莲藕解酒功能软糖的制备及功效评价

2024-03-23 09:21杨紫瀚吴伟杰刘瑞玲申屠旭萍郜海燕陈杭君
浙江农业学报 2024年2期
关键词:软糖莲藕提取物

杨紫瀚,吴伟杰,高 原,刘瑞玲,申屠旭萍,郜海燕,陈杭君,*

(1.中国计量大学 生命科学学院,浙江 杭州 310018; 2.浙江省农业科学院 食品科学研究所,农业农村部果品采后处理重点实验室,农业农村部蔬菜采后保鲜与加工重点实验室(省部共建),浙江省果蔬保鲜与加工技术研究重点实验室,中国轻工业果蔬保鲜与加工重点实验室,浙江 杭州 310021)

中国是酒文化大国,但是过量饮酒会导致酒精性疾病的发病风险。进入人体的酒精主要由肝脏中的乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase, ADH)和乙醛脱氢酶(acetaldehyde dehydrogenase, ALDH)进行代谢。过量饮酒会导致急性酒精中毒,目前治疗急性酒精中毒的策略是激活解酒酶活性,加速乙醇代谢,降低乙醇及其代谢产物的生物利用度。有研究表明,外源化合物可以通过激活ADH的活性以达到快速解酒的作用[1-2]。此外,酒精在体内代谢过程中会产生大量活性氧(ROS),具有良好抗氧化活性的物质可以清除酒精代谢产生的自由基,对肝脏起到一定的保护作用[3]。

莲藕(NelumbonuciferaGaertn)是一种常见的药食两用蔬菜。《本草纲目拾遗》概述了藕粉调中开胃,补髓益血,通气分,解表热,常食安神生智,解暑生津,消食止泻等作用[4]。莲藕中富含多酚、黄酮和多糖等化合物,具有良好的抗炎、降血脂、降血压、降血糖、抗氧化、抑菌功效[5-7]。中国古代医学文献《本草拾遗》记载了莲藕具有解酒功效,但是具体解酒组分还不明确。因此,本研究的目的是筛选出莲藕解酒效果最优组分,并将优化后的莲藕提取物组分添加到软糖制作过程中。与传统的胶囊、药片相比,功能性软糖可以通过简单的口服方式摄入,功能成分更容易被吸收和利用。其次,功能性软糖口感更好,更容易被消费者接受。此外,功能性软糖中营养成分的含量可以被准确地控制,使消费者摄入的营养成分量更加精准。本文通过测定莲藕解酒软糖的体外抗氧化活性以及对醉酒小鼠解酒效果的研究探讨莲藕解酒软糖的功效,以期为莲藕资源开发和解酒产品开发提供新思路。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

新鲜的鄂莲五号莲藕购于浙江省杭州市湾里塘莲藕合作社,挑选大小均一、无机械损伤和病虫害的莲藕;乙醇脱氢酶,氧化型辅酶1(NAD+),1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH),2,2-二氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)铵盐(ABTS)购于北京索莱宝科技有限公司;过硫酸钾,水杨酸,无水乙醇,甲醇均为分析纯,购于上海凌峰化学试剂有限公司;BALB/C小鼠及SPF小鼠饲料垫料购于北京维通利华实验动物技术有限公司;血乙醇测定试剂盒和乙醇脱氢酶活性测定试剂盒购于南京建成生物技术有限公司。

1.2 主要仪器与设备

XMTD-8222水浴锅,上海精宏实验设备有限公司;FreeZone®真空冷冻干燥机,美国 LABCONCO公司;Spark10M酶标仪,瑞典Tecan公司;TD2102万分之一电子天平,江苏金诺仪表有限公司;RE-52AA旋转蒸发器,上海亚荣生化仪器厂;Tissuelyser-192全自动样品快速研磨仪,上海净信实业发展有限公司;Nexera X2超高效液相色谱,日本岛津公司;4500 QTRAP质谱,美国应用生物系统公司;TA.XT Pus型质构仪,英国SMS公司。

1.3 实验方法

1.3.1 莲藕提取物工艺单因素实验

采用单因素实验分别考察莲藕解酒成分提取过程中溶剂体积分数、提取时间、提取温度、料液比等因素对提取物ADH激活率的影响。根据预实验结果,莲藕甲醇提取物比乙醇提取物具有更高的ADH激活率,因此,选用不同体积分数的甲醇作为溶剂进行单因素实验。

将新鲜莲藕切块后用液氮速冻,利用真空冷冻干燥机充分干燥并研磨成粉末备用。保持其他条件不变,设置提取温度分别为40、50、60、70、80 ℃,提取时间分别设定为1、2、3、4、5、6 h,提取溶剂甲醇体积分数分别设为20%、40%、60%、80%、100%,莲藕与溶剂的料液比分别为1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50进行单因素实验,评价标准为ADH体外激活率。

1.3.2 莲藕提取物对ADH体外激活率测定

本实验采用改进过的瓦勒-霍赫法[8]测定莲藕提取物的 ADH 体外激活率。在试管中依次加入0.375 mL焦磷酸钠缓冲液 (pH值8.8)、0.25 mL 0.027 mol·L-1NAD+、0.125 mL 12%乙醇及0.025 mL莲藕提取物样品溶液,混匀后,于25 ℃下密封温育5 min,然后立即将0.025 mL 3 U·mL-1ADH 添加到试管中,摇匀后立即用酶标仪测定其340 nm 处的吸光度D340,每隔1min读取1次吸光度值,连续测定10 min,并记录数据,对照组以对应溶剂代替样品溶液,其余步骤不变,最后根据以下公式计算ADH的激活率。

E=(A×0.8)/(Ew×6.2);

(1)

(2)

式(1)和(2)中:E为ADH活性,VADH为ADH激活率,E1为样品组酶活性,E0为对照组酶活性,A为反应最初线性部分340 nm波长处吸光度每1 min的增值,Ew为酶液中的酶含量,0.8为反应液总体积,6.2为NADH在340 nm处的摩尔消光系数。

1.3.3 正交试验确定最佳提取工艺

根据单因素实验结果,以提取温度、提取时间、提取溶剂甲醇体积分数和料液比4个因素为变量,各取三个水平进行四因素三水平的正交试验L9(34)。采用UPLC-QTOF-MS/MS对最佳工艺制备的莲藕提取物进行组分解析,实验方法参考罗梦兰等[9]的方法略作修改。

1.3.4 莲藕解酒软糖的制备

根据正交试验的结果,用最佳提取工艺提取莲藕活性成分,将提取液减压浓缩成浸膏,用蒸馏水复溶浓缩3次,直至甲醇完全去除。用真空冷冻干燥机干燥成冻干粉末,取100 mg莲藕提取物加入不同体积蒸馏水配制成梯度浓度莲藕提取液备用。凝胶软糖制作工艺参考杨娟等[10]的工艺流程并加以改进。

(1)溶胶:称取一定量明胶和卡拉胶,明胶与卡拉胶质量比为10∶1。加10倍胶体积蒸馏水浸泡30 min,充分吸水溶胀。将溶胀后的凝胶在沸水浴中充分溶解,在90 ℃的水浴锅中保温备用。

(2)熬糖:将溶解后的麦芽糖醇加热溶化,过滤去除杂质。熬糖温度为100 ℃,搅拌熬煮。用糖度计测定糖度,当糖度达到80%时,停止加热,冷却到70 ℃保温。

(3)调和:糖液中加入0.5 g·L-1柠檬酸溶液、100 g·L-1溶胶、10 mL莲藕提取液,搅拌均匀,70 ℃水浴锅保温。静置直到除去所有气泡。

(4)干燥:将排尽气泡的糖浆混合物倒入准备好的模具中,放入4 ℃冰箱冷却,待冷却成型后脱模,将得到的莲藕软糖在30 ℃下干燥24 h, 每隔3 h翻一次面。

1.3.5 莲藕解酒软糖产品性质测定

采用质构仪进行产品物性分析,测定方法参考杨娟等[10]的方法。软糖中的致病菌测定参考GB29921—2013《食品安全国家标准食品中致病菌限量》(已废止)。菌落总数测定参考GB4789.2—2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验菌落总数》。软糖理化指标的测定参照SB/T 10021—2017《糖果 凝胶糖果》。

1.3.6 莲藕解酒功能软糖体外抗氧化活性测定

对不同莲藕提取物添加量的解酒软糖进行自由基清除率测定。莲藕解酒功能软糖的DPPH自由基清除率测定采用Wang等[11]的方法稍作修改。取0.5 mL的各浓度未凝固软糖调和液和0.5 mL的0.2 mmol·L-1DPPH乙醇溶液混合并剧烈振摇。空白对照组为等体积去离子水代替样品,在室温下避光孵育30 min,测量反应混合物在517 nm处的吸光度。使用以下公式计算DPPH自由基清除活性:

(3)

式(3)中:A0是对照(去离子水代替样品溶液)的吸光度,A1是样品的吸光度,A2是在与A1相同的条件下用乙醇代替DPPH溶液的样品的吸光度。

莲藕解酒功能软糖的·OH自由基清除活性通过Lim等[12]的方法测量,稍作修改。在试管中加入1.0 mL各浓度未凝固软糖调和液,1.0 mL 2.5 mmol·L-1的FeSO4,1.0 mL 2.5 mmol·L-1的H2O2和1.0 mL 9 mmol·L-1水杨酸-乙醇溶液。混匀后37℃下孵育30 min,空白对照组用去离子水代替样品,测量510 nm处的吸光度。使用以下公式计算·OH自由基清除率:

(4)

式(4)中:A0是对照(去离子水代替样品溶液)的吸光度,A1是样品的吸光度,A2是在与A1相同的条件下用水杨酸-乙醇溶液代替FeSO4的样品的吸光度和H2O2溶液。

莲藕解酒功能软糖的ABTS+自由基清除率的测定参考Xiao等[13]的方法,稍作修改。将7 mmol·L-1的ABTS+盐溶液和2.5 mmol·L-1的过硫酸钾溶液取等体积混合均匀后在黑暗条件下稳定16 h。然后用蒸馏水稀释至溶液在734 nm处的吸光度在0.70±0.02之间即为反应液。在0.1 mL各浓度未凝固软糖调和液中加入1 mL ABTS+反应液,混匀,室温反应30 min,测量734 nm处的吸光度。

(5)

式(5)中:As为含有样品和ABTS+的吸光度,Ac为不含样品但含ABTS+的吸光度,Ab为不含样品和ABTS+的吸光度。

莲藕提取物对自由基清除效果用半抑制量(IC50)表示。IC50计算方法为将测定得到的DPPH、ABTS+和·OH自由基清除率与浓度曲线所得的回归方程,计算莲藕提取物将自由基清除至50%时的浓度。

1.3.7 动物实验分组及醒酒效果评价

通过灌胃白酒建立小鼠急性酒精中毒模型,测定各组小鼠的醉酒率、死亡率、醉酒潜伏期和醉酒睡眠时间等指标来检验莲藕解酒软糖的解酒功效[14]。取雄性BALB/C小鼠20只,按体重将小鼠随机分为模型组和莲藕解酒软糖干预组,每组10只,用苦味酸染色标记,适应性喂养7 d。实验前,各组小鼠禁食不禁水12 h后,模型组按0.01 mL·g-1体重的灌胃体积灌胃蒸馏水,莲藕解酒软糖干预组按1 g·kg-1的剂量,0.01 mL·g-1体重的灌胃体积灌胃莲藕解酒软糖调和前溶液。30 min后模型组和给药组小鼠分别以0.02 mL·g-1体重的灌胃体积灌胃45度的白酒。观察两组小鼠灌酒后的精神状态,记录各组醉酒率、醉酒潜伏期的时间(从灌酒结束到翻正反射消失的时间)、翻正反射恢复时间(从灌酒结束到翻正反射恢复的时间)。

1.3.8 莲藕解酒软糖对小鼠乙醇代谢的影响

取雄性BALB/C小鼠30只,按体重将小鼠随机分为模型对照组、莲藕解酒软糖干预组、空白对照组,每组10只,用苦味酸染色标记,适应性喂养7 d。小鼠醉酒模型的建立方法及灌胃剂量同1.3.7节,空白对照组小鼠灌胃等体积的蒸馏水。

灌酒60 min后,对小鼠摘眼球取血,血液置于促凝管中,3 000 r·min-1离心5 min,取上清液血清于冻存管中。采血后,将小鼠断颈处死,解剖取出新鲜肝脏,取小鼠肝脏同一位置的组织适量,以1∶9(g/mL)的比例加入0.9%的冰生理盐水,在低温组织匀浆仪中破碎,以3 500 r·min-1转速,将组织液离心10 min,分离上清可得到10%的肝脏匀浆液,于-80 ℃下保存,采用南京建成生物技术有限公司的血乙醇测定试剂盒测定各组小鼠血清中乙醇的含量和ADH活性,具体操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。

1.4 数据统计与分析

所有实验均重复3次,测定结果以平均值±标准差(Mean±SD)表示,采用Excel 2010软件统计试验数据,采用SPSS 25.0软件进行方差分析和单因素ANOVA分析,不同字母表示存在显著差异(P<0.05)。采用Origin2021软件绘图。

2 结果与分析

2.1 单因素实验结果

2.1.1 提取溶剂的体积分数对莲藕提取物ADH激活率的影响

根据前期实验得出,用甲醇作为溶剂的莲藕提取物在体外对ADH具有一定的激活作用[15]。确定反应温度为50 ℃,反应时间为3 h,反应料液比为1∶30的条件下,探究不同体积分数的甲醇对莲藕提取物的ADH激活率的影响。实验结果如图1所示,随着甲醇体积分数不断增大,提取物的ADH体外激活率逐渐上升,100%甲醇作为溶剂的莲藕提取物对ADH具有最高的激活作用(18.89%±2.46%)。不同体积分数的甲醇具有不同的极性,提取得到成分极性也会不同,因此甲醇体积分数这一因素是决定性的。在正交试验设计中选择的甲醇体积分数分别为80%、90%、100%。

不同处理间没有相同小写字母表示差异显著(P<0.05)。下同。The data without the same lowecase letters show the significant difference (P<0.05). The same as below.

2.1.2 提取温度对莲藕提取物ADH激活率的影响

取莲藕粉末2 g,以提取过程中料液比为1∶30、提取时间2 h、提取物溶剂为100%甲醇为条件,考察不同提取温度对提取物ADH激活率的影响。实验结果如图2所示,随着提取温度不断上升,莲藕提取物对ADH激活率呈现先上升后下降的趋势,这可能是因为提取温度越高,分子扩散速率也越快,提取率升高,但是温度持续升高会破坏提取物生物活性[16]。60 ℃时提取物的ADH激活率最高,此时莲藕提取物的ADH激活率为17.40%±1.06%。在正交试验设计中选取提取温度为50、60、70 ℃。

图2 不同提取温度对莲藕提取物对ADH激活率的影响Fig.2 Effect of different extraction temperatures on the activation rate of ethanol dehydrogenase from lotus root extracts

2.1.3 提取时间对莲藕提取物ADH激活率的影响

取莲藕粉末2 g,确定提取过程中料液比为1∶30,提取物温度为50 ℃,提取物溶剂为100%甲醇,考察不同提取时间对提取物ADH激活率的影响。实验结果如图3所示,随着提取时间不断延长,莲藕提取物对ADH的激活率也在不断上升。提取物5 h后达到峰值(15.70%±0.13%),随后莲藕提取物的ADH激活率不再随着提取时间的延长而提高。在正交试验设计中选择的提取物时间为3、4、5 h。

图3 不同提取时间对莲藕提取物的ADH激活率的影响Fig.3 Effect of different extraction times on the activation rate of ethanol dehydrogenase from lotus root extracts

2.1.4 提取料液比对莲藕提取物ADH激活率的影响

取莲藕粉末2 g,确定提取时间为3 h,提取物温度为50 ℃,提取物溶剂为100%甲醇,考察不同料液比对提取物ADH激活率的影响。实验结果如图4所示,随着溶剂体积的不断增大,莲藕提取物的ADH激活率呈现上升趋势,这是因为料液比较低,溶液黏度大,活性分子不易发生扩散,因此提取率较低。当液料比逐渐升高时,由于有浓度差,分子扩散速率加快,提取率升高[17],对ADH的激活率也会提高。当料液比为1∶40时,莲藕提取物的ADH激活率最高,为(17.13±0.93)%。随着料液比继续增大,提取物对ADH的激活率的增加不显著,因此在正交试验中选择的料液比为1∶40、1∶45、1∶50。

图4 不同料液比对莲藕提取物的ADH激活率的影响Fig.4 Effect of different material-liquid ratios on the activation rate of ethanol dehydrogenase from lotus root extract

2.2 正交试验结果

根据单因素实验结果,选定A(甲醇体积分数),B(提取时间),C(提取温度),D(料液比)4个因素,采用表1中 L9(34)正交试验设计确定 4 种因素的最优组合为A3B3C2D1,结果见表2。

表1 正交试验因素与水平设计

表2 正交试验结果

由表2实验结果可以得出,影响莲藕提取物对ADH激活率的因素顺序为A>C>D>B。即甲醇体积分数影响最大,其次是提取温度,之后是料液比,最后是提取时间。由表3可知,甲醇的体积分数和提取温度对提取物的ADH激活率有显著影响。这是因为不同体积分数的甲醇具有不同的极性,所得的提取物种类和含量也有所不同。而其他3个因素只是在此基础上对提取率进行一定程度提高。结合正交试验结果,确定的最优提取工艺为A3B3C2D1,即溶剂选用100%甲醇,提取时间5 h,提取温度60℃,料液比1∶40,在此条件下莲藕提取物ADH体外激活率平均值为(19.60±2.10)%。

表3 莲藕解酒成分提取工艺方差分析

2.3 莲藕提取物成分鉴定

对正交试验获得的莲藕提取物成分进行解析,如图5所示,多反应检测模式下MRM代表莲藕提取物中的不同成分,图中不同颜色代表不同化合物,共检测到433种化合物,图6为莲藕甲醇提取物中的物质组成,其中包括98种酚酸类物质、138种黄酮类化合物及其衍生物、43种木脂素和香豆素、4种鞣质、72种生物碱、44种萜类、34种其他类物质。其中酚酸类成分主要有水杨酸、2,5-二羟基苯甲醛、原儿茶醛、肉桂酸、咖啡酸、阿魏酸、儿茶素等;黄酮类成分主要有没食子儿茶素、儿茶素、儿茶素、二氢槲皮素、柚皮素、香叶木素、3,4′-二羟基黄酮、异牡荆素等;生物碱类成分主要包括荷叶碱、6-脱氧荞麦碱、山矾碱、O-降荷叶碱、莲碱、葫芦巴碱、亚美罂粟碱等;萜类物质主要包括熊果酸、常春藤皂苷元、2,3-二羟基-12-熊果烯-28-酸、坡模酸、山楂酸、24,30-二羟基-12(13)烯羽扇豆醇、布卢门醇 C、2-羟基齐墩果酸等;木脂素和香豆素类成分主要包括表松脂醇、东莨菪内酯、去氢二异丁香酚、落叶松脂醇、二氢香豆素、(7R,8S)-二氢去氢二松柏醇等。

A,正离子模式;B,负离子模式。A, Positive ion mode; B, Negative ion mode.

图6 莲藕提取物代谢物分布图Fig.6 lotus root extract metabolites distribution

2.4 莲藕解酒软糖产品品质特性

莲藕解酒功能软糖的品质特性如下:外观均匀透明,无气泡,颜色棕黄色,有光泽,整体气味柔和,口感佳,无杂质,平均硬度9.72 N,平均颗质量7.25 g,水分13%,回弹性0.39,平均弹性0.97 mm,咀嚼度245.76 mJ,胶着性295.74 mm,菌落总数≤200 CFU·g-1,未检出致病菌,产品相关的感官、理化指标和微生物指标均符合国家标准要求。

2.5 莲藕解酒软糖体外抗氧化活性测定

随着添加到凝胶中的莲藕提取液浓度的增加,莲藕解酒软糖对ABTS+自由基、·OH自由基和DPPH自由基的清除率也不断提高。莲藕提取液对3种自由基清除效果也有所差异,如图7所示,莲藕提取物对ABTS+自由基、·OH自由基和DPPH自由基清除率的IC50分别为14.59 mg·mL-1、101.96 mg·mL-1和5.54 mg·mL-1,相同浓度下,莲藕提取液对DPPH自由基清除率最高,其次为ABTS+自由基,对·OH自由基清除率最弱。

图7 不同浓度莲藕提取液对ABTS+自由基(A)、·OH自由基(B)和DPPH自由基(C)清除率的影响Fig.7 Effects of different concentrations of lotus root extract on ABTS+ free radicals(A), ·OH radical (B) and DPPH free radicals (C) clearance rate

2.6 莲藕解酒软糖醒酒效果评价

莲藕解酒软糖醒酒功效实验结果如表4所示,与模型组相比,莲藕解酒软糖干预后显著(P<0.05)延长了小鼠平均醉酒潜伏时间,同时极显著(P<0.01)地缩短了醉酒后翻正反射恢复时间。此外,莲藕解酒软糖干预后将小鼠醉酒率降低了20%。结合以上实验结果,表明莲藕功能解酒软糖具有一定的解酒功效,可以有效缓解醉酒症状。

表4 莲藕解酒功能软糖解酒效果评价

2.7 莲藕解酒软糖对小鼠乙醇代谢速率的影响

测定各组小鼠灌胃白酒1 h后的血清乙醇含量,实验结果如图8所示。灌胃白酒后会导致小鼠血液中乙醇含量激增并造成小鼠肝脏ADH活性降低。与模型组相比,在喂食莲藕解酒软糖后的小鼠血乙醇含量下降了21.35%,ADH活性提高了52.32%。说明莲藕提取物可以通过激活小鼠体内解酒酶活性,加速乙醇在体内的代谢速率,从而达到醒酒效果。

图8 莲藕解酒功能软糖对小鼠血清乙醇含量和肝脏ADH活性的影响Fig.8 Lotus root relieving alcoholism functional gel fudge on ethanol content in mouse serum and ADH activity in mouse liver

3 讨论

过量饮酒会对机体造成诸多损害。健康人群肝脏对酒精的平均代谢速率为15~20 mg·dL-1· h-1,当酒精摄入量大于肝脏的处理能力时,会导致酒精及其代谢物的积累,进而诱发中毒症状[18],主要表现为心跳加速、头晕恶心、说话障碍、协调障碍、步态不稳定、肠胃不适等许多不良反应。严重时可导致昏迷,呼吸抑制甚至死亡[19]。近年来发现了越来越多的食源性天然产物具有解酒护肝作用,解酒护肝成分主要集中在黄酮[20-21]、多酚[22-23]、多糖[24-25]、天然色素[26]等天然代谢产物。莲藕中含有大量的多酚、黄酮和生物碱类化合物,具有良好的抗氧化活性,相关的实验研究表明,物质的抗氧化活性与其解酒活性有一定的关系[7,27-29]。本文以ADH体外激活率为指标,通过单因素实验和正交试验筛选出莲藕最佳解酒成分的提取条件。利用UPLC-QTOF-MS/MS对此工艺条件的莲藕提取物进行成分解析,结果表明提取物组分中超过一半的成分为多酚和黄酮类物质,其次为生物碱类和萜类,实验结果与本实验室前期研究结果一致。根据本实验室之前的研究结果得出莲藕中的香叶木素、6-甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮、(7R,8S)-二氢去氢二松柏醇、亚美罂粟碱、N-Methylcorydaldine、波尔定碱、甲基乌药碱可能是缓解急性酒精中毒的关键成分[15]。

因此,具有良好抗氧化活性的天然物质可能具有一定的解酒护肝潜力。莲藕是一种具有很强抗氧化活性的蔬菜。郭长江等[31]比较了36种蔬菜的抗氧化活性,结果显示莲藕的抗氧化活性最强。莲藕解酒软糖抗氧化能力随着软糖中莲藕提取液浓度的提高而增强,表明莲藕提取物可能是莲藕软糖中主要抗氧化成分。动物实验结果表明,莲藕解酒软糖具有良好的防醉和醒酒效果,这可能是通过激活小鼠体内ADH活性,加速乙醇代谢速率,减少乙醇的生物利用度,从而达到解酒功效。

近年来,越来越多的功能性成分被制成具有一定功效的凝胶软糖,与药物相比,功能性凝胶软糖具有易携带、口感好、利于吸收等优势,因此功能凝胶软糖逐渐成为人们更乐于接受的健康食品。本文将莲藕中具有潜在解酒功效的成分添加到凝胶软糖的制作当中,对莲藕资源进一步开发以及解酒功能组分的提取工艺提供了一定参考价值和理论依据。

4 结论

本实验通过单因素实验和正交试验,筛选出对ADH具有最高激活率的莲藕提取物的提取工艺,即溶剂选用100%甲醇,料液比1∶40, 60 ℃提取5 h。将最佳提取工艺得到的提取物添加到软糖中,并测定软糖的体外抗氧化活性,结果表明莲藕解酒软糖对ABTS+自由基、DPPH自由基和·OH自由基均有清除效果。最后评价了莲藕解酒软糖对醉酒小鼠的醒酒功效评价,与模型组小鼠相比,服用了莲藕解酒软糖的小鼠的醉酒潜伏时间延长,翻正反射恢复时间缩短;灌酒1 h后小鼠血清中乙醇含量显著低于模型组,小鼠肝脏ADH活性显著提高。说明莲藕解酒软糖可以降低血清乙醇含量,恢复解酒酶活性,加速乙醇代谢,缓解醉酒症状。

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