浅析水产品中氯芬新残留的检测技术及食用风险

◎ 金 定

（扎鲁特旗市场检验检测中心，内蒙古 通辽 029100）

氯芬新是一种杀菌剂和消毒剂，长期食用含有氯芬新残留的水产品，会对人体健康产生不良影响。氯芬新是一种长效残留农药，当水产品中存在氯芬新残留时，可能会造成环境污染，对水生生物和生态环境产生负面影响。此外，氯芬新还可能在食品加工过程中转化为有毒物质，增加食品安全风险。为此，检验水产品中的氯芬新残留，探寻可靠、精确的检测方法是必要的[1]。

1 材料与设备

1.1 材料与试剂

从当地市场中购买草鱼、牡蛎、对虾、梭子蟹、中华鳖、海参等常见的水产品。本研究所用试剂如表1 所示。

表1 试剂表

1.2 仪器与设备

研究所用仪器与设备见表2。

表2 仪器设备表

1.3 标准溶液与流动相配置

标准溶液的配制表如表3 所示。在标准溶液配制的基础上，按照定容的配置方法，分别配置0.5、1.0、2.0、10.0、50.0、100.0 ng·mL-1的系列标准工作溶液。

表3 标准溶液配制表

水相的配置方法：准确称取0.077 08 g 的乙酸铵，将乙酸铵加入烧杯中搅拌，直到完全溶解，将溶解后的乙酸铵转移至一个500 mL 的容量瓶中，超声处理10 min，使溶液更加均匀、稳定。

有机相的配置方法：使用适当的容量瓶量取500 mL 的色谱级乙腈，将乙腈缓慢倒入流动相瓶中，并超声波处理10 min。

2 方法

2.1 样品前处理

样品制备：将新鲜的草鱼、牡蛎、对虾、梭子蟹、中华鳖和海参，切碎放入高速组织均质机中。完成均质后，将样品转移到干净的食品容器中，并用标签标明样品的名称和日期，确保封闭容器以防止空气和异物进入。

样品提取方法：使用电子天平分别称取5.00 g 的鱼、虾、贝、海参、甲鱼和蟹试样，准备50 mL 具有螺旋盖的聚丙烯离心管，加入陶瓷均质子和均质样品，向离心管中加入10 mL 乙腈、4 g 无水Na2SO4和1 g NaCl，放入离心机中，以8 000 rpm 的速度，离心5 min。

样品净化方法：准备一个含有400 mg PSA、400 mg C18 和1 200 mg 无水MgSO4的15 mL 离心管，使用移液器将6 mL 上清液吸取到离心管中，涡旋搅拌1 min。随后，放入离心机中以8 000 rpm 的速度离心5 min，取出上清液，使用0.22 μm 滤膜进行过滤，将过滤后的上清液转移到进样瓶中，并密封好。

2.2 仪器条件

本文所用的仪器条件和质谱参数如表4、5 所示。

表4 仪器条件表

表5 质谱参数表

3 结果分析

3.1 标准溶液的稳定性

使用乙腈溶剂将购置的标准品溶解，并配制成所需的适量浓度的储备液，将配制好的储备液分装到棕色西林瓶中。使用液相色谱-串联质谱仪进行测定，并记录每次测定的峰面积[2]。根据氯芬新标准溶液的测定结果来看，氯芬新的峰面积变化率不大，保持在97%～98%，故标准储备液在-20 ℃条件下的放置时间不应超过6 个月。

3.2 前处理条件的选择

根据本研究结果，乙腈和甲醇的提取效率较高，可以有效提取样品中的油脂和色素[3]。1%甲酸乙腈在提取草鱼和对虾样品时，也表现出良好的提取效果。

试验中为优化提取次数，选择2 组空白样本进行回收实验，对照样品中加入10 mL 的乙腈重复提取1次[4]。根据结果来看，提取1 次即可完成对氯芬新药物的提取要求，并且与多次提取相比，1 次提取的回收率、检出限和重复性没有显著变化。因此，考虑到试剂成本和前处理时间的因素，选择1 次提取是符合实际要求的最佳选择。

本文选择不同量的C18 和PSA 填料的QuEChERS复合净化剂，分别对鱼和虾净化后的基质效应展开分析。其中，复合净化剂 A 指含 150 mg PSA、150 mg C18、900 mg 无水MgSO4；复合净化剂B 为含400 mg PSA、400 mg C18、1 200 mg 无水Mg SO4。将两个独立的样本进行t检验，检验发现，两种复合净化剂对于对虾基质，P（F≤f）单尾＞0.025，整体差异不显著。

3.3 质谱条件的选择

在负离子模式下，取1 μg·m L-1氯芬新标准溶液，以流动注射的方式，注入质谱仪中进行全扫描，对喷雾电压源的离子传输管温度、鞘气电压和辅助气电压等离子源参数进行优化，进而确定测定离子源的最佳条件。以氯芬新的离子峰为母离子，分别优化碰撞能量等质谱参数，使分子离子和特征碎片离子强度达到最大，进而确定以丰度最大的二级碎片离子作为定量离子，次强碎片离子作为定性离子[5]。

3.4 方法学评价

本实验采用配制溶剂标准溶液取向和基质匹配标准溶液曲线建立数学模型，来评价运用HPLC-MS/MS检测的基质效应。按照公式（1）计算基质（ME）。

式中，A为建立溶剂标准曲线后线性方程斜率；B为机制标准曲线建立后的线性方程斜率。当ME绝对值小于20%，说明基质效应较弱；若在20%～50%，说明中等；若大于50%，则表明基质效应较强。

根据表6 结果来看，氯芬新残留在上述 6 种水产品中的基质效应绝对值在5.83%～74.61%。其中，对虾、牡蛎和海参3 种水产品基质对目标物信号影响存在较弱的基质效应，其余均有较强的基质效应且均为抑制作用。综合来看，相较于液相色谱法，液相色谱-串联质谱法结合了色谱和质谱的优势，具有高选择性、高灵敏度的优点，对目标物的分离度和响应度更好。

表6 氯芬新机制匹配标准曲线与溶剂标准曲线的比较表