尿CysLTE4和血清IL⁃8水平变化与支气管肺发育不良的关系

陈云，瞿色华，陈信，张阵

（蚌埠医学院第一附属医院儿科，安徽蚌埠 233004）

支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia，BPD）是早产儿最常见的慢性呼吸系统疾病。近年来，随着围产医学及新生儿医学的发展，小胎龄早产儿的存活率显著提高，BPD 的发生率亦随之升高［1⁃2］。BPD 有着较高的病死率，严重影响着早产儿早期生存及远期预后［3⁃4］，且迄今为止尚无有效的治疗方法［5］。目前BPD的诊断仍以出生后持续用氧≥28 d为标准，而其病理生理改变在早产儿出生即开始发生［6］，但BPD 防治手段相对滞后，因此，早期识别、积极预防、有效干预对于降低BPD 发生率、减轻BPD 严重程度及改善早产儿预后具有重要意义。虽然BPD 的病因和发病机制至今尚未完全阐明，但目前普遍认为气道炎症为其关键致病因素［7］。少数研究发现［8⁃9］，炎症介质白三烯及促炎因子白介素⁃8（IL⁃8）在BPD 早期肺损伤中发挥重要作用，并加速和加重BPD 的发生和进展。而半胱氨酸白三烯E4（cysteinyl leukotriene E4，CysLTE4）是白三烯的重要代谢产物、且尿液排泄比例恒定。因此本研究通过连续监测早产儿尿半胱氨酸白三烯E4（CysLTE4）和血清白介素⁃8（Interleukin⁃8，IL⁃8）的水平变化及对其临床资料分析，探讨其与BPD 的关系，为BPD的早期诊断提供依据。

1 对象和方法

1.1 研究对象

选取2021 年1 月至2022 年12 月蚌埠医学院第一附属医院新生儿重症监护病房（NICU）收治的符合条件的58 例早产儿作为研究对象。待患儿出院时收集完整病例资料，根据BPD 诊断标准［6］（生后28 天仍需吸氧）、将早产儿分为BPD 组（21 例）和非BPD 组（37 例）。本研究经我院伦理委员会审批通过（伦科批字［2021］第138 号）、并获得所有患儿家属知情同意。

1.2 选取标准

1.2.1 纳入标准 胎龄＜32周、出生体重＜1500 g；出生后24小时内入院；住院时间≥28天；患儿家属自愿参与本研究、并签订知情同意书。

1.2.2 排除标准 严重的先天性发育畸形、复杂性先天性心脏病及遗传代谢性疾病等；病例资料不完整、住院期间死亡、放弃治疗、严重并发症或转科治疗；家属不愿参与本研究。

1.3 标本采集与检测指标

1.3.1 标本采集 尿标本获取：收集早产儿出生后24小时内及第7、14、21、28天的清洁尿液5 ml；将标本离心处理（2～8 ℃下、2000 r/min、离心15 min）、收集1 ml 上清液、保存于−80 ℃冰箱中，避免反复冻融，保持过程中发现有沉淀物形成者，再次离心。血标本获取：抽取早产儿入院后次日清晨及第7、14、21、28 天清晨空腹状态下外周静脉血2 ml；将标本离心处理（2～8 ℃下、3000 r/min、离心10 min）、留取上清液（血清）、保存于−80 ℃冰箱中，避免反复冻融，保持过程中发现有沉淀物形成者，再次离心。

1.3.2 检测指标 尿CysLTE4 水平：采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测所有尿标本中CysLTE4 水平，ELISA 试剂盒（南京博研生物），严格按照说明书操作，结果以pg/mL 为单位。血清IL⁃8：采用酶联免疫吸附实验（ELISA）方法检测所有血清标本中IL⁃8 水平，试剂盒购买至南京博研生物，严格按照说明书操作，结果以pg/ml为单位。

1.4 统计学处理

采用SPSS 25.0软件对数据资料进行统计分析，其中计量资料进行正态检验，符合正态分布，以表示，2 组资料比较采用独立样本t检验；计数资料用率（%）表示，率的比较采用四格表χ2检验；检验水准α=0.05，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组早产儿临床资料比较

BPD 组与非BPD 组早产儿出生体重、性别、胎龄、剖宫产比率、5 min Apgar 及产前糖皮质激素应用使用率比较，差异均无统计学意义；但BPD 组机械通气时间、总吸氧时间及住院时间长于非BPD组，差异有统计学意义。结果见表1。

表1 BPD组与非BPD组早产儿临床资料比较

2.2 两组早产儿不同时间点尿CysLTE4水平比较

BPD 组与非BPD 组早产儿生后第1 天尿CysLTE4 水平比较，差异无统计学意义。随着日龄增长，两组早产儿尿CysLTE4水平均呈现上升趋势，于生后第14天达高峰，且生后第7天、14天、21天及28 天BPD 组尿CysLTE4 水平均高于同日非BPD 组，差异均有统计学意义。结果见表2。

表2 BPD组与非BPD组早产儿不同时间点尿CysLTE4水平比较（，pg/ml）

表2 BPD组与非BPD组早产儿不同时间点尿CysLTE4水平比较（，pg/ml）

2.3 两组早产儿不同时间点血清IL⁃8水平比较

BPD 组与非BPD 组早产儿生后第1天血清IL⁃8水平比较，差异无统计学意义。随着日龄增长，两组早产儿血清IL⁃8 水平均呈现上升趋势，于生后第21 天达高峰，且生后第7、14、21、28 天BPD 组血清IL⁃8 水平均高于同日非BPD 组，差异均有统计学意义。结果见表3。

表3 BPD组与非BPD组早产儿不同时间点血清IL⁃8水平比较（，pg/ml）

表3 BPD组与非BPD组早产儿不同时间点血清IL⁃8水平比较（，pg/ml）

2.4 受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC）分析

根据所有早产儿第7天CysLTE4、IL⁃8水平与诊断BPD 早产儿进行数据分析，结果显示CysLTE4、IL⁃8 均对BPD 的诊断有预测价值，CysLTE4 的预测价值更高，P＜0.01。结果见图1、表4。

图1 第7天CysLTE4、IL⁃8水平的ROC曲线

表4 第7天CysLTE4、IL⁃8水平ROC曲线分析结果

3 讨论

BPD 是早产儿常见慢性肺部疾病，尤其是小胎龄早产儿，严重影响早产儿生长发育，是新生儿期后的死亡及再住院的主要原因。该病往往并发呼吸及神经系统疾病，包括反复呼吸道感染、心肺功能障碍、生长发育迟缓等，其远期影响可持续至青春期及成人期［10］，严重影响患儿生活质量，加重家庭及社会负担［11⁃12］。该病的发生是在早产儿肺发育未成熟的基础上，发生高氧损伤、容量伤、气压伤、感染、动脉导管开放等导致瀑布式的继发性炎症反应。大量炎症细胞浸润，释放大量炎症介质，进一步导致肺损伤，最终形成肺纤维化，发生BPD［13⁃14］。

早产儿肺相对发育不成熟，大量研究表明［8，15］，早产儿胎龄越小BPD 的发病率越高，且严重程度越重，本研究中BPD 组和非BPD 组早产儿胎龄无统计学差异（P＞0.05），考虑可能与样本量较少、且剔除部分小胎龄放弃治疗的病例有关，另外本研究中有9例胎龄＜28 周的极早早产儿，其中有6 例发生BPD，符合胎龄越小，发生BPD 风险越高的特点。长期机械通气及高浓度吸氧容易导致气压伤、容量伤及氧中毒等，引起肺泡受损、肺水肿、肺纤维化及气道炎症反应，严重影响肺泡及肺血管的发育，与BPD 发生密切相关。本研究结果显示，BPD 组早产儿机械通气时间及吸氧时间均明显长于非BPD 组，与以往研究一致［16⁃17］。临床中可采取肺保护性呼吸支持策略，在不影响组织供氧的情况下，尽量缩短机械通气时间、选用低流量氧气吸入。

白三烯（leukotriene，LT）是一类具有高生物活性的气道炎症介质，主要来源于嗜酸性粒细胞、肥大细胞、肺泡巨噬细胞及中性粒细胞等，细胞在活化状态下，其胞膜和核膜的脂质双层经磷脂酶A2代谢产生花生四烯酸，进一步经过5⁃脂氧合酶（5⁃lipoxygenase，5⁃LOX）途径代谢产生白三烯。LI在慢性肺部炎症疾病中起着重要作用，参与了气道炎症细胞聚集和炎症介质释放，诱发气道高反应性，引起气道重塑。白三烯在血液中半衰期约几秒至1分钟，迅速经氧化代谢、以代谢产物形式存在，其代谢产物可经尿液和胆汁排出。尿CysLTE4是白三烯的重要代谢终产物，能够反应白三烯的生成含量［18］，且排泄比例恒定（4%～7%）［19］，标本留取简便，可重复，无创伤。金蕊等［8］研究表明，分别检测足月儿、早产儿、BPD 3 组患儿早期（3 d 内）尿CysLTE4 水平，结果显示差异均有统计学意义，早产组尿CysLTE4水平显著高于足月组，BPD 组最高，同时发现胎龄小、体重低的患儿尿CysLTE4水平较高，提示早期检测患儿尿CysLTE4水平显著升高可预示BPD的发生，同时加强围生期保健，减少小胎龄、低体重早产儿的出生，对降低重症BPD 的发生有重要意义。Eun 等［20］研究也证实早期尿CysLTE4 水平升高与BPD 发生有一定相关性，为BPD 早期敏感生物学指标。而何卫恒等［21］研究发现，早产儿组第7 天尿CysLTE4 水平高于正常足月儿相，于28 d 达最高水平。本研究结果显示，BPD 组和非BPD 组早产儿出生第1 天尿CysLTE4 水平均处于低值、差距不大，随日龄增长呈现上升趋势，生后第7 d BPD 组显著高于非BPD 组，2 组早产儿尿CysLTE4 水平于生后第14 天达高峰，且BPD 组上升幅度较非BPD 组明显，本研究早产儿尿CysLTE4水平达峰时间与上述研究有差别，考虑与纳入病例胎龄范围不一致有关。

近年研究发现IL⁃6、IL⁃8、IL⁃1 和TNF⁃α 等多种炎症因子参与BPD 的炎症反应过程，促使并加重了BPD 的发生和发展［22⁃25］。其中LI⁃8 又称中性粒细胞激活蛋白，是一种典型的有强趋化作用的促炎因子，能诱导中性粒细胞增殖，加重炎症反应，参与早期肺损伤过程，与BPD 的发生密切相关［26］。卢田甜等［27］研究表明，BPD 患儿生后第14天血清LI⁃8明显增高，而非BPD 组血清LI⁃8 维持在较低水平，且IL⁃8 对BPD的病情具有非常高预测价值。本研究结果显示，BPD 组和非BPD 组早产儿出生第1 天血清IL⁃8 水平均处于低值、差距不大，随日龄增长呈现上升趋势，生后第7天BPD组显著高于非BPD组、较上述研究更早期出现阳性结果。同时发现2组早产儿血浆LI⁃8生后第21天达高峰，且BPD 组上升幅度较非BPD组明显，该结果与王刚［9］研究一致。

综上所述，CysLTE4 和IL⁃8 均与早产儿BPD 的发生密切相关，动态监测早产儿尿CysLTE4 和血清IL⁃8 水平对BPD 的早期诊断、早期干预及降低严重并发症的发生率、改善早产儿预后具有重要的临床意义。本研究也存在一定的不足，分组较少，未纳入正常足月组，且样本量有限，后期可扩大样本数据进行深入研究。