血清中性粒细胞/淋巴细胞比值、单核细胞趋化蛋白-1、白细胞介素-17在脑胶质瘤患者中的表达及术后复发影响因素分析

朱紫结 王勇 戈伟

脑胶质瘤是成人常见的一种颅内恶性肿瘤[1-2]。全国统计资料显示,脑胶质瘤在颅内肿瘤中占35%～61%[3]。胶质瘤发病率和死亡率高,侵袭性是其重要临床特征之一[4]。手术是治疗胶质瘤的首选方法,但由于该病具有侵袭性生长的特点,难以完全切除病灶并确保边缘无残留,从而导致术后复发率高[5-6]。近年来,现代医学对胶质瘤生物分子进行了深入研究,逐渐发现胶质瘤的发生与发展与细胞因子的参与密切相关。研究表明,中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)是影响多种恶性肿瘤患者预后的一个因素[7],其表达水平随肿瘤细胞损伤程度而变化[8]。IL-17是一种促炎细胞因子,与肿瘤的发生和发展等多个过程密切相关,但在颅内肿瘤中的研究中主要集中在体外研究[9]。单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)是一种具有单核细胞巨噬细胞趋化性和活化作用的趋化因子,其在各种疾病的发生和发展中具有关键作用[10]。基于此,本研究探讨血清NLR、MCP-1、IL-17在脑胶质瘤患者中的表达,并分析术后复发影响因素。

对象与方法

1.对象:回顾性选取2019年1月～2022年3月泰康同济(武汉)医院肿瘤中心收治的脑胶质瘤患者100例,其中男64例、女36例,年龄30～60岁,平均年龄(45.27±9.86)岁;按照病理分级[11]将100例患者分为低级别组54例(Ⅰ级28例、Ⅱ级26例)和高级别组46例(Ⅲ级25例、Ⅳ级21例)。纳入标准:(1)符合脑胶质瘤的诊断标准且术后经病理检查确诊;(2)行显微镜下切除术治疗;(3)术后生存时间>6个月。排除标准:(1)重要脏器严重功能不全;(2)血液系统疾病、感染性疾病;(3)合并其他恶性肿瘤或存在转移;(4)术前开展放、化疗治疗;(5)既往有激素治疗史。另按2:1比例选取同院同期健康体检者50例作为对照组,其中男30例、女20例,年龄30～60岁,平均年龄(44.97±10.12)岁,两组受试者性别、年龄比较差异无统计学意义,具有可比性(P>0.05)。本研究方案已通过泰康同济(武汉)医院伦理委员会审核批准,所有患者均知情同意。

2.方法

(1)资料收集:通过电子病历系统收集患者相关资料,包括年龄、性别、病理类型、病程、切除范围、术后放化疗、术前卡氏(KPS)评分、肿瘤直径、病理级别、组织学分化程度、侵袭浸润情况。

(2)NLR、MCP-1、IL-17检测:所有受试者均于入院第2天空腹抽取2 ml外周静脉血,离心处理10 min(转速200 r/min、半径10 cm)取上清液低温保存待测,使用血细胞生化分析仪检测淋巴细胞计数、中性粒细胞计数,并计算NLR。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清MCP-1、IL-17水平。

(3)随访:采用电话或门诊复查的形式对患者进行随访,时间截至2022年9月,记录脑胶质瘤患者术后复发情况。根据复发情况将100例脑胶质瘤患者分为未复发组(75例)与复发组(25例)。复发评估标准:患者切除胶质瘤后,术后复查CT、MRI等检查结果显示手术部位无病灶,但术后6个月复查时显示原病灶处再次存在胶质瘤。

结 果

1．3组患者血清NLR、MCP-1、IL-17水平比较:对照组、低级别组及高级别组患者血清NLR、MCP-1、IL-17水平比较差异均存在统计学意义(P<0.05)。对照组、低级别组、高级别组患者血清NLR、IL-17水平依次升高,血清MCP-1水平依次降低(P<0.05)。见表1。

表1 3组患者血清NLR、MCP-1、IL-17水平比较

2.单因素分析:复发组非全切、术后未放化疗、术前KPS评分≤70分、肿瘤直径>6 cm、病理级别为高级别、组织学分化程度低、有侵袭浸润的患者比例与血清NLR、MCP-1、IL-17水平均高于未复发组(P<0.05),而两组患者其他指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 脑胶质瘤患者术后复发的单因素分析[例,(%)]

3.脑胶质瘤患者术后复发影响因素的二元logistic回归分析:以术后复发情况为因变量(0=复发,1=未复发),以切除范围、术后放化疗、术前KPS评分、肿瘤直径、病理级别、组织学分化程度、侵袭浸润、NLR、MCP-1、IL-17为自变量,进行二元logistic回归分析,结果显示NLR、IL-17、非全切、肿瘤直径>6 cm、高级别病变、低分化、侵袭浸润均为脑胶质瘤患者术后复发的危险因素,MCP-1、术后放化疗、术前KPS评分>70分为术后复发的保护因素(P<0.05)。见表3。

表3 脑胶质瘤患者术后复发影响因素的二元logistic回归分析

4.脑胶质瘤患者术前血清NLR、MCP-1、IL-17水平诊断脑胶质瘤与评估病情的预测价值:ROC曲线分析结果显示,NLR、MCP-1、IL-17诊断脑胶质瘤的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.819、0.908、0.986,均具有较好准确性;预测的敏感度分别为76.0%、74.0%、65.0%;特异度分别为76.0%、98.0%、75.0%。ROC曲线分析结果显示,NLR、MCP-1、IL-17与三者联合评估脑胶质瘤病情的AUC分别为0.790、0.897、0.754与0.996,均具有较好准确性;预测的敏感度分别为45.7%、50.0%、64.4%与95.7%;特异度分别为58.7%、50.0%、84.8%与98.1%。

讨 论

据WHO 2016年在中枢神经系统肿瘤分类标准中指明,胶质瘤具有强侵袭性,可促进瘤周血管生成能力增强,预后较差,并首次将基因检测与分子表达纳入胶质瘤的分类标准[12]。脑胶质瘤无明显边界,且主要为浸润生长,手术切除后仍然具有较高复发率。因此,临床需寻找术前有效诊断脑胶质瘤病情方式,血清指标多项联合诊断是现阶段临床研究主要方向[11]。

既往研究指出,促肿瘤因子可参与对肿瘤细胞生长的调节与凋亡,而中性粒细胞通过释放促肿瘤因子进而促进肿瘤转移、浸润[13]。既往研究表明,NLR变化与肿瘤病情密切相关[14]。而炎症因子与肿瘤发生及进展密切相关,是肿瘤重要标志物。IL-17作为一种促炎因子[15],既往研究发现,其在多种肿瘤组织中高表达,推测其与肿瘤的病发、发展过程存在相关性,但既往研究多集中于体外[16]。肿瘤生长转移多依赖于新生血管生长,既往研究表明,MCP-1可通过多种途径促进血管内皮生长因子生成,对肿瘤血管新生进行诱导[17-18]。本研究结果显示,对照组、低级别组、高级别组患者血清NLR、IL-17水平依次升高,血清MCP-1水平依次降低,提示血清NLR,MCP-1,IL-17水平与脑胶质瘤病情发展存在相关。分析原因可能为,在肿瘤微环境中,随着肿瘤生长,中性粒细胞逐渐增加,而淋巴细胞逐渐减少,机体抗肿瘤能力下降,逐渐形成肿瘤浸润与转移适宜生长环境,导致恶性循环,NLR上升。正常人群血清IL-17水平较低,而脑胶质瘤患者因血-脑脊液屏障存在损伤,IL-17分泌增加、水平升高,且病情越重患者血-脑脊液屏障损伤越明显,IL-17水平越高。MCP-1作为趋化因子,其可趋化募集巨噬细胞,且在肿瘤组织中可诱导巨噬细胞分化为肿瘤细胞,本研究中高级别脑胶质瘤患者血清MCP-1水平降低,分析可能是因为其病情越严重,MCP-1趋化性越显著,从而多富集于肿瘤组织,使得血清中MCP-1水平下降。进一步通过ROC曲线分析,结果显示NLR、MCP-1、IL-17诊断脑胶质瘤的AUC分别为0.819、0.986、0.908;NLR、MCP-1、IL-17与三者联合评估脑胶质瘤病情的AUC分别为0.790、0.754、0.897、0.996,均具有较好准确性。提示血清NLR,MCP-1,IL-17可作为脑胶质瘤病情评估指标,且三者联合评估效果更佳。

外科手术是治疗脑胶质瘤的主要方式,可最大程度切除病灶组织,降低神经功能损伤。但因脑胶质瘤具有较高恶性程度,致使术后复发风险更高[19]。本研究二元logistic回归分析结果显示,NLR、IL-17、非全切、肿瘤直径>6 cm、高级别病变、低分化、侵袭浸润为影响术后复发危险因素,MCP-1、术后放化疗、术前KPS评分>70分为术后复发保护因素。分析原因可能为[20-21]:(1)淋巴细胞参与机体免疫反应可对肿瘤细胞进行直接杀伤,而淋巴细胞减少会致使免疫力消弱,利于肿瘤生长,复发风险增加。(2)IL-17水平升高代表机体炎症反应增强,进而对免疫功能产生影响,机体免疫抵抗能力削弱,肿瘤复发风险增加。(3)MPC-1是多种组织细胞分泌产生,具有促进肿瘤转移作用,血清中MPC-1水平越低,体现肿瘤组织中MPC-1富集越显著,患者病情越重,复发风险越高。(3)因手术治疗脑胶质瘤观念发生改变,由最大范围切除改变为最大程度安全切除,但非全切手术存在病灶复发风险;然而术后放化疗是治疗脑胶质瘤的重要辅助手段,可辅助最大程度杀伤肿瘤细胞,降低复发风险;(4)直径>6 cm的肿瘤存在广泛累及周围组织,手术难以完全切除,存在术后复发隐患;(5)高级别、低分化或存在侵袭浸润患者病情越严重,复发风险越高;(6)KPS评分是评估患者机体状态的重要工具,术前KPS评分>70分患者神经损伤较小,往往患者脑组织受肿瘤压迫与侵袭较少,预后更好。

综上所述,脑胶质瘤患者中血清NLR、IL-17高表达,MCP-1水平低表达,均可作为脑胶质瘤患者诊断与病情评估有效指标,且联合评估病情更好。NLR、IL-17、非全切、肿瘤直径>6 cm、高级别病变、低分化、侵袭浸润为术后复发危险因素,MCP-1、术后放化疗、术前KPS评分>70分为术后复发保护因素,临床针对上述因素需加强重视。