王茜 新乡学院3d打印学院生物医学工程(河南 新乡 453003)
内容提要 目的探讨全自动血培养仪与全自动微生物鉴定仪在血液感染细菌中鉴别诊断的差异。方法将本院2021年1月~2021年12月检验科的101份血液为研究对象并将其分为两份,一份采用全自动微生物鉴定仪进行检测并纳入对照组,另一份采用全自动血培养仪进行检测并纳入观察组,比较两组血标本的细菌检出率、检出时间以及药敏实验结果。结果观察组与对照组两种检验方法下血液标本细菌的阳性菌与阴性菌检出率差异无统计学意义(P>0.05)。观察组细菌检出时间短于对照组(P<0.05)。观察组与对照组的药敏实验结果差异比较无统计学意义(P>0.05)。结论于血液感染细菌的鉴别诊断方法上,全自动血培养仪与全自动微生物鉴定仪均能有效准确地检出病原菌并提高确诊率,但全自动血培养仪在检查效率上更具有优势。
随着医疗技术的不断发展和更新,近年来各类新型抗菌药物也得以现世并应用于临床治疗,使得各类细菌的耐药性不断提高进而诱发全身感染[1],尤其是菌血症,其感染发生率随着多重耐药菌的大量出现而不断上升[2]。因此,为了有效降低这一现象的出现,选择科学合适的检验方法准确掌握细菌的耐药情况,提高用药的精确性至关重要。全自动血培养仪同时具有培养和检测两种效用,不仅能够有效降低血液标本的污染,还能够排除人为的干预[3]。全自动微生物鉴定仪是一种结合计算机技术和微生物检测技术,并利用传统生化反应实施自动微生物检测的技术[4,5],近年来也在细菌检测上被广泛应用。本文运用全自动血培养仪和全自动微生物鉴定仪检测血液标本并分析两者的细菌鉴别诊断价值的差异,具体如下。
将本院2021年1月~2021年12月检验科的101份血液为研究对象并将其分为两份,一份采用全自动微生物鉴定仪进行检测并纳入对照组,另一份采用全自动血培养仪进行检测并纳入观察组。其中血液标本患者资料,男61例,女40例;年龄18~54岁,平均(35.24±4.28)岁。本研究在医学伦理会的批准下进行。
纳入标准①年龄18~55岁;②血液标本采集前48h内未使用抗生素治疗;③患者及家属均签署知情同意书;④血液标本均来自发热或感染的患者。
排除标准①患者合并其他凝血功能异常或血液系统疾病;②合并严重的心、肺功能疾病。
标本采集在患者晨起空腹时科室护士严格按照无菌操作步骤采集两份20mL的外周静脉血标本并于0.5h内送至检验科,检验科对其进行检测。
标本检测①观察组采用全自动血培养仪器检测。将需要检测的血液标本置入血培养瓶,接着将血培养瓶严格按照仪器操作步骤放入全自动血培养仪(生产厂家珠海美华医疗科技有限公司;产品型号BC32),血培养仪以自传的形式对血培养瓶进行培养,其中设置仪器培养温度为(35±1.5)˚C,转盘以26转/min的速度匀速旋转,以10min为周期对培养瓶进行动态检测。利用血培养瓶激发产生的荧光通过光电检测器和A/D转换系统传送给系统计算机分析程序。系统对检测信号进行分析,发现阳性瓶仪器发出阳性警报,并在主程序界面上的培养瓶位置号上显示为红色,可以取出培养瓶,转接种培养皿后做细菌鉴定和直接药敏实验。持续培养5d后未发现微生物生长的血培养瓶,报告为阴性瓶,且主程序界面上的培养瓶位置号上显示为草绿色,取出培养瓶。当检验结果为阳性时抽取样品并注入无菌试管中,在离心处理后收取沉淀,再用生理盐水洗涤两次得到细菌悬液,接着进行涂片并开始镜检,当镜检结果显示阳性,使用羊血板进行药敏试验。除此之外,根据镜检结果选用合适的氧化酶并调整菌液浓度,将其接种到PC11综合板上,最后用微生物分析仪实施鉴定;②对照组采用全自动微生物鉴定仪检测。将得到的血液标本接种到提前准备好的血琼脂平板和琼脂平板上进行培养,培养环境保持温度32˚C,时间13~23h,CO2浓度保持5%。培养结束后,分离菌株,并按要求配置出一定细菌浓度的菌悬液,接着实施镜检和常规药敏试验。同时将其置全自动微生物鉴定仪的鉴定卡架上,连接菌液管和鉴定卡,采用比色比浊法,并于全自动微生物鉴定系统内输入相关信息,全自动微生物鉴定仪(生产厂家上海梅里埃生物制品有限公司;产品型号VitekCompact型)实施自动培养和检测,15~18h后得到结果。
比较实施两组检验方法的血液检验结果,药敏实验结果以及检验时间。
采用SPSS19.0进行分析,计数资料用%表示,行χ2检验;计量资料用±s表示,行t检验,等级资料用秩和检验,P<0.05为差异有统计学意义。
观察组与对照组两种检验方法下血液标本阴性菌、阳性菌检出率差异无统计学意义(P>0.05),见表1。
表1.两组试验结果比较[n(%)]
观察组与对照组的药敏结果符合率差异无统计学意义(P>0.05),见表2。
表2.两组药敏实验结果
观察组对血液感染中细菌的所需鉴别诊断时间为(14.66±3.24)h,对照组所需时间为(26.16±4.71)h,两组比较差异有统计学意义(t=20.248,P<0.001)。
血液感染常常指败血症,是指细菌已经进入到血液循环,并且在血液当中进行繁殖[6]。细菌随着血液循环可以累及身体的各个器官,严重的患者可以引起多脏器的功能衰竭,感染中毒性休克,且该病具有较高的死亡率[7]。所以对于血液感染的患者,应该尽早到医院就诊,通过抗感染治疗,帮助患者有效地控制病情,降低患者的病死率。但是由于临床上治疗该病时常会在病原菌不明确的情况下经验性的使用一些抗生素,使得病原菌的耐药性不断加强[8],严重影响其治愈。因此,为了了解病原菌的种类以及耐药特点,对血液感染中的细菌进行检验成为有效治疗血液感染的关键步骤。传统的方式进行血液检验难度大且耗时长,极易延误病情,错失治疗最佳时机。全自动血培养仪与全自动微生物鉴定仪作为两种先进的医疗设备,在血液感染的检测上具有操作简单检测速度快等优势。
全自动血培养仪由转盘、驱动电机、控制电路、光电检测系统以及温控系统等组成,并设有自动矫正和质控检测功能,具有自动化培养和快速检测的特点。其工作原理是采用均质荧光增强检测技术。通过培养瓶底部的荧光传感器受细菌产生的代谢物质激发产生荧光,荧光强度随着细菌数量的增加而不断增强,最后系统根据荧光变化趋势判断有无微生物生长[9]。优势之处在于①能提供不同细菌繁殖所必需的增菌液体培养基,还包含适宜的气体成分,以最大限度检出所有阳性标本,防止假阴性;②连续恒温震荡方式培养和自动连续监测,可使微生物生长更快,易于检出,并保证阳性标本能在第一时间检出;③采用封闭式非侵入性监测方式,可避免标本交叉污染和实验室人员的院内感染,符合生物安全要求;④设有内部质控程序,定时进行温度、感应器等监控,以保证仪器正常运转;⑤强大的数据处理能力,培养瓶采用双条形码技术,所有环节均自动完成,并可与医院LIS系统联网,实现即时查询、报告功能。
全自动微生物鉴定仪其工作原理为利用微生物对不同碳源代谢率的差异,针对每一类微生物筛选多种不同的碳源,配合显色物质,固定于孔板上,结合阴性对照,接种菌悬液后培养一定时间,通过检测微生物细胞利用不同碳源进行新陈代谢过程中产生的氧化还原酶与显色物质发生反应而导致的颜色变化(吸光度)以及由于微生物生长造成的浊度差异(浊度),与标准菌株数据库进行比对,最终得出鉴定结果。其中提到的碳源是为微生物提供碳素来源的物质,用于合成菌体,碳源物质在细胞内经过一系列复杂的化学变化后成为微生物自身的物质(如糖类、脂质、蛋白质等)。对比传统检验方法,其优势之处在于较高的可操作性,灵敏度更高,错误率更低[10,11],因此已经被众多检验机构所认可[12]。
根据本次的研究结果发现在对血液感染的细菌阳性率检测结果上,使用全自动血培养仪和全自动微生物鉴定仪两种检验方法差异无统计学意义,都具有较高的检测率。大概是由于两种检验仪器都具有完善的检测系统,全自动血培养仪通过自动摇匀动作促进微生物的成长,并利用其产生的二氧化碳与培养瓶底的染料发生作用出现荧光,接着通过荧光强度作出及时阳性判断;全自动微生物鉴定仪则通过检测不同微生物利用碳源新陈代谢过程中产生的氧化还原酶与显色物质发生反应,产生颜色变化,将其与标准菌株数据库进行比对,得出相应的鉴定结果。两种检验方法均应用了生理学和生物学的鉴定方法且都具有自动完备的检测系统,所以两组都具有完善的较高的阳性检出率。本研究中发现观察组与对照组的革兰性阳性菌与革兰氏阴性菌的药物敏感性差异无统计学意义。可能是由于全自动血培养仪能够显示出阳性菌与阴性菌,有利于检测人员了解各类菌群的耐药特点与药敏情况。全自动微生物鉴定仪通过对细菌培养后得到标准浓度的菌悬液,再进行药敏试验,促进操作的标准化和药敏结果的精确性。所以两种检验方法在药敏试验的检测性能上都具有较高性能。本研究结果显示观察组检验时间低于对照组。可能是由于全自动血培仪相比全自动微生物鉴定仪减少了分离培养这一步骤,有效地降低了整体检验时间。
综上所述,全自动血培养仪与全自动微生物鉴定仪均能有效检出血液细菌的阳性率,并分析其对药物的敏感性,但全自动血培养仪有其更高的检测效率。