郭丽观 厦门市第三医院 (福建 厦门 361000)
内容提要:目的:采用Sysmex XN-1000血液分析仪对血常规主要指标进行测定,分析脂血对其结果所产生的影响。方法:选取没有溶血、脂血与黄疸的标本20份(当作对照组),对其实施离心操作,将上层血浆成分给予去除,将Sysmex XN-1000血液分析仪原装配套稀释液(同体积)加入,对血常规进行测定(试验组),把最终结果对比于对照组;选取没有脂血、黄疸、溶血且已经测定的血常规标本66份,将其随机分成三组,用贝克曼AU5800全自动生化分析仪对甘油三酯(TG)进行测定,依据TG含量的差异对脂血程度实施分级:轻度脂血组(没有加脂肪乳剂的测定结果当作对照1组)、中度脂血组(没有加脂肪乳剂的测定结果当作对照2组)与重度脂肪组(没有加脂肪乳剂的测定结果当作对照3组);把测定结果均对比于没有加脂肪乳剂者的测定结果。结果:对照1组较之轻度脂血组,13项参数结果对比并无显著差异(P>0.05);中度脂血组较之对照2组,以及重度脂血组相比对照3组,白细胞(WBC)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)与血红蛋白(Hb)都有明显升高(P<0.05)。结论:在采用Sysmex XN-1000血液分析仪对血常规指标进行检测时,中、重度脂血对WBC、MCH、Hb、MCHC参数有着较大影响,且伴随脂血程度的加重,其影响也随之加大。
Sysmex XN-1000血液分析仪实为一台五分类血液分析仪,能够实现全自动操作,有着较快的检测速度,其不仅运用了常规的射频法、电阻抗法,而且还采用了较新型的流式细胞激光技术,可通过与荧光染料、特殊化学试剂相结合,对静脉血白细胞计数(white blood cell count,WBC)实施分类,故能促进WBC分析结果灵敏性与准确性的提高[1]。但需指出的是,所得到的血液细胞分析结果是否准确,不仅与仪器性能、标本采集及分析前患者准备情况等因素有关,而且还与血液自身因素相关,即血液当中可能存在一些干扰因素(如脂血、溶血等),会对血液分析仪的检测结果造成影响[2]。本文围绕输注脂肪乳剂后出现脂血情况的标本,采用Sysmex XN-1000血液分析仪对血常规当中的一些常用指标进行测定与分析,且构建了纠正措施。所选取的血常规指标有嗜碱性粒细胞(Basophil,BASO)百分比、单核细胞(Monocyte,MONO)百分比、中性粒细胞(Neutrophils,NEUT)百分比、平均红细胞血红蛋白含量(Mean corpuscular hemoglobin,MCH)、红细胞比容(Hematocrit,HCT)、血小板计数(Platelet count,PLT)、WBC计数、嗜酸性粒细胞(Eosinophils,EOS)百分比、淋巴细胞(Lymphocyte,LYMPH)百分比、平均红细胞血红蛋白浓度(Mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC)、平均红细胞容积(Mean corpuscular volume,MCV)、血红蛋白(Hemoglobin,Hb)及红细胞计数(Red blood cell count,RBC)等,现对测定结果及影响剖析如下。
仪器:血液分析仪[日本SYSMEX(希森美康)株式会社,XN-1000型];全自动生化分析仪(贝克曼公司,AU5800型);离心机(日本久保田公司,KUBOTA8420型)。
试剂:采用Sysmex XN-1000血液分析仪相配套的原装试剂以及全血质控品;浏阳市三力医用科技有限公司生产的乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)真空采血管;贝克曼公司生产的甘油三酯(Triglyceride,TG)试剂;20%中/长链脂肪乳注射液(苏州贝朗公司)。
标本来源:所有标本均来自本院2021年11月~2022年11月收治的住院患者,于清晨且空腹下,对静脉血进行抽取(2mL),置入真空采血管(EDTA-K2)中,静置(室温状态下),将溶血、黄疸、脂血对检测结果所带来的影响排除掉,在特定四件内测完(2h内)。
首先选取没有脂血、黄疸与溶血的标本20份,将其作为本次研究的对照组,于闭盖模式下,对血常规进行测定,且将结果进行准确记录。把标本离心处理(3000r/min,10min),将位于上层的血浆成分给予去除,然后把血液分析仪相配套的原装稀释液(同体积)加入,充分混匀,然后对血常规指标进行测定,当作试验组,对比两组结果。
选取没有脂血、溶血与黄疸并且已经测定血常规的标本66份,将其采用随机数字表法分成三组,每组22例,用试验组相同方法将上层血浆分别去除10μL、50μL、100μL,后在把相同体积的脂肪乳剂加入,采用全自动生化分析仪对TG实施测定,依据TG所呈现出的不同含量,把脂血程度实施准确分级,得知TG在6.0~10.0mmol/L有21例,即轻度脂血组,把其前所测结果当作对照1组;10.1~14.0mmol/L的21例,即中度脂血组,其前所测结果作为对照2组;>14.0mmol/L为24例,即为重度脂肪组,其前所测结果当作对照3组。基于闭盖模式,对不同程度脂血标本的血常规进行测定,把结果对比于其前所测结果。
采用SPSS22.0进行数据处理,计量资料、计数资料分别行t检验、χ2检验,若组间经对比差异显著,则由P<0.05予以表示。
对照1组较之轻度脂血组的血常规各指标,其中,WBC、MCH、MCHC、BC、Hb差异显著(P<0.05);但与Sysmex公司所规定的精密度要求以及2012年质量管理基本要求的仪器校准允许偏差范围(上海市临床检验中心)相结合,本文对对照组、试验组于同一时间内对同一份标本进行先后检测,因此,可依据仪器紧密度规定的允许偏差方位,结合临床分析,对比各项指标,结果均不明显(P>0.05),见表1。
表1.对比对照1组与轻度脂血组的血常规结果(±s)
表1.对比对照1组与轻度脂血组的血常规结果(±s)
组别n RBC(×1012/L)Hb(g/L)HCT(%)MCV(fL)MCH(pg)MCHC(g/L)PLT(×109/L)对照1组21 3.97±0.80 120.34±24.39 35.72±5.18 89.53±4.97 30.23±1.84 338.14±12.06 165.02±95.03轻度脂血组21 3.94±0.78 121.25±25.64 35.77±5.12 89.55±4.97 30.62±1.77 342.17±12.10 171.25±101.30 t 0.123 0.118 0.031 0.013 0.700 1.081 0.206 P 0.903 0.907 0.975 0.990 0.488 0.286 0.838
续表1.对比对照1组与轻度脂血组的血常规结果(±s)
表1.对比对照1组与轻度脂血组的血常规结果(±s)
组别n WBC(×109/L)NEUT(%)LYMPH(%)MONO(%)EOS(%)BASO(%)对照1组21 9.15±4.00 76.50±13.56 16.13±2.78 5.50±2.03 1.61±0.80 0.22±0.05轻度脂血组21 9.30±3.93 76.48±13.49 16.20±2.84 5.50±2.02 1.56±0.74 0.20±0.04 t 0.123 0.005 0.081 0.000 0.210 1.431 P 0.903 0.996 0.936 1.000 0.835 0.160
对照2组相比中度脂血组,中度脂血组的RBC有明显下降,而MONO、MCHC、WBC、MCV、MCH、Hb都有明显升高,7项指标对比,差异显著(P<0.05);但依据仪器规定的精密度允许偏差范围,且与临床分析相结合,对照2组各指标结果较之中度脂血组,仅4项指标存在差异,即WBC、MCH、Hb与MCHC(P<0.05),见表2。
表2.对比对照2组与中度脂血组的血常规指标(±s)
表2.对比对照2组与中度脂血组的血常规指标(±s)
组别n RBC(×1012/L)Hb(g/L)HCT(%)MCV(fL)MCH(pg)MCHC(g/L)PLT(×109/L)对照2组21 4.13±0.75 127.36±22.20 37.31±6.16 90.16±4.85 30.64±1.72 340.26±10.37 186.31±56.34中度脂血组21 4.10±0.64 147.28±23.64 37.49±6.27 90.63±4.84 33.00±1.75 364.65±10.46 192.07±60.37 t 0.139 2.815 0.094 0.314 4.407 7.588 0.320 P 0.890 0.008 0.926 0.755 0.000 0.000 0.751
续表2.对比对照2组与中度脂血组的血常规指标(±s)
表2.对比对照2组与中度脂血组的血常规指标(±s)
组别n WBC(×109/L)NEUT(%)LYMPH(%)MONO(%)EOS(%)BASO(%)对照2组21 6.82±1.05 67.58±13.82 24.70±6.13 5.44±1.36 2.00±0.43 0.24±0.03中度脂血组21 7.88±1.69 66.67±13.64 24.12±6.62 5.88±1.81 1.96±0.61 0.26±0.05 t 2.441 0.215 0.295 0.891 0.246 1.572 P 0.019 0.831 0.770 0.378 0.807 0.124
对照3组相比重度脂血组,重度脂血组中的LYMPH、RBC均有下降,而MONO、NEUT、PLT、WBC、MCH、MCHC、Hb、HCT与MCV都有升高,11项指标对比,存在明显差异(P<0.05),但依据仪器规定的精密度允许偏差范围,且与临床分析进行结合,得知对照3组较之重度脂血组各指标结果,仅4项指标(WBC、MCHC、Hb、MCH)存在差异(P<0.05),见表3。
表3.对比对照3组与重度脂血组的血常规指标(±s)
表3.对比对照3组与重度脂血组的血常规指标(±s)
组别n RBC(×1012/L)Hb(g/L)HCT(%)MCV(fL)MCH(pg)MCHC(g/L)PLT(×109/L)对照3组24 4.14±0.72 119.29±19.67 31.34±5.41 66.77±5.93 28.87±2.16 333.64±8.64 141.34±52.36重度脂血组24 3.12±0.32 137.54±20.36 35.37±7.36 87.47±6.70 33.46±2.59 383.67±7.56 186.64±67.16 t 6.342 3.158 2.161 11.334 6.668 21.349 2.606 P 0.000 0.003 0.036 0.000 0.000 0.000 0.012
续表3.对比对照3组与重度脂血组的血常规指标(±s)
表3.对比对照3组与重度脂血组的血常规指标(±s)
组别n WBC(×109/L)NEUT(%)LYMPH(%)MONO(%)EOS(%)BASO(%)对照3组24 7.06±0.95 71.80±11.36 21.13±3.38 5.20±1.08 1.94±0.60 0.25±0.08重度脂血组24 8.64±1.14 79.77±13.64 18.20±3.10 6.84±1.50 1.83±0.53 0.24±0.05 t 5.216 2.200 3.130 4.347 0.673 0.519 P 0.000 0.762 0.033 0.001 0.504 0.606
对于脂血而言,其是临床当中对血液分析仪进行血常规检测造成影响的常见因素,会对全部型号的血液分析仪的多项指标造成干扰,比如WBC、PLT、Hb、MCH等。
本文围绕不同脂血程度,深入剖析其对Sysmex XN-1000血液分析仪检测血常规指标所产生的影响,最终结果得知,在所选取的13项指标当中,与对照组相比较,轻、中、重度脂血组当中分别有5项、7项、11项与之存在明显差异,但与临床实践相结合得知,TG在6.0~10.0mmol/L的轻度脂血,对检测结果有着较小的影响,而中、重度脂血(10.1~14.0、>14.0mmol/L)对4项指标具有较大影响,分别为WBC、Hb、MCH与MCHC,且伴随血脂程度的持续增加,其对血常规结果的影响程度也随之增加。原因为:①影响WBC检测。通过对流式细胞技术的应用,对各通过检测部位的颗粒或者细胞实施逐一剖析,防止漏检或者重复检测情况的发生,但不管是流式细胞技术,还是电阻抗法,均难以对所有细胞均实施完全性识别,故会对结果检测造成干扰[3];②影响RBC/PLT的检测。对于RBC/PLT而言,其大多用电阻抗原理进行检测,通过双鞘流(也就是前、后鞘流)的应用,使流经检测部位的RBC/PLT可以逐一通过,可以较好地预防细胞侧向或并列通过情况的发生,以免对检测结果造成影响,预防误差发生;但脂肪乳颗粒在流经检测部位时,会对检测造成干扰,进而影响到RBC计数,使MCH、MCV的最终结果发生偏移[4];③影响Hb检测。检测此指标的基本原理是Fe2+(亚铁血红素当中)被十二烷基磺酸钠氧化,从而形成大量的SLS-Hb衍生物,于555波长上,通过实施比色检测,脂肪乳乳白色浑浊可能会干扰到比色法对Hb的检测,增加Hb的假性,使MCH、MCHC的检测结果出现偏差[5];④影响到WBC的分类。基本原理为基于半导体激光流式细胞原理,与细胞化学荧光染色技术相结合,围绕白细胞实施检测,当半导体激光对被检细胞进行照射时,根据各细胞所形成的信号,对细胞进行辨别,其如纵坐标(Y)轴所代表的是侧向荧光强度,可以将亚甲蓝对细胞当中RNA、DNA的染色强度给反映出来,而横坐标(X)轴则对侧向散射光强度给予表示,能够将细胞内容物反映出来,另外,通过对荧光信号、散射光信号同时进行检测,能够形成所需要的直方图与散点图,因此,可对MONO、LYMPH与NEUT进行准确区分[5]。针对BASO、EOS分类技术来讲,Sysmex XN-1000血液分析仪设有EOS/BASO通道,将溶血剂加入,对其他细胞急性溶解,形成裸核,仅对EOS/BASO的完整性给予保留,然后依据细胞大小、体积等实施测定,这可能是轻、中、重度脂血检测中,BASO、EOS并未受干扰的原因所在。
综上所述,在检测血常规指标时,中、重度脂血会对Sysmex XN-1000血液分析仪的检测结果造成影响,而影响较大的是WBC、MCH、Hb、MCHC;另外,随着脂血程度不断加深,其相应影响程度,会随之增加。