中药穴位贴敷联合布地奈德治疗小儿支原体肺炎的疗效及对炎症水平、免疫功能的影响

钟胜华

江西省都昌县中医院儿科,九江市 332600

支原体肺炎是一种常见的呼吸道感染疾病,该疾病常见于婴幼儿和学龄前儿童。支原体肺炎患儿的肺内炎症程度轻重不一,严重时可累及循环、血液等多个肺外系统,引起肺外病变,影响小儿正常的生长发育和身心健康[1-2]。目前,支原体肺炎的治疗主要采用抗生素,由于存在药物抗性、药物副作用等问题,其疗效不尽如人意。中药穴位贴敷和布地奈德作为两种治疗手段,都在小儿支原体肺炎的临床实践中显示出一定的疗效。中药穴位贴敷通过刺激特定穴位,调节机体的气血运行,可改善支原体肺炎患儿的咳嗽、发热症状,促进康复[3]。布地奈德是一种常用的吸入型糖皮质激素,具有抗炎作用,可减轻支原体肺炎患儿的炎症反应,改善肺功能[4]。然而,目前对于中药穴位贴敷联合布地奈德治疗小儿支原体肺炎的研究还相对较少。因此,本研究旨在探讨中药穴位贴敷联合布地奈德治疗小儿支原体肺炎的疗效,并评估其对炎症水平、免疫功能的影响。

1 资料与方法

1.1 诊断标准 西医诊断标准参照《诸福棠实用儿科学》[5]:伴有如咳嗽、咳痰、发热、呼吸困难等,病程初期未发现其他病原感染证据,肺部听诊可听到湿性啰音,有肺部病变的X射线或影像学表现等,青霉素、头孢类及磺胺类等抗菌药物治疗无效,支原体特异性免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig) M抗体阳性(急性期滴度≥ 1 ∶160)。中医诊断标准参照《儿童肺炎支原体肺炎中西医结合诊治专家共识》[6]和《中医病证诊断疗效标准》[7]。(1)湿热闭肺证:发热,咳嗽喘促,咯痰不爽,纳差便稀,或大便黏腻,舌苔黄腻,脉滑数;(2)痰热壅肺证:高热不退,咳嗽,痰黄黏稠,痰涎壅盛,气急鼻煽,面赤口渴,口周发绀,舌质红,苔黄腻,脉滑数;(3)风热闭肺证:咳嗽,痰黄而稠,鼻塞,流浊涕,发热恶风,咽红而肿,舌尖红,苔薄白或微黄,脉浮数。

1.2 一般资料 选取2020年12月至2022年12月于我院接受治疗的124例支原体肺炎患儿作为研究对象。纳入标准:(1)年龄范围1～12岁,且病程<14 d;(2)符合西医和/或中医诊断支原体肺炎的标准;(3)获得患儿及其家长的知情同意;(4)无慢性肺疾病、反复呼吸道感染病史。排除标准:(1)同时使用其他中药治疗者;(2)并发其他呼吸道疾病如肺结核、肺脓肿等;(3)近2个月内有免疫增强剂、糖皮质激素药物治疗史;(4)对本研究药物过敏或存在禁忌证;(5)有心、肝、肾或造血系统严重基础疾病者。按随机数字表法将患儿分为对照组和观察组,每组62例。两组患儿的一般资料差异均无统计学意义(均P>0.05),具有可比性,详见表1。本研究已经我院医学伦理委员会审核并批准。

表1 两组患儿一般资料的比较 [n(%),x±s]

1.3 研究方法 予所有患儿清淡饮食,保证病房环境干燥和通风情况,予雾化、拍背等呼吸道管理,以及祛痰、退热、止咳、平喘等基本治疗。对照组行吸入用布地奈德混悬液(深圳太太药业有限公司,国药准字H20203343,规格:2 mL ∶0.5 mg*10支)雾化吸入治疗,0.5～1 mg/次,15 min/次,3次/d。观察组在对照组的基础上行中药穴位贴敷治疗。(1)湿热闭肺证:予以清热利湿、开肺定喘,组方:石膏1 g,厚朴、薏苡仁、白蔻仁、杏仁、麻黄各0.5 g;(2)痰热壅肺证:予以清热涤痰、开肺定喘,组方:石膏1 g,葶苈子、地龙、杏仁、麻黄各0.5 g;(3)风热闭肺证:予以清肺开闭,组方:石膏1 g,桔梗、连翘、金银花、薄荷、黄芩、杏仁、麻黄各0.5 g。贴敷膏方制备方法:由我院制剂室将中药打粉,与鲜姜汁混合,制成泥膏,用特制模板做成1 cm×1 cm大小的药膏。操作方法:辨证选择对应膏方,贴敷于患儿的天突、双侧中府、双侧定喘、双侧肺俞,3 h/次,1次/d;观察局部皮肤情况,如出现过敏等现象,立即停止贴敷,必要时调整穴位。两组均连续治疗2周。

1.4 观察指标

1.4.1 临床疗效[8]痊愈:影像学检查显示肺部阴影消失,咳嗽、发热、呼吸苦难等症状消失;有效:影像学检查显示肺部阴影缩小,临床症状明显改善;无效:影像学检查和临床症状均无改善。治疗总有效率(%)=(显效例数+有效例数)/总例数×100%。

1.4.2 炎症指标 分别于治疗前、治疗2周后清晨,抽取患儿空腹外周静脉血9 mL,分置3管,其中一管血液标本放置于室温保存20 min,剩余两管血液标本放置于-20 ℃冰箱保存。室温保存的血液标本中加入100 μL乙二胺四乙酸(碧云天生物技术公司,批号:20201120和20211209)、200 μL红细胞裂解液(碧云天生物技术公司,批号:20200911、20210827和20220620);离心机低速离心(r=8 cm,转速3 000 r/min,10 min)后取上层清液;应用TRIzol总RNA抽提试剂盒(赛默飞世尔科技公司)提取总RNA,应用琼脂糖凝胶电泳(电泳电压150 V、电流100 mA、时间30 min)验证其完整性;应用SuperScript IV逆转录试剂盒(赛默飞世尔科技公司,批号:20201008和20211123)合成cDNA,加入0.6 μL肿瘤坏死因子受体相关因子-6(tumor necrosis factor receptor-associated factor-6,TRAF6)、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)引物混匀;应用实时荧光定量聚合酶链反应仪(美国伯乐公司)扩增(扩增条件为95℃应预变性2 min;95 ℃变性40 s,60 ℃退火30 s,72 ℃延伸 30 s,共40个循环)。应用引物设计软件Oligo,以β-actin为内参,用2-ΔΔCt法计算TRAF6 mRNA和NF-κB相对表达量。引物序列[生工生物工程(上海)股份有限公司]见表2。

表2 引物序列

1.4.3 细胞免疫功能和体液免疫功能 -20 ℃冰箱保存血液标本采用离心机低速离心(r=8 cm,转速3 500 r/min,15 min)后取上层清液。一管采用AQT90 FLEX免疫分析仪[雷度米特医疗设备(上海)有限公司]测定患儿血清T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平;另一管采用酶联免疫吸附试验测定血清白细胞介素(interleukin,IL)-4、干扰素(interferon,IFN)-γ、IgA、IgG、IgM水平。

1.4.4 治疗期间不良反应 药物相关胃肠道反应、皮肤反应等。

1.5 统计学处理 所有数据采用SPSS 20.0软件分析。计量资料以(x±s)表示,两组间均数的比较采用t检验和t′检验,组内治疗前后的比较采用配对t检验。计数资料以例数和百分数表示,组间的比较采用χ2检验。P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组临床疗效的比较 观察组治疗总有效率高于对照组(96.77%比83.87%),差异具有统计学意义(P<0.05),详见表3。

表3 两组临床疗效的比较 [n(%)]

2.2 两组炎症指标的比较 治疗前,两组TRAF6、NF-κB mRNA相对表达量比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。治疗2周后,两组TRAF6、NF-κB mRNA均下降,且观察组均低于对照组(均P<0.05),详见表4。

表4 两组炎症指标的比较 (x±s)

2.3 两组细胞免疫功能的比较 治疗前,两组血清CD3+、CD4+、CD8+、IFN-γ、IL-4水平和CD4+/CD8+、IFN-γ/IL-4比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。治疗2周后,两组血清CD3+、CD4+水平和CD4+/CD8+、IFN-γ/IL-4均明显升高,且观察组均高于对照组;两组血清CD8+、IFN-γ、IL-4水平均降低,且观察组均低于对照组(均P<0.05),详见表5。

表5 两组细胞免疫功能的比较 (x±s)

2.4 两组体液免疫功能的比较 治疗前,两组血清IgA、IgG、IgM水平比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。治疗2周后,两组血清IgA、IgG、IgM水平均升高,且观察组均高于对照组(均P<0.05),详见表6。

表6 两组体液免疫功能的比较 (x±s,mg/L)

2.5 两组治疗期间不良反应的比较 治疗期间,观察组发生药物相关胃肠道反应、皮肤反应的例数分别为4例、3例,对照组分别为2例、2例,两组不良反应总发生率差异无统计学意义(χ2=0.898,P=0.343)。

3 讨 论

中医认为支原体肺炎的病因包括外因和内因,其中外因责之于外邪侵袭体内,其经过繁殖和传播,可导致呼吸道感染,进而引发支原体肺炎;内因责之于小儿肺脏娇嫩、卫外不固。肺经遭受外邪侵袭或体内湿热郁结,均可导致肺经气机不畅、肺阳受损,常累及脾,重者可内窜心肝[9]。支原体肺炎初期多为外邪由皮毛或口鼻而入,侵犯于肺,加之患儿多伴有情绪不畅、饮食不节等,易造成肺气郁闭,发为风热闭肺证;极期外邪入里化热,炼液成痰,或有宿痰,复感风热而出现痰与热结,以致壅阻肺络,发为痰热壅肺证;外感湿热之邪或内湿与外湿相结合阻于肺络,发为湿热闭肺证[10-11]。因此,对于小儿支原体肺炎,应按照各病证特点进行针对性治疗,能有效解决疾病产生的根本原因,进而缓解发热、咳嗽、痰壅、气促、鼻煽等主证。

穴位贴敷疗法是一种传统中医疗法,通过在特定的穴位贴上药物或使用热敷等方式来治疗疾病,在《五十二病方》中即有涉,其理论基础是中医学的经络学说和气血理论[12]。根据中医理论,人体经络系统是通过一系列穴位连接起来的,而小儿皮肤娇嫩,药物贴敷于体表,能更好地透过皮肤直达病所,直接进入血液循环,同时药物经调配后外敷于体表特定穴位或局部,其药物浓度持久平缓,可避免肝脏首过效应,副作用低[13]。

本研究结果显示,观察组的治疗总有效率明显高于对照组。这提示中药穴位贴敷联合布地奈德治疗小儿支原体肺炎具有良好的效果。其原因可能为:(1)本研究以麻杏石甘汤为基础方,其中石膏具有清热解毒、消炎退热之效,而麻黄宣肺平喘,杏仁降气止咳,二药一宣一降,调畅肺气,使气机调达;(2)针对支原体肺炎初期和极期患儿,通过辨病辨证进行治疗,其中湿热闭肺证,加用白蔻仁、薏苡仁清热利湿,厚朴降气平喘;痰热壅肺证,加用地龙止咳平喘,并取其走窜之性,引药入经,葶苈子泻肺平喘;风热闭肺证,加金银花、连翘、薄荷疏散风热、清热解毒,桔梗、黄芩清热宣肺;加之天突、中府、定喘、肺俞为治咳嗽之要穴,药物与此几处特定穴位相结合,可激发经络之气,诸药结合穴位可调理肺部气血,宣通肺气,使肺部气血通畅,提高整体治疗效果[14]。

越来越多的研究者关注支原体肺炎的发病机制与炎症因子和免疫相关因子之间的关系。大量研究证实[15-16],免疫炎症损伤是支原体肺炎发病的主要机制之一。TRAF6是肿瘤坏死因子家族的重要成员之一,但不同于其他肿瘤坏死因子家族成员,其在应激反应、先天性免疫和获得性免疫、炎症反应、细胞凋亡等方面均扮演着关键性角色,同时TRAF6还能够介导Toll样受体家族信号传导,加重肺部炎症的损伤[17]。NF-κB是应激和炎症反应的调节中枢,激活后可介导中性粒细胞募集和趋化因子的生成,并转移至细胞核内与目的基因结合,使肿瘤坏死因子-α、IFN-γ等炎性因子的分泌增加,加剧肺组织损伤[18]。本研究结果显示,治疗2周后,两组TRAF6、NF-κB mRNA相对表达量均降低,且观察组均低于对照组。这表明中药穴位贴敷联合布地奈德治疗小儿支原体肺炎可阻滞TRAF6、NF-κB介导的炎症反应。

此外,Th1/Th2免疫应答在支原体肺炎中发挥重要作用[19]。IL-4是主要由 Th2细胞、肥大细胞产生的细胞因子,可介导体液免疫,但IL-4过度表达常导致炎症持续存在,甚至出现不可逆的肺组织损伤[19-20]。IFN-γ主要由Th1细胞产生,可以活化单核细胞和巨噬细胞,一方面可辅助T淋巴细胞分化,从而增强细胞免疫功能;另一方面又可造成呼吸道内皮细胞黏附因子过度表达,引起炎性细胞增殖、趋化及释放大量炎性介质,加重气道损伤[19,21]。本研究结果显示,治疗2周后,两组血清CD3+、CD4+水平和CD4+/CD8+、IFN-γ/IL-4均明显升高,且观察组均高于对照组;两组血清CD8+、IFN-γ、IL-4水平均明显降低,且观察组均低于对照组。这提示中药穴位贴敷联合布地奈德治疗小儿支原体肺炎可调节Th1/Th2平衡,避免Th2的过度激活,改善患儿的细胞免疫功能和体液免疫功能。其原因可能为:贴敷方中石膏、甘草、麻黄、杏仁等有效成分均可起到改善机体免疫功能的效果,再加之与天突、中府、定喘、肺俞等几处特定穴位相结合,进一步刺激并增强T淋巴细胞介导的细胞免疫应答,同时亦能够增强成熟T淋巴细胞对抗原刺激的反应,继而有效地调节体液免疫反应[22]。

综上所述,中药穴位贴敷联合布地奈德治疗能够抑制支原体肺炎患儿的炎症反应持续活化,调节细胞免疫功能和体液免疫功能,有效地改善临床症状,提高临床疗效。