黑鲷自体受精家系的建立及养殖试验

孟 乾，郭亚东，贾超峰，祝 斐，王文权，徐大凤，陈淑吟

(1.江苏省海洋水产研究所，江苏 南通 226001；2.如东县渔政监督大队，江苏 如东 226400)

黑鲷隶属于鲈形目、鲷科、棘鲷属，主要分布在我国东南沿海一带以及日本、东南亚等地区。黑鲷既是我国增殖放流品种之一，同时也是我国沿海地区海水养殖的名贵经济鱼。黑鲷肉质细腻、鲜美，营养丰富，深受市场欢迎以及消费者喜爱。但黑鲷生长需要经历两次越冬，严重制约黑鲷养殖业的发展，亟须通过品种改良提高生长速度。

海水鱼育种中最经典、常用的方法为选择育种，根据选择育种的理论，使优良性状基因纯化并稳定遗传，几乎是每个良种培育的必经过程。目前良种基因纯化的过程仍然是主要采用具有亲缘关系的个体多代近交的方法。但是该方法往往需要很长时间，多代近交纯化选育的方法费时费力，而自交相当于2～3 代近交，通过构建自交家系可极大地加快基因纯化的速度和不良基因淘汰的进程。

如何获得同一尾黑鲷的精子和卵子成为构建自交系的关键之一。黑鲷具天然性逆转习性，属雄性先熟型雌雄同体，前2年为雄性，之后部分转雌，因此，采用先获得精子进行长期保存、性逆转后再获得卵子的方式可以获得同一尾鱼的精子和卵子，使得黑鲷自交系的建立成为可能。

一、材料与方法

1.试验材料

试验用鱼为江苏省海洋水产研究所繁育的黑鲷。

2.试验过程

2022 年在黑鲷繁殖期挑选体质健壮、性腺发育良好的2龄黑鲷取精液并保存在液氮中，统计生物学数据并打上动物芯片。

2023年4月在黑鲷繁殖期挑选出有动物芯片且转雌的鱼，每尾各放1个塑料筐中(暂时存放)。根据转雌鱼的芯片编号找到其对应的冷冻精子，镜检精子活力，用活力好的精子进行人工授精。将受精卵放入孵化桶中进行孵化。

3.养殖试验

受精1小时后，利用分卵装置将建立的黑鲷自交家系进行分卵，去除死卵及污物。受精12 小时后，取样、观察受精卵发育情况，计数每组自交家系的数量以及成活受精卵量，然后根据每组成活受精卵的数量，将数量少的组布卵在50～100升白桶中进行孵化和养殖，数量多的组直接布卵在室内水泥池中，孵化水温在20～22℃。布卵前水位在30～40 厘米，布卵后每天加注10～20 厘米水，注意控制水温差在2℃以内。孵化期间采用气石进行微充气。

在初孵仔鱼开口前开始少量投喂轮虫，轮虫密度为5～10 个/毫升，并向养殖水体中加入小球藻，保持良好水色。待仔鱼开口后，根据轮虫消耗量逐步增加轮虫投喂量。大约第5天开始少量换水，换水量约为20%。换水时，前期鱼苗体形较小，需要缓慢排水，避免鱼苗损伤，并用40～60 目网片阻隔，以防止逃鱼。前期进水时也要注意缓慢进水，避免水流冲击过大，进水经200目以上网袋过滤后入池。随着投喂量增加以及温度的上升，换水量逐步增加，日换水1～2次。

经过15 天左右的养殖，由于部分白桶中鱼苗数量过多，要将其进行分苗处理。此时鱼苗较小，操作需要格外小心，尽量减少对鱼苗的伤害。养殖30 天左右，将白桶内的自交家系根据数量情况，数量较多者转移至水泥池进行养殖，数量较少者放置在室内的网箱中进行养殖。操作过程全程带水，避免伤苗。此后加大各个水泥池换水量，每天2次。

养殖45 天左右开始驯化鱼苗摄食颗粒饲料，减少轮虫投喂量。经过5～7 天驯化，完全停止轮虫投喂，颗粒料投喂每天3次，每次投喂结束及时将未吃完的颗粒料捞出，以减少对水体的污染。

在室内养殖至7月后，将数量较多的4个家系放入室外网箱，每个网箱1 000尾，进行养殖。将此4 个家系中剩余的鱼放至室外1～4 号土池中进行养殖。室外土池中安装增氧机，投喂颗粒饲料，根据水质情况及时加水、换水。

二、结果

经过一段时间的养殖，共获得15 个黑鲷自交家系，数量在100～10 000 尾。黑鲷自交家系长势良好，部分黑鲷家系7 月(3 月龄)生物学数据见表1。

表1 黑鲷自交家系3月龄生物学数据

三、分析与讨论

自交对养殖遗传群体改良具有明显的积极作用，主要包括两个方面：一是通过改变基因组合的频率，选择理想的基因型，或加快不理想基因型鱼的淘汰速度；二是使群体分化，从而得以培育出不同的纯系，为经济品种杂交提供最大化的杂交种优势。

目前，黑鲷自交家系鱼长势良好。黑鲷自交家系的突破不仅为其他先雄后雌经济鱼遗传改良研究提供新的技术参考，也使采用自交培育黑鲷新品种成为可能。黑鲷自交家系的建立有助于黑鲷种质资源保护，缩短育种进程，为其种质改良、培育新品种提供理论依据，同时也可为性状遗传分析和构建遗传图谱提供材料。