张海明 戴铭成 张芳
山药有“药食同源第一药”之称,其中含有大量的山药多糖,而山药多糖具备抗氧化、抗疲劳、降血糖等诸多功效。本文对山药多糖的提取工艺优化展开了研究。
一、材料与设备
实验所需的试剂与材料、仪器与设备,详见表1、表2。
二、实验与方法
1.山药多糖的提取。山药多糖的提取流程如图1所示。
2.山药多糖水浸提的单因素试验。(1)浸出温度对山药粉水提多糖得率的影响。设定浸出时长为3h,料水比为1:20,浸出温度为45℃、55℃、65℃、75℃、85℃、95℃,分别进行制取,以分析浸出温度对多糖得率的影响。
(2)浸出时长对山药粉水提多糖得率的影响。设定浸出温度为90℃,料水比为1:20,浸出时长为1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h、3.5h,分别进行制取,以分析浸出时长对多糖得率的影响。
(3)料水比对山药粉水提多糖得率的影响。设定浸出温度为90℃,浸出时长为3h,料水比为1:10、1:15、1:20、1:25、1:30、1:35,分別进行制取,以分析料水比对多糖得率的影响。
(4)山药多糖水浸提条件的正交试验设计。根据单因素检验的分析结果得出结论,并制作L9(34)正交表,选取浸出温度(A)、浸出时长(B)和料水比(C)分别作为考虑的变量,将所有考虑变量设置为3个水平,浸提2次,结果如表3所示。
三、结果与讨论
1.浸出温度对山药粉水提多糖得率的影响。如图2所示,随着浸出温度的不断升高,多糖得率也在随之提高,其原因可能是,当浸出温度极低时,只有少量局部多糖能发生水解,溶解不充分,使得多糖得率偏低;随着浸出温度持续升高,多糖的溶解速率明显加快,导致多糖得率不断提高。综合分析可知,提取山药多糖的最佳浸出温度为95℃。
2.浸出时长对山药粉水提多糖得率的影响。如图3所示,随着浸出时间不断延长,多糖得率也相应进一步升高,当浸出时间为3h时多糖得率达到最高,此后随着浸出时间的再次延长,多糖得率开始呈现出下滑态势。原因可能是,当浸出时间达到3h时,大部分的山药多糖已基本水解溶出,并且达到了平衡状态;当浸出时间超过3h后,无法再提取出更多的多糖,浸出时间太久反而还会造成山药多糖的损坏,导致多糖得率降低。综合分析可知,浸出山药多糖的最佳浸出时长为3h。
3.料水比对山药粉水提多糖得率的影响。如图3所示,随着料水比逐步变大,多糖得率会相应地持续提升,当料水比达到1:20时多糖得率最高。原因可能是,当料水比低于1:20时,随着料水比的增大,山药中多糖溶出量不断上升;当料水比高于1:20时,溶液体系基本上已经达到饱和状态,多糖成分基本全部溶出,所以多糖得率不会再提高。综合分析可知,浸出山药多糖的最佳料水比为1:20。
通过以上单因素试验,最终确定:山药多糖的浸出温度为95℃,浸出时长为3h,料水比为1:20。
4.山药粉多糖水浸提条件的正交试验结果。如表4所示,引起山药多糖得率差异并产生直接影响的3个重要因素,按照影响程度从高至低依次排列为:浸出时长(B)>料水比(C)>浸出温度(A)。对山药多糖得率的作用最为显著、作用幅度最大的因素是浸出时间的长短,料水比与浸出温度对山药多糖得率的作用比浸出时间要小,因此在开展山药多糖浸出提纯分离试验时,必须要先思考浸出时间对多糖得率的影响。根据正交试验结果,得到浸出山药多糖的最佳浸出方法为A2B2C3,即最适宜的浸出温度为90℃,浸出时长为3h,料水比为1:25。
综上所述,通过对影响山药中多糖得率的单因素试验和正交设计试验进行研究,本文明确了山药多糖的最佳浸出方法,即浸出水温达到90℃,浸出时长达到3h,料水比达到1:25。
作者简介:张海明(1982-),男,汉族,河北平山人,副教授,硕士研究生,研究方向为生物化学与分子生物学。