地肤子外洗散剂的薄层鉴别及初步稳定性考察

刘继均 陈土荣 周 艳 王 凌 李泽福 梁培鑫

（广州中医药大学第三附属医院药学部，广东 广州 510378）

散剂系原料药物或与适宜的辅料经粉碎、均匀混合制成的干燥粉末状制剂［1］，是中国传统的古老剂型之一，具有分散程度大、起效快、易吸收、药物溶出度大、生物利用度高、使用量便于控制等特点；在制作工艺与使用方面，散剂制备方法简单且便于携带［2］。地肤子外洗散剂由广州中医药大学第三附属医院皮肤科医生经临床实践总结而成，主要组成有地肤子、黄柏、地榆、荆芥、大黄、枯矾、苦参、甘草、金银花、五倍子、徐长卿、白鲜皮、冰片等中药，具有清热燥湿、祛风止痒的功效，主要用于治疗湿疹、荨麻疹及各种瘙痒性皮肤病，临床使用多年，效果确切，深受医生和患者的喜爱。为了更好地控制地肤子外洗散剂的质量，文章采用薄层色谱法（TLC），对方中大黄、黄柏、五倍子、冰片等进行鉴别，并初步考察该制剂的稳定性。

1 仪器与试药

1.1 仪器预制硅胶G 薄层板（青岛海洋化工厂分厂，规格：10 cm×10 cm）；硅胶G（青岛海洋化工厂）；超声波清洗机（宁波海曙科生超声波设备有限公司，KS-150EI 型）；三用紫外分光仪（上海精科实业有限公司，WFH-203B 型）；分析天平［赛多利斯科学仪器（北京）有限公司，MSE125P-OCE-DU 型］；恒温恒湿培养箱（上海一恒科学仪器有限公司，LHS-150SC 型）；药品稳定性试验箱（上海三腾仪器有限公司，MTC-250 型）；电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司，DHG-9140型）；生化培养箱（上海一恒科学仪器有限公司，LRH-70 型）；霉菌培养箱（上海三腾仪器有限公司，MIR-150A 型）；干热灭菌器（上海三腾仪器有限公司，BOS-150型）。

1.2 试药地肤子外洗散剂（批号：220301、220302、220303）由广州中医药大学第三附属医院制剂室提供；地肤子、黄柏、地榆、荆芥、大黄、枯矾、苦参、甘草、金银花、五倍子、徐长卿、白鲜皮等中药饮片购自岭南中药饮片有限公司，由广州中医药大学吴雪茹教授鉴定为正品。大黄对照药材（批号：120902-201912）、大黄酸对照品（批号：110757-201607）、黄柏对照药材（批号：121510-201606）、盐酸小檗碱对照品（批号：110713-200911）、五倍子对照药材（批号：121078-201504）、没食子酸对照品（批号：110831-201605）、冰片对照品（批号：110743-200504）均由中国食品药品检定研究院提供。所用试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 地肤子外洗散剂的TLC

2.1.1 大黄TLC 取供试品1.5 g，加甲醇20 mL浸泡1 h，滤过；取滤液5 mL 蒸干，残渣加水10 mL 溶解，再加盐酸1 mL，加热回流30 min，立即冷却；用甲基叔丁基醚分2次振摇提取，每次20 mL；合并甲基叔丁基醚液，挥干，残渣加二氯甲烷1 mL溶解，作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1 g，同法制成对照药材溶液。再取大黄酸对照品，加甲醇，制成浓度为1 mg/mL的对照品溶液。照TLC（通则0502）试验，分别吸取上述三种溶液5 μL、2 μL、2 μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G 薄层板上，以石油醚（30～60 ℃）-甲酸乙酯-甲酸（15∶5∶1）的上层溶液为展开剂展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。

在供试品色谱、对照药材色谱、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。见图1。

图1 大黄TLC鉴别图谱

2.1.2 黄柏TLC 取供试品2 g，加甲醇20 mL，加热回流30 min，滤过；滤液浓缩至2 mL，作为供试品溶液。另取黄柏对照药材0.1 g，加甲醇10 mL，同法制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成浓度0.5 mg/mL的对照品溶液。

照TLC（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各3～5 μL，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水（14∶5∶5）的上层溶液为展开剂展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。

在供试品色谱、对照药材色谱、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。见图2。

图2 黄柏TLC鉴别图谱

2.1.3 五倍子TLC 取供试品5.5 g，加甲醇20 mL，超声处理15 min，滤过，滤液作为供试品溶液。另取五倍子对照药材0.5 g，同法制成对照药材溶液。再取没食子酸对照品，加甲醇制成浓度1 mg/mL的对照品溶液。

照TLC（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲酸乙酯-甲酸（5∶5∶1）为展开剂展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液，日光下检视［3］。

供试品色谱、对照药材色谱、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。见图3。

图3 五倍子TLC鉴别图谱

2.1.4 冰片TLC 取供试品2 g，加甲基叔丁基醚40 mL，超声处理15 min，滤过；滤液挥干，残渣加甲醇2 mL 溶解，作为供试品溶液。另取冰片对照品，加甲醇制成浓度1 mg/mL的对照品溶液［4］。

照TLC（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G 板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（5∶1）为展开剂展开，取出，晾干，喷以10%磷钼酸乙醇溶液，105 ℃加热至斑点显色清晰，日光下检视［5，6］。

供试品色谱与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。见图4。

图4 冰片TLC鉴别图谱

2.2 地肤子外洗散剂的稳定性考察根据《中华人民共和国药典》2020 版四部通则9000 中的原料药物与制剂稳定性试验指导原则，将三批地肤子外洗散剂分别于恒温恒湿条件下进行观察，温度（40±2）℃、相对湿度（75±5）%，分别于第1 个月、第2 个月、第3 个月、第6个月末考察一次［1］，按照制剂稳定性重点考察项目（包括性状、鉴别、检查、微生物限度）进行检查。结果样品各项指标均无明显变化，质量稳定。见表1。

表1 三批地肤子外洗散剂加速试验结果

由表1 可知，地肤子外洗散剂在加速试验中，外观均为淡黄色的粉末，符合标准规定；各个时间点取样的大黄、黄柏、五倍子、冰片的TLC 均呈正反应，符合标准规定；外观均匀度、水分、装量差异等各项检查项也均符合标准规定；各个时间点的微生物限度均符合规定。说明地肤子外洗散剂的质量稳定且可靠。

3 讨论

本试验采用TLC 对地肤子外洗散剂处方中的各个药味进行薄层鉴别研究，结果处方中的大黄、黄柏、五倍子、冰片的药味色谱斑点清晰，特征明显，分离度好，且阴性对照溶液没有干扰，说明该方法专属性高、重现性好，可作为地肤子外洗散剂的质量控制方法。

制剂质量的稳定是制剂在研发、注册管理中非常重要的因素，直接影响到制剂质量，进而影响制剂的临床使用和安全性。本试验通过加速试验［温度（40±2）℃、相对湿度（75±5）%］对三批地肤子外洗散剂进行了初步稳定性考察，结果显示其性状、外观均无变化，大黄、黄柏、五倍子、冰片的鉴别均呈正反应，微生物限度均符合规定，表明地肤子外洗散剂的质量稳定可控。