及多糖类物质等；中药除了具有来源广、药物残留低等特点，还能通过调节动物肠道菌群、促进有益菌生长等途径增强肠道免疫力。

2.2 药物治疗结果

2.2.1 腹泻情况 参姜止痢合剂方中苦参为君药，有清热燥湿，杀虫，祛风和利尿之功效；生姜为臣药，有温中散寒、回阳救逆之功效，两者合用对于湿热下痢有明显的治疗效果[16]。结果显示，健康仔猪肛门周围清洁（图1A）；发生黄痢的仔猪肛门周围有黄色排泄物（图1B）；参姜止痢合剂连续给药2～3 d后，仔猪停止腹泻（图1C）。

图1 仔猪肛门周围变化Fig.1 Changes around piglet anus

2.2.2 疗效观察 病例一：2020年10月1日至2021年4月30日，景泰县王德香养猪场，共计选取发病仔猪121头，灌药2～3 d后病猪腹泻停止，精神状态和饮食恢复正常，后期随访无复发。病例二：2020年10月1日至2021年4月30日，永登县苗中俊养猪场，共计选取发病仔猪63头，给药2～3 d后病猪腹泻停止，精神状态和饮食恢复正常，后期随访无复发。病例三：2021年3月15日至2021年4月30日，定西市蟾慕养猪场，共计选取发病仔猪165头，给药2～3 d后病猪腹泻停止，精神状态和饮食恢复正常，后期随访无复发。结果统计分析显示，参姜止痢合剂连续给药2～3 d后，3个猪场仔猪黄痢的治愈率分别为87.6%、89.1%和84.1%，平均治愈率为86.9%（表1）。

表1 仔猪黄痢治疗效果Table 1 Therapeutic eff ect of piglet yellow dysentery

2.3 细菌检查结果

2.3.1 普通血平板培养基结果 苦参是临床上常用的一味中药，在《素问》《史记》和沈存中的《笔谈》等古代医学典籍中都有记载。苦参碱和氧化苦参碱是其中主要的有效成分之一，具有良好的抗菌、抗球虫、抗肿瘤、抗组织纤维化、抗高血糖应激以及神经保护等作用[17-18]。研究发现，苦参具有广谱抗菌作用，对金黄色葡萄球菌、甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌等有良好的抑菌活性[19]。本试验采集给药前后发病仔猪的粪便，稀释200倍和400倍，分别接种于同一个普通血平板（左200倍，右400倍），培养18 h后进行观察；结果显示，给药前（即仔猪发病过程）的细菌数量很多，参姜止痢合剂用药后治愈仔猪粪便中细菌数明显减少（图2）。

图2 给药前后仔猪粪便中细菌数Fig.2 The bacterial amount of piglet feces before and after administration

2.3.2 大肠杆菌显色培养基结果 在血平板培养基结果的基础上，仔猪粪便稀释400倍，接种于大肠杆菌显色培养基，培养18 h后进行观察，大肠杆菌呈蓝绿色。结果显示，黄痢感染仔猪粪便检出的大肠杆菌数量较多（749个），参姜止痢合剂给药后治愈小猪粪便检出的大肠杆菌数显著减少（10个）（图3）。

图3 给药前后仔猪粪便中大肠杆菌数Fig.3 Escherichia coli amount of piglet feces before and after administration

本试验结果表明，参姜止痢合剂对于致病性大肠杆菌引起的仔猪黄痢有较好的治疗效果，治愈率达到80%以上；实验室细菌学检查结果也清楚地提示该方剂对大肠杆菌有较强的杀灭作用；且给药治愈后仔猪精神状态与饮食恢复正常，后续随访无复发。结果表明，参姜止痢合剂可以有效治疗仔猪黄痢，今后有望成为防治黄痢的新药物。