HPV-DNA 分型检测联合TCT检查用于宫颈癌筛查的临床价值研究

饶海琴 黄婷

1 高安市妇幼保健院检验科 （江西 高安 330800）

2 高安市妇幼保健院妇科 （江西 高安 330800）

内容提要： 目的：探讨人乳头瘤病毒（HPV）-DNA分型检测联合宫颈薄层液基细胞学（TCT）检查用于宫颈癌筛查的临床价值。方法：选择2021年6月～2022年12月本院收治的宫颈病变患者256例，所有入选者均行HPV-DNA分型、TCT。以阴道镜活检为金标准，分析HPV-DNA分型检测、TCT检查单项与联合诊断宫颈癌的价值，并计算一致性。结果：256例宫颈病变患者，经阴道镜检查发现156例阳性，检出率为60.94%。TCT、HPV-DNA联合诊断的灵敏度96.15%、特异度95.00%、准确度95.70%、阳性预测值96.77%、阴性预测值94.06%均高于TCT、HPV-DNA，差异有统计学意义（P＜0.05）。TCT、HPV-DNA联合诊断宫颈癌与阴道镜检查结果的一致性优于TCT与HPV-DNA。结论：宫颈癌筛查中使用HPV-DNA分型检测联合TCT检查可提高诊断准确率，为临床诊疗提供更多参考信息。

宫颈癌在临床较为常见，在女性恶性肿瘤中其发生率居首位，且呈现出年轻化趋势，对女性健康及生命安全造成较大威胁[1]。宫颈癌有一个较长的癌前病变过程即子宫颈上皮内瘤变（Cervical intraepithelial neoplasia，CIN），从发病到癌变时间较长，可反映宫颈癌前期病变的整个过程，若在此阶段进行准确的鉴别诊断，并予以积极有效的治疗方法，可预防癌变发生，改善患者预后[2]。既往临床诊断宫颈病变多以巴氏细胞学技术为主，但受样本取材等因素影响导致假阳性较高，涂片质量不理想，准确率有待提高。近些年，随着医学技术快速发展，宫颈癌筛查技术得到革新与完善，人乳头瘤病毒（Human papillomavirus，HPV）、宫颈薄层液基细胞学（Cervical thin layer liquid based cytology，TCT）均在临床得到广泛应用，并展现出一定优势[3,4]。相比以往巴氏细胞学技术，TCT的取材方式与制作方法均有了很大改良，标本质量有所提高，一定程度上降低了假阳性发生率。CIN、宫颈癌的发生发展均与HPV感染关系密切，高危HPV持续感染是导致宫颈病变的重要原因，故检测HPV-DNA分型在宫颈癌疾病筛查中有重要意义[5]。本研究旨在探讨HPV-DNA分型检测联合TCT检查用于宫颈癌筛查的临床价值。具示如下。

1.资料与方法

1.1 临床资料

经医学伦理委员会批准，选择2021年6月～2022年12月本院收治的宫颈病变患者256 例，年龄28～67 岁，平均（38.41±5.56）岁；体重39～75kg，平均（58.77±4.45）kg；婚姻状况：198例已婚，15例离异，6例丧偶，37例未婚；学历：53例初中及以下，108例中专及高中，95例大专及以上。

纳入标准：①入选者均自愿进行HPV-DNA分型、TCT检查；②均有性生活史；③无宫颈疾病治疗史或盆腔照射史；④同意书由患者自愿签署。

排除标准：①妊娠期或哺乳期；②近3d有阴道用药或性生活；③伴有生殖系统感染者；④脏器功能衰竭；⑤交流障碍；⑥拒绝参与本次研究。

1.2 方法

入选者均进行HPV-DNA分型、TCT、阴道镜检查，避开经期，近3d未同房、阴道未用药，检查前向受检者简单说明检查步骤，取得受检者理解与配合，嘱咐受检者放松身心，保持平稳呼吸，配合操作者。

HPV-DNA分型检查：以膀胱截石位进行检查，完全暴露宫颈，擦拭宫颈表面分泌物，可使用无菌棉签擦拭，自外口插入取样器，旋转5圈，以顺时针的方式进行，需停留10s，将取样器取出折断，置入标本保存液内送检，首先进行离心操作，沉淀物检测方法为PCR-反向点杂交法。检测16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、73、82等15种高危型HPV。首先PCR扩增待检测样品，将膜条上的特异性探针与所得的PCR产物杂交，特异性结合后进行显色和结果分析。

TCT检查：受检者取膀胱截石位，尽可能暴露宫颈，擦拭宫颈表面分泌物，擦拭工具为无菌棉签，向宫颈管内插入采样刷，深度以1cm为宜，旋转5圈，以顺时针的方式进行，取样器使用Thinprep细胞保存液保存，振荡10次，进行标本分离，将标本中的上皮细胞与黏液、血液分泌物、炎细胞均分离，使用HZ-18T液基薄层制片机制备薄层细胞涂片，制片机购三明市和众生物技术有限公司，随后进行染色，使用显微镜进行观察。结果判断标准：非典型腺细胞（ atypical glandular cells，AGC）、单纯炎症未见上皮细胞病变（intraepithelial or malignant lesions，NILM）、鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）、高度瘤变（high degree squamous intraepithelial lesion，HSIL）、不典型鳞状细胞（atypical squamous cells with unclear significance，ASCUS）、不能排除高级别鳞状上皮内病变的非典型鳞状上皮细胞（atypical squamous cells: cannot exclude high-grade squamous intraepithelial lesion，ASC-H）、腺癌（ acinic cell carcinoma，ACC）、低度瘤变（low degree squamous intraepithelial lesion，LSIL）。除NILM外均为阳性。

阴道镜检查：取膀胱截石位，尽可能暴露宫颈，擦拭宫颈表面分泌物，擦拭工具为无菌棉签，以低倍镜观察宫颈外形、颜色，滤镜观察血管特点，湿敷宫颈，湿敷液为冰醋酸液，对颜色、血管形态进行观察，一旦发现异常需取此处标本组织送检，若无明显典型异常表现可取3、6、9、12处组织送病理检查，病理科医师进行独立阅片。

1.3 观察指标与判定标准

以阴道镜活检结果作为金标准，分析HPV-DNA分型检测、TCT检查单项与联合诊断宫颈癌的价值，并计算与金标准的一致性。真阳性用a表示，真阴性用d表示，假阳性用c表示，假阴性用b表示。灵敏性=a/(a+c)，准确度=(a+d)/n，特异性=d/(b+d)，阴性预测值=d/(c+d)，阳性预测值=a/(a+b)。

1.4 统计学分析

采用SPSS 22.0统计分析软件，计数资料以%表示，采用χ2检验；一致性采用Kappa检验；P＜0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 阴道镜检查结果

256例宫颈病变患者，经阴道镜检查发现100例为炎症病变，83例CIN Ⅰ，38例CIN Ⅱ，30例CIN Ⅲ，5例SCC，阳性检出率为60.94%（156/256）。

2.2 诊断结果

TCT、HPV-DNA联合诊断的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值均高于TCT、HPV-DNA，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1～2。

表1.TCT、HPV-DNA单项及联合诊断结果(n)

表2.TCT、HPV-DNA单项及联合诊断效能对比

2.3 HPV-DNA、TCT单项与联合诊断与阴道镜检查结果的一致性

TCT 诊断宫颈癌与阴道镜检查结果的一致性差（Kappa=0.245，P＜0.05），HPV-DNA 诊断宫颈癌与阴道镜检查结果的一致性理想（Kappa=0.425，P＜0.05），TCT、HPV-DNA联合诊断宫颈癌与阴道镜检查结果的一致性极好（Kappa=0.910，P＜0.05）。

3.讨论

随着生活节奏加快以及女性工作压力增加，宫颈癌的发病率逐年升高，对女性生殖健康造成较大影响，患者早期若能获得系统高效的治疗可控制疾病进展，预后较为理想，因此需尽早明确诊断[6]。常规巴氏涂片法为常用方法，但受取材因素影响，标本污染率高，导致误诊情况频发，诊断效能不尽如人意。因此，临床需积极寻找更加准确的诊断方法[7]。

随着细胞学筛查用于临床，宫颈癌疾病早期筛查检出率有所提高，TCT取材、制片等操作均严格按照工艺流程进行，对标本进行系统化处理，减少外界因素带来的干扰，便于清晰、均匀的观察细胞分布，细胞辨识度随之增加，可防止细胞丢失或污染，获得高质量制片，利于及时发现异常的宫颈上皮细胞[8,9]。但随着临床研究发现，性生活规律的成年女性进行TCT检查阳性检出率为6%左右，导致存在一定的误诊情况，临床应用仍有局限性[10]。宫颈癌前病变与宫颈癌的发生发展均与HPV感染存在密切关系，临床已将HPVDNA分型检测作为重要的筛查手段。本研究结果显示，256例宫颈病变患者，经阴道镜检查发现100例为炎症病变，83例CIN Ⅰ，38例CIN Ⅱ，30例CIN Ⅲ，5例SCC，阳性检出率为60.94%（156/256）。TCT、HPV-DNA联合诊断的灵敏度96.15%、特异度95.00%、准确度95.70%、阳性预测值96.77%、阴性预测值94.06%均高于TCT、HPV-DNA。TCT诊断宫颈癌与阴道镜检查结果的一致性差，HPV-DNA诊断宫颈癌与阴道镜检查结果的一致性理想，TCT、HPV-DNA联合诊断宫颈癌与阴道镜检查结果的一致性极好。表明宫颈癌筛查中使用HPV-DNA分型检测联合TCT检查应用价值较高，灵敏度、特异度均优于各项单一诊断，利于提高诊断准确率，为临床鉴别诊断提供更多参考信息。黄艳等[11]研究显示，宫颈病变与高危型HPV感染存在密切关系，HPV基因分型检测在早期宫颈癌及癌前病变筛查中的灵敏度、准确度均高于TCT，在临床应用具有较高价值，可为早期诊断提供更多有价值的参考，与本研究结果存在相似之处，进一步佐证HPV基因分型检测的应用价值。分析其原因为，HPV由环形DNA病毒构成，是重要的病原体，包含低危型与高危型，数十种高危型HPV均与宫颈癌有密切关系，而癌前病变患者均伴有HPV感染，故HPV检测敏感度较高，为临床诊断与治疗均提供较多的参考信息[12]。HPV-DNA分型检测联合TCT检查可提高宫颈癌检出率，诊断效能较高，为临床鉴别诊断提供更多参考依据，便于制定治疗方案。

综上所述，宫颈癌筛查中使用HPV-DNA分型检测联合TCT检查应用价值较高，灵敏度、特异度均优于各项单一诊断，利于提高诊断准确率，为临床鉴别诊断提供更多参考信息。