聂文军 杜君 王敏 刘方旭
DOI: 10.3969/j.issn.1003-1650.2024.04.032
随着社会经济的发展,人们生活水平的提高,人们对药物残留、细菌耐药性、环境污染以及食品安全等问题越来越关注。畜禽产品安全人们也受到高度关注,饲料禁抗、药物限抗、替抗已经成为需要解决的新问题。2019年,我国已进入限抗、禁抗的畜牧业健康发展新时代。中药因为其本身优点在禁抗、替抗的时代背景下,受到人们越来越关注。中药在我国有着悠久的历史,有着独特的理论体系,它不但可以治疗疾病,而且可以用于预防疾病,并且具有康复保健的作用。中药不同的类型具有不同的作用,比如说它可以清热泻火,可以发散风寒,可以清热解毒,可以祛风散寒,可以补气补血,可以活血止痛等等。有的中药还有增进食欲、促进生长、提高生产性能的作用。本试验重点研究中药对林下鸡生长性能及肠黏膜免疫球蛋白A(sIgA)的影响。试验将2000只1日龄的皖南三黄鸡,随机分成2组,每组设立5个重复小组,每个重复小组各200只;Ⅰ组为试验组,饲料中添加中药,Ⅱ组为对照组,不添加任何药物。试验用时40周,试验结束后采集肠道,评估中药对鸡生长性能及肠道免疫水平、肠道形态的影响。结果显示,试验组鸡死淘率显著低于对照组;试验组的平均日增重显著高于对照组,料肉比低于对照组;试验组十二指肠肠黏膜免疫球蛋白A含量显著高于对照组。其次,肠组织经过HE染色分析:试验组的十二指肠形态较对照组相对完整,无明显炎性浸润。综上,研究表明日粮中添加中药可降低鸡死淘率,提高鸡生长性能和肠道免疫功能。
一、 實验材料与方法
1、实验药物
中药组使用药物:益阳康、肠亦舒、硒芪素、呼亦舒、球利康、威加康,由南京农业大学中兽医实验室研发,南京欧贝威生物技术有限公司提供。益阳康:党参白术粗提物,用于改善动物代谢,提高动物活力和抗病力,促进发病动物恢复健康;用法用量:混饮,500g兑水1000kg;混饲,500g拌料500kg。肠亦舒:蒲公英粗提物,用于保护肠黏膜、改善肠道功能和促进营养消化吸收;用法用量:混饮,500g兑水1000kg;混饲,500g拌料500kg。硒芪素;黄芪粗提物,用于提高动物机体免疫力和抗感染能力,抗氧化自由基,提升免疫效果,延长疫苗保护时间;用法用量:混饮,500g兑水1000kg;混饲,500g拌料500kg。呼亦舒:甘草粗提物,用于保护呼吸道黏膜、清除呼吸道痰液、改善肺的净化和呼吸功能。用法用量:混饮,500g兑水1000kg;混饲,500g拌料500kg。威加康:黄芪、人参叶等粗提物,用于提高动物免疫力,改善营养吸收,提高抗应激能力和促生长;混饲,500g拌料1000kg。
2、实验动物及分组
试验采用1日龄皖南三黄鸡2000只,由南京市浦口区柠凰家庭农场提供,0~6周龄在育雏室内统一育雏,7~40周龄实施放牧散养,密度为1000只/hm2。饲料采购自滁州正大有限公司,根据HY/T 33—2004 《肉仔鸡饲养标准》设计营养水平、饲料搭配和喂料量。
2000只鸡随机平均分成2组,每组设立5个重复组,每个重复组200只。中药组在饲料中添加中药,所有中药均严格按照说明书规定的剂量与方法进行使用,对照组不添加任何药物。两组鸡均参照《优质林下鸡养殖技术》进行饲养管理、营养水平、饲料搭配及免疫程序。研究过程中,所有实验鸡白天在林间固定试验区域内自由活动,晚上集中归巢,并且喂养的饲料来源于同一厂家,饲料量均相同。
3、检测指标与方法
①比较两组鸡的死淘率。即通过饲养40周后两组鸡中死亡与淘汰的只数,统计出死淘率。
②比较两组鸡的生长性能。饲养后每周末从每个重复单元中随机选择20只鸡进行称重,并且每天记录各重复单元的存栏数量、饲料消耗量,计算出平均日增重与料肉比。
③比较两组鸡肠黏膜免疫球蛋白A(sIgA)水平。分别从对照组与中药组鸡群中随机抽取5只作为实验对象,对其严格禁食8h后实施颈动脉放血致死,待鸡死后解剖,取出小肠段,实施纵向切开,分别将鸡十二指肠、空肠以及回肠上的黏膜刮取下来,肠黏膜跟生理盐水按照质量体积比1:1进行稀释,再将二者充分混合,置于离心机上离心处理15分钟,离心完毕后将上清液分离出来测量sIgA的含量,测量方法选用双抗夹心法,所有操作均严格按照仪器与试剂盒的说明书开展。
④观察并对比两组鸡的肠道形态。测定方法如下:将小肠取出后,在没有挤压的情况下取相同位置的十二指肠(即肌胃与十二指肠后端3cm左右连接处)、空肠(十二指肠跟空肠连接处后10cm处)、回肠各2cm,应用生理盐水对其轻轻冲洗后,再放入多聚甲醛溶液中置于常温下进行保存,在固定处理超过24h后再将其从固定液中取出,将目标部位的组织修剪平整,实施梯度乙醇脱水后浸蜡处理,浸好蜡的组织包埋并制作成切片,分别实施苏木精染色与伊红染色,染色完毕后封片,通过显微镜进行观察并采图。
⑤检测并对比两组鸡的免疫抗体情况。鸡群均严格按照免疫程序同时同人同剂量进行免疫,从第5周开始,随机分别从中药组和对照组中采集10只鸡的血样进行禽流感H5、新城疫免疫抗体的检测,并对两组结果进行对比。
4、统计学方法
在本实验中,两组鸡数据的比较分析借助SPSS21.0数据统计软件,鸡的数量用n进行表示,观察指标中涉及计数的资料以百分数进行表示,涉及计量的资料用均数(±)进行表示,分别用x2与t实施检验,当P值低于0.05时,提示差异明显。
二、 实验结果
1、 死淘率
对照组1000只,死淘85只,死淘率为8.50%,中药组1000只,死淘42只,死淘率为4.20%。结果说明中药可以降低鸡群的死淘率,且组间差异具备统计学意义(P<0.05)。
2、 生长性能
对照组的平均日增重为13.70g,方差为0.24g,中药组的平均日增重为15.19g,方差为0.21g;对照组的料肉比为5.17,方差为0.31,中药组的料肉比为4.83,方差为0.24,且组间差异具备统计学意义(P<0.05)。中药组相比对照组,可以提高鸡群日增重,促进饲料转化率。
3、 肠道sIgA水平
采集鸡的小肠段、空肠段、回肠段,检测肠黏膜免疫球蛋白A含量,对照组各肠段的肠黏膜免疫球蛋白含量分别为:3.09 ng/ml、5.36 ng/ml、4.92 ng/ml,共13.37 ng/ml;中药组分别为: 4.68ng/ml、7.12 ng/ml、8.06 ng/ml,共19.86 ng/ml。中药组的肠黏膜免疫球蛋白A水平显著高于对照组,且组间差异具备统计学意义(P<0.05),试验证明中药可以提高鸡肠道黏膜免疫功能,抵抗病原微生物的侵害。
4、肠道形态
对照组:十二指肠明显炎性浸润,肠道上皮绒毛严重萎缩;中药组:十二指肠肠道相对完整,炎性浸润不明显。结果表明:中药组可以显著控制肠道炎症,保护肠道绒毛完整性。
5、免疫效果
对照组:禽流感H5N1 Re-11株的平均抗体效价分别为log2的5.3、6.2、7.4、8.2、9.5、9.8、8.4、7.2;新城疫的平均抗体效价分别为log2的4.5、5.6、7.2、9.2、10.3、9.8、9.5、8.9;中药组:禽流感H5N1 Re-11株的平均抗体效价分别为log2的5.3、6.3、7.8、9.2、10.3、10.5、10.8、10.3;新城疫的平均抗体效价分别为log2的4.5、5.7、7.8、9.8、10.8、10.7、10.5、10.6。结果表明中药组的禽流感、新城疫平均抗体效价比对照组高,并且抗体持续时间更长,说明中药能够提高鸡体的免疫反应。
三、 讨论
1、中药对鸡的疾病防控和生长发育的作用
鸡是一个有机整体,各个组织器官在结构上相互关联不可分割,功能互相协调,某一部分发生疾病,就会影响鸡只的健康。在当今限抗、禁抗的大环境下,养殖业者都积极寻找替代品来防控动物疾病,中药常被作为替代品的首选。肠道作为畜禽消化饲料、吸收营养、抵抗病原微生物的重要场所,肠道的健康对保持畜禽健康生长具有重要意义。肠道形态、肠黏膜免疫水平是评价肠道健康及功能的重要指标。肠黏膜分泌的主要免疫球蛋白-sIgA,对肠黏膜上皮的保护与稳态调节起着重要的作用。大量研究证明:中药具有提高畜禽免疫力,防控肠道疾病和促进动物生长等功效,因此,在饲料中添加中药,观察中药对鸡死淘率、生长性能、肠道健康等影响,可以为中药代替抗生素用于疫病防控、促进生长等方面提供一定的研究依据。归纳起来,中药对鸡的疾病防控和发育生长主要发挥以下作用:①增强免疫力。中药中含有很多活性成分,比如多糖类、苷类等,可以有效增强特异性和非特异性免疫。中药黄芪、杜仲等可以促进淋巴细胞转化,提高细胞免疫功能。地黄、天冬等有促进抗体产生的功效,也有利于增强体液免疫功能。②抗病毒抗菌,防治疾病。中药抗菌成分,它们不仅能够有效抑制有害菌的繁殖,还可以直接杀菌,阻止病毒侵害细胞。金银花、穿心莲、灵芝、连翘、人参等可以有效减少疾病发生、应激现象和死亡数。③提高产蛋性能。很多中药是可以提高产蛋率,改善蛋壳质量(薄壳、沙壳、软壳、破壳、光滑度),改善蛋黄的着色和鸡蛋风味。叶黄素、红辣椒粉、松针粉、金盏花粉等都是效果不错的天然着色剂。④调节饲料的适口性,提供营养成分。中药自带特殊味道,正常都会和饲料混拌使用,这样不仅可以调节饲料的味道,還可以改善鸡对饲料的适口性,比如茴香、芥子、马钱子等。同时中药一般含有蛋白质、脂肪、淀粉、维生素等营养成分和微量元素,不过总体含量较低,还需要额外加入。比如陈皮含有维生素D,当归含有维生素E、小茴香含有维生素A。⑤促进生长。中药中有机酸能够调节肠道pH值,抑制有害菌的繁殖,提高酶的活性,促进鸡的新陈代谢,从而提高营养素的利用率,促进消化吸收,提高采食量。蒲公英、山楂、金银花、丹参等都可以促进消化吸收。
2、中药对林下鸡死淘率的影响
死淘率是指鸡在饲养过程中因疾病、自然灾害等原因导致死亡或被淘汰的比例。死淘率的影响因素包括遗传、环境、营养和管理等因素。为了降低鸡的死淘率,可以采取一系列的措施,例如:选用优良的品种、提供良好的饲养环境、制定科学的饲养管理计划等。在上文研究中发现中药组的死淘率4.20%低于对照组的死淘率8.50%,由此可见在饲料中添加中药具有降低死淘率的功能。这可能是因为在饲料中加入适量的中药,可以促进雏鸡的生长发育,提高其免疫力和抗病能力,从而降低死淘率。
3、中药对林下鸡生长性能的影响
鸡生长性能是评价养殖水平与质量的重要指标,鸡的生长性能受到多种因素的影响,包括遗传、环境、营养和管理等因素,这些因素相互作用,共同决定了鸡的生长性能和经济效益。因此,在养殖过程中,需要综合考虑这些因素,采取科学合理的饲养管理措施,以提高鸡的生长性能和经济效益。一般来说,生长速度越快,鸡的产蛋量和质量也会相应提高。本次根据鸡的生长、发病等特点,采用中药全程用于林下草鸡的养殖,全程不使用抗生素,取得了较好效果。通过上文的研究发现:添加中药喂养的鸡平均日增重(15.19±0.21)g高于对照组(13.70±0.24)g、添加中药喂养的鸡平均料肉比(5.17±0.31)高于对照组(4.83±0.24)。这主要是,益阳康、肠亦舒、硒芪素、呼亦舒、球利康、威加康等兽药的主要成分为中药,以黄芪、松针粉等为例,这些中药具有促进其生长发育的作用,这可能跟这些用药成分中含有的营养物质与生物活性物质有关,例如:黄酮类、皂苷类、多糖类等,能够维持动物体内的平衡状态,加速新陈代谢,促进营养物质的消化与利用,加速血液的循环。
4、中药对林下鸡肠道sIgA水平的影响
肠道黏膜是鸡消化系统的重要组成部分,其内表面分布着许多绒毛和皱褶,能够不断分泌黏液,保护肠道免受外界环境的侵害。同时,肠道黏膜还能够吸收水分和电解质,参与鸡的排泄和调节体温等生理过程。肠黏膜免疫球蛋白A(IgA)是在黏膜免疫中具有重要作用的抗体,在胃肠道免疫中扮演关键角色。它的重链是α亚型,有两种亚类IgA1和IgA2,以分泌型IgA(sIgA)二聚体形式存在。在黏膜分泌物中,sIgA是最主要的免疫球蛋白,而在血液中存在较少。sIgA的分泌性组分可以保护免疫球蛋白免受蛋白水解酶的降解,因此,sIgA可以存在于严酷的胃肠道环境中,并抑制微生物在身体分泌物内繁殖。此外,sIgA也能抑制其他免疫球蛋白的炎症效应。在上文研究中,发现中药组的鸡小肠黏膜sIgA水平(4.68±1.02)ng/ml、空肠sIgA水平(5.36±2.52)ng/ml、回肠道sIgA水平(4.92±2.84)ng/ml高于对照组(3.09±1.15)ng/ml、(7.12±2.09)ng/ml、(8.06±3.15)ng/ml,且P<0.05,这可能是由于中药中含有多种多糖类物质,这些物质可以刺激肠道黏膜上的免疫细胞,从而诱导产生大量免疫球蛋白,黏膜免疫功能得到增强。同时,试验组的十二指肠形态也较对照组相对完整,炎性浸润较少,说明中药有利于保持鸡肠道绒毛完整性,且减少炎症发生。
5、中药对林下鸡肠道形态的影响
鸡的肠道形态会因品种、日龄等因素而产生差异,其结构包括多个部分,如口腔、食管、胃、小肠、盲肠和直肠等。这些部分共同协作,以保证鸡对营养物质的充分消化和吸收。在鸡的饲养过程中,保持肠道黏膜的完整性和正常功能对于维护鸡的健康具有重要意义。如果肠道黏膜受到损伤或功能受到影响,就会导致消化不良、腹泻等问题,甚至可能引发严重的感染和疾病。因此,在养殖过程中,要注重维护鸡的肠道健康,定期检查饲养环境和水质质量,避免鸡群出现肠道疾病。中医组鸡的十二指肠肠道较对照组完整,炎性浸润明显比对照组少,肠道绒毛完整度也较高。其原因是中药含有的重要成分有助于增强黏膜的免疫功能,从而避免其形态发生较大改变。
6、中药对免疫效果的影响
禽流感、新城疫等病能引起鸡群的发病,病死率较高,疫苗免疫使鸡体产生免疫抗体,是防止该类疫病发生最有效的办法。中药有增强免疫效果的作用,如多糖类免疫增强剂能够提高弱毒苗、油乳剂灭活苗的免疫效果。试验采用在饲料中增加含有多糖类的黄芪、人参叶等中药,也增强了免疫效果,免疫效价更高,免疫保护时间更长。
综上所述,通过上文的研究可知:在鸡养殖过程中通过添加中药于饲料中,可以降低鸡的死淘率,鸡生长性能、肠道功能也有明显提高,肠道炎症可有效减少,提高肠黏膜免疫球蛋白A水平显著,免疫效价和免疫持续时间更长,试验为复方中药添加于鸡饲料来替代抗生素的开发和利用提供一定的理论和应用依据,可进一步提高鸡的养殖水平。
(作者单位:211800江蘇省南京市浦口区畜牧水产站)