澳洲白羊与呼伦贝尔羊杂交对母羊繁殖性能及妊娠期生殖激素分泌的影响

陈炯阳，程 艳，伍志武，王 标，杨燕燕，杨 青，贺志雄，谭支良

（1.湖南农业大学动物医学院，湖南 长沙 410128；2.中国科学院亚热带农业生态研究所/亚热带农业生态过程重点实验室/畜禽养殖污染控制与资源化技术国家工程实验室/湖南省畜禽健康养殖工程技术研究中心/动物营养生理与代谢过程湖南省重点实验室/中国科学院亚热带农业生态研究所公共技术中心，湖南 长沙 410125；3.内蒙古自治区农牧业科学院，内蒙古 呼和浩特 010031）

杂种优势是指杂种后代的一个或多个性状优于纯种亲本的现象［1］。 杂种优势现象的发现与应用已有几个世纪的历史， 我国古代就有将马和驴杂交成骡子，利用杂种优势提高劳动效率的例子。在我国肉羊产业中已有大量利用杂种优势引进国外优质种羊改良本土品种， 提高生产性能和繁殖性能的报道［2-4］。 澳洲白羊是澳大利亚第一个利用现代基因测定手段培育的肉用绵羊品种， 其体型大，生长快，全年发情，具有良好的自动脱毛能力及产肉性能，产羔率可达180%左右［5］。 研究表明，采用澳洲白羊公羊杂交可显著提高小尾寒羊［6-7］、湖羊［8］、青海高原型藏羊［9］等杂交一代羔羊的初生重、成活率、胴体重、日增重、屠宰率和净肉率等。

呼伦贝尔羊主要分布于呼伦贝尔草原， 是一种肉、脂兼用的肥尾羊。由于呼伦贝尔草原冬季漫长、无霜期短、枯草期长，使得呼伦贝尔羊具有耐寒、耐粗饲、抗劣能力强等特点。 呼伦贝尔羊母性强，繁殖成活率和保畜率分别超过96%和98%。作为肉用绵羊品种，呼伦贝尔羊的肉质鲜美、营养丰富、鲜嫩而无膻味，但与我国大多数本土肉羊品种一样，繁殖率较低，母羊的平均产羔率仅为110%左右［10］，且生长速率较慢，极大影响了其在肉羊产业中的经济效益。因此，通过优质公羊对本土呼伦贝尔羊进行杂交改良， 可能是提高呼伦贝尔羊生长速率和繁殖率，实现养殖增收的一个重要途径。

在引入国内外优质绵羊品种与地方品种杂交时， 引入品种或杂交后代对引入地饲养环境的适应性至关重要， 并在一定程度上决定其优良特性是否能够有效发挥［11］。 温度是影响家畜生产性能的重要因素之一。 低温造成的冷应激使家畜体内睾丸激素（testicular hormone）、孕酮（progesterone，P4）、雌二醇（β-estradiol，E2）水平降低，造成公畜精子品质下降、受精能力减弱，母畜不发情或不排卵［12-13］。 呼伦贝尔草原地处我国北部，冬季气温较低，澳洲白羊能否适应呼伦贝尔草原高寒环境，目前暂无报道。 本研究以澳洲白羊为父本对呼伦贝尔羊母羊进行杂交， 探讨杂交对呼伦贝尔羊母羊繁殖性能、后代F1 羔羊初生重以及繁殖母羊妊娠期生殖激素变化的影响， 以期为杂交模式在呼伦贝尔羊上的推广应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验动物分组与饲养管理

试验时间为2021 年11 月—2022 年5 月，试验在内蒙古自治区呼伦贝尔市鄂温克族自治旗中国科学院草牧业工程试验站进行。 采用单因素完全随机设计，选取体型健壮、肥瘦中等、睾丸发育匀称的澳洲白羊公羊7 只和呼伦贝尔羊公羊13只；根据配种公羊的品种，将体况健康、体重相近［（43.9±7.5）kg］ 的392 只呼伦贝尔羊母羊随机分为两组，试验组（n=139）以澳洲白羊为种公羊，对照组（n=253）以呼伦贝尔羊为种公羊，羊群按照公羊和母羊比例为1∶20 进行混合饲养。 在试验站羊舍开展试验，试验前对羊舍全面消毒，对羊群进行驱虫，并按羊场常规免疫程序进行免疫。所有试验羊统一饲喂基础饲粮，参照NRC（2007）《绵羊营养需要》配制，饲粮组成及营养水平见表1。 试验期间饲养环境和饲养管理条件一致， 自由采食和饮水。

表1 基础饲粮组成及营养水平

1.2 繁殖性能数据采集

采集两组母羊的繁殖性能数据，包括母羊的受胎数、流产数、实际分娩数，产双羔母羊数，产羔羊数，羔羊初生重和断奶羔羊成活数，计算受胎率、流产率、实际分娩率、双羔率和断奶羔羊成活率。

1.3 血液样品采集

在妊娠中期（妊娠60 d）、妊娠后期（妊娠90 d）及预产期前10 d， 通过颈静脉采血法采集母羊血样样品，每组8 只，置于采血管中，静置2 h，3 000 r/min 离心10 min， 收集上清液， 标记后分装，置于-80 ℃条件下保存备用。

1.4 生殖激素水平测定

采用ELISA 法测定血清样品中生殖激素的水平， 包括促卵泡素 （follicle-stimulating hormone，FSH）、促 黄 体 素（luteinizing hormone，LH）、P4、E2，具体操作根据试剂盒（武汉华美生物工程有限公司）提供的说明书进行。

1.5 数据统计与分析

利用GraphPad Prism 8 软件对两组母羊的受胎率、流产率、双羔率和羔羊成活率等繁殖性能指标进行χ2检验； 采用t 检验法比较两组母羊所产羔羊的初生重以及同一妊娠时间下两组母羊血清中的生殖激素水平； 采用单因素方差分析法比较对照组或试验组母羊不同妊娠时间下血清中的生殖激素水平，采用LSD 法进行平均数多重比较。试验结果以“平均数±标准差”的形式表示，P>0.05 表示无显著差异，P<0.05 表示差异显著，P<0.01 表示差异极显著。

2 结果与分析

2.1 澳洲白羊公羊与呼伦贝尔羊母羊杂交对母羊繁殖性能的影响

由表2 可知， 试验组和对照组母羊受胎率分别为80.58%（112/139）和89.33%（226/253），杂交后母羊的受胎率显著（P<0.05）降低；试验组和对照组母羊流产率分别为15.18%（17/112）和6.64%（15/226），试验组流产率显著（P<0.05）升高；试验组和对照组母羊实际分娩率分别为84.82（95/112）和93.36（211/226），试验组实际分娩率显著（P<0.05）降低；试验组和对照组母羊双羔率分别为21.05%（20/95）和9.48%（20/211），杂交后母羊的双羔率极显著（P<0.01）升高；试验组和对照组羔羊成活率分别为93.04%（107/115） 和96.97%（224/231），虽然试验组羔羊成活率与对照组相比下降，但两组间无显著（P>0.05）差异。 此外，试验组羔羊初生重、 单羔羔羊初生重和双羔羔羊初生重与对照组相比均无显著（P>0.05）差异（见表3）。

表2 澳洲白羊公羊与呼伦贝尔羊母羊杂交后母羊的繁殖性能指标

表3 澳洲白羊公羊与呼伦贝尔羊母羊杂交F1 代羔羊的初生重

2.2 澳洲白羊公羊与呼伦贝尔羊母羊杂交对妊娠母羊不同时期血清生殖激素分泌的影响

由表4 可知，妊娠中期、妊娠后期、预产期前10 d 3 个不同妊娠时间下， 试验组母羊的血清LH、FSH、E2、P4分泌水平与对照组相比均无显著差异（P>0.05），提示配种公羊的品种对呼伦贝尔母羊不同妊娠阶段血清主要生殖激素水平无显著影响。

表4 不同品种公羊配种对母羊妊娠不同时期生殖激素分泌的影响

对照组母羊在妊娠中期、妊娠后期、预产期前10 d 3 个不同妊娠时间下血清中LH、FSH、E2分泌水平无显著（P>0.05）差异，试验组母羊在3 个不同妊娠时间下血清中LH、FSH 分泌水平无显著（P>0.05）差异。 对照组母羊预产期前10 d 血清中P4分泌水平显著（P<0.05）高于妊娠中期和妊娠后期，妊娠中期血清中P4分泌水平与妊娠后期相比差异不显著（P>0.05）。 试验组母羊妊娠后期血清中E2分泌水平显著（P<0.05）高于妊娠中期和预产期前10 d，妊娠中期血清中E2分泌水平显著（P<0.05）高于预产期前10 d。 试验组母羊妊娠后期和预产期前10 d 血清中P4分泌水平显著 （P<0.05）高于妊娠中期，妊娠后期血清中P4分泌水平与预产期前10 d 相比差异不显著（P>0.05）。

3 讨论

产羔数是衡量母羊繁殖性能的重要指标，绵羊的多羔性状受到遗传背景［14-16］、饲养环境［17-18］和管理［19-20］等多种因素的影响，其中遗传因素是影响绵羊产羔数的主要内在因素。 王志武等［21］引入特塞克尔羊公羊和萨福克羊公羊与山西本地母羊杂交，与纯繁本地母羊相比，杂交母羊的产羔率显著提高。 梁瑞圆等［22］引入了寒泊羊与本地绵羊配种，发现本地母羊的产羔率提高了12.45%。 本研究发现利用澳洲白羊公羊与呼伦贝尔羊母羊杂交，与纯繁呼伦贝尔羊母羊比较，其双羔率显著提高，获得的结果与上述研究类似。母羊高繁殖力受多种主效基因的调控。 研究表明骨形态发生蛋白受体1B 基因（BMPR1B）是绵羊的多胎的主效基因， 产双羔蒙古羊血液中BMPR1B 的含量显著高于单羔组蒙古羊， 且该基因外显子9 的多态性靶点显著影响哥伦比亚毛羊的产羔数［23-24］。Gootwine等［25］研究发现， 阿华西绵羊和阿萨夫绵羊携带FecB 基因突变型（B+型、BB 型）与++型相比，产羔数显著提高， 表明具有高繁殖遗传效应的羊产羔率较高。 在本试验中， 试验组母羊双羔率显著提高，这可能与澳洲白羊的双羔遗传特性有关［26］。

张琴等［27］通过开展澳洲白绵羊和黑杜泊羊与湖羊杂交试验， 发现澳湖组母羊受胎率较纯繁湖羊组无显著变化。 朱爱文等［28］将乌骨绵羊与具有高繁殖力的湖羊进行杂交， 研究发现与纯繁湖羊组相比，乌湖组母羊流产率无明显变化，而在本研究中发现，试验组母羊受胎率显著降低、流产率显著升高，这可能与不同的饲养环境有关。本研究试验期为11 月至次年5 月，呼伦贝尔草原的高寒环境可能影响了澳洲白羊公羊繁殖性能， 使其性欲降低，精子活力下降，同时持续的低温不利于胚胎或胎儿的生长发育［29］，可能影响配种后胚胎的着床，这也是决定胚胎发育的关键时期。 因此，在实际养殖生产中，要综合考虑遗传效应、环境因素、配种方式和养殖管理等因素来进一步优化杂交改良技术、强化配种效应。

生殖激素的分泌水平是评估母体妊娠状态的重要指标。 本试验结果显示，与对照组相比，试验组母羊4 种生殖激素包括FSH、LH、E2和P4的水平在妊娠期间无显著差异。 王玉琴等［30］检测了绵羊妊娠期间血清中E2的浓度，发现随着妊娠时间增加E2水平不断升高，在接近临产期时，因为卵巢活动减弱E2浓度出现下降，从而促使子宫肌对催产素的敏感性增加，同时刺激前列腺素的分泌，有利于分娩启动。 本研究检测也发现试验组母羊妊娠90 d 时，其血清E2水平高于妊娠中期（妊娠60 d），在临产前下降。 华蕊等［31］研究结果显示，海南黑山羊血清中的LH 和FSH 的浓度在整个繁殖周期变化不大，而本研究在妊娠不同阶段，怀孕母羊血清中这两种生殖激素水平虽然有一定的波动，但无显著变化。 在妊娠期间，P4通过抑制子宫的自发活动，降低子宫肌层的兴奋作用，并促进胎盘发育，以维持妊娠。赵晓娥等［32］研究发现怀孕母羊在妊娠期间P4浓度呈不断上升的趋势。 在本研究中试验组和对照组妊娠母羊血清P4水平在妊娠期间均呈上升趋势，其变化规律符合P4的生理功能。

4 结论

澳洲白羊作为父本与呼伦贝尔羊母羊杂交可显著提高后代的双羔率，但由于配种方式、饲养环境等因素的影响， 杂交呼伦贝尔母羊流产率有所升高，且受胎率降低。综上，在实际养殖生产中，要综合考虑遗传效应、环境因素、配种方式和养殖管理等因素来进一步优化杂交改良技术， 突出杂交优势。