围生期孕妇感染B族链球菌血清型与不良妊娠结局的关系*

贾丽娜,佘 欣

桂林医学院附属医院检验科,广西桂林 541001

B族链球菌(GBS)是主要寄生在人消化道下端及泌尿生殖道的一种条件致病菌,是一种革兰阳性球菌,属于β-溶血性链球菌。依据其荚膜多糖的抗原性,GBS可分为Ⅰa、Ⅰb、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ 及Ⅸ共10种血清型。GBS是引起围生期孕妇感染的主要致病菌之一,GBS感染后可导致孕妇胎膜早破、绒毛膜羊膜炎、产后出血等不良妊娠结局;寄生在孕妇生殖道的GBS通过母婴传播可致新生儿感染,导致新生儿肺炎、新生儿败血症、新生儿脑膜炎等严重的感染性疾病,严重时可造成新生儿死亡或者神经系统后遗症[1]。本研究拟了解围生期孕妇GBS感染状况及其血清型与不良妊娠结局的关系,为开展GBS筛查、临床防治GBS感染及保证围生期孕妇良好妊娠结局提供依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2019年7月至2020年12月在本院建卡产检并分娩的围生期孕妇1 294例为研究对象。所有研究对象对本研究均知情同意且自愿参加;本研究经本院医学伦理委员会审批通过。纳入标准:21～35岁;未合并妊娠期并发症(糖尿病、高血压、甲状腺功能减退症等);标本采集前1周孕妇未使用抗菌药物。排除标准:双胎妊娠;存在滴虫、真菌、支原体等其他微生物生殖道感染;患肝、肾、心、脑等慢性疾病;患精神疾病。

1.2仪器与试剂 VITEK MS质谱仪及配套的基质液、靶板、质控菌株大肠埃希菌ATCC8739均购自法国生物梅里埃股份有限公司;生物安全柜购自济南鑫贝生物技术有限公司;哥伦比亚血琼脂平板购自杭州天和微生物试剂有限公司;血清分型试剂购自丹麦血清研究所。

1.3方法

1.3.1GBS标本采集方法 所有研究对象入院时由专业技术熟练的产科医生采集阴道分泌物,医生使用一次性无菌棉签拭子在受检孕妇阴道下1/3处旋转一周,将采集好的拭子放入无菌试管保存并立即送往检验科微生物室检测。

1.3.2GBS培养及鉴定 按照《全国临床检验操作规程》第4版[2]进行GBS培养及鉴定。阴道分泌物拭子接种于哥伦比亚血琼脂平板,放置恒温培养箱培养18～24 h后观察血平板菌落特点,挑取灰白色、半透明、圆形、中等大小、β溶血的GBS可疑菌落涂于质谱仪的靶板,加基质液处理干燥后采用VITEK MS质谱仪进行快速鉴定。

1.3.3GBS血清型分型 鉴定为GBS的菌株血清型分型采用型特异的乳胶凝集试剂盒,不与任何一种型抗血清反应的菌株归为不能分型菌株。

1.3.4分组及观察指标 以GBS细菌培养为标准,了解围生期孕妇生殖道GBS感染率。将GBS阳性孕妇作为阳性组,按1∶3比例随机抽取同期GBS阴性孕妇作为阴性组,并查阅医院临床病例系统,比较两组孕妇早产、胎膜早破、产后出血、绒毛膜羊膜炎和宫内胎儿窘迫等不良妊娠结局情况。

1.4统计学处理 采用SPSS 20.0软件进行数据处理。计数资料以例数、百分率表示,组间比较采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1围生期孕妇GBS感染状况 1 294例围生期孕妇中,阴道分泌物GBS检测阳性75例,故阳性组孕妇有75例,阴性组孕妇有225例。生殖道GBS感染率为5.80%(75/1 294)。

2.2两组孕妇不良妊娠结局发生情况比较 阳性组孕妇胎膜早破、产后出血发生率均高于阴性组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组早产、胎儿窘迫和绒毛膜羊膜炎发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组孕妇不良妊娠结局发生情况比较[n(%)]

2.3阳性组不良妊娠结局孕妇感染GBS血清型的分布 阳性组孕妇感染的75株GBS中共检出Ⅰa型(24株,32.00%)、Ⅰb型(20株,26.67%)和Ⅲ型(31株,41.33%) 3种血清型。感染GBS发生不良妊娠结局的孕妇中,检出Ⅰa型6株,Ⅰb型12株,Ⅲ型17株。感染Ⅰb型GBS的孕妇不良妊娠结局发生率为60.00%(12/20),高于Ⅰa型[25.00%(6/24)],差异有统计学意义(χ2=5.528,P=0.019);感染Ⅲ型GBS的孕妇不良妊娠结局发生率为54.84%(17/31),高于Ⅰa型,差异有统计学意义(χ2=4.950,P=0.026);而感染Ⅰb型和Ⅲ型GBS的孕妇不良妊娠结局发生率[60.00%(12/20)vs.54.84%(17/31)]比较,差异无统计学意义(χ2=0.132,P=0.716)。

由表2可见,阳性组中23例胎膜早破孕妇感染Ⅲ型GBS的比例最高,占60.87%,其次是Ⅰb型(26.09%)和Ⅰa型(13.04%);5例产后出血孕妇感染Ⅰb型GBS的比例最高,占60.00%,Ⅰa型和Ⅲ型均占20.00%;而7例早产、胎儿窘迫和绒毛膜羊膜炎孕妇感染的GBS 3种血清型分布相对比较均衡。

表2 阳性组不良妊娠结局孕妇感染GBS血清型的分布[n(%)]

3 讨 论

妊娠会引起孕妇阴道内微生态环境紊乱,尤其妊娠晚期阴道黏膜水肿、充血等均可能增加生殖道GBS的感染率[3]。既往有研究报道我国围生期孕妇GBS感染率为3.5%～32.4%[4]。本研究围生期孕妇生殖道GBS感染率为5.80%,在全国范围内处于较低水平。其原因有以下几方面:(1)标本采集方面。本研究仅单采集阴道下1/3分泌物培养。由于GBS也寄生在人消化道下端,如同时采集直肠分泌物可提高阳性率。(2)检测方法的局限性。本研究采用的是传统的一般细菌培养法,直接培养出GBS虽然是确诊的金标准,但是在培养中易受阴道中其他病原菌的生长抑制而导致漏检。邢薇等[5]报道PCR法检测的GBS阳性率高于细菌培养法(P<0.001)。容莉莉等[6]报道,层析法检出的GBS阳性率(12.6%)高于培养法 (6.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。PCR法和层析法虽然检出率高,但是不能进行药敏试验,所以一般细菌培养法还是不可替代的。(3)研究对象的选择限制。本研究纳入研究对象的年龄为21～35岁,而杜文渊等[7]报道GBS感染与年龄有关,在年龄≤30岁组、31～35岁组、>35岁组中,>35岁组感染率最高。此外,本研究排除了滴虫、真菌、支原体等生殖道感染者,宦宇等[8]报道,白带清洁度Ⅲ～Ⅳ度、唾液酸苷酶阳性、解脲支原体阳性、有流产史是孕晚期孕妇GBS定植的独立危险因素(P<0.05)。

在探讨围生期孕妇生殖道GBS感染与不良妊娠结局关系的报道中:何建维等[9]研究显示GBS阳性显著增加了胎膜早破、早产、产后出血、产褥感染的发生率,增加了不良妊娠结局的发生;张雪梅等[10]研究报道,GBS感染组孕妇剖宫产、胎膜早破、早产、产褥感染、子宫内膜感染、胎儿窘迫、新生儿窒息的比例均高于未感染组;方雪等[11]报道,研究组胎膜早破、早产发生率高于对照组,而两组剖宫产、产后出血及新生儿窒息发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05);王晓娜等[12]报道,感染组孕妇胎膜早破、早产发生率高于对照组,而感染组产后出血发生率与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);刘晓一等[13]研究结果显示,带菌组孕妇早产、宫内感染的发生率较对照组明显增高,而两组孕妇胎膜早破、胎儿窘迫和稽留流产的发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。本研究中,两组胎膜早破和产后出血发生率比较,差异有统计学意义(P<0.05),而早产、胎儿窘迫和绒毛膜羊膜炎发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。各研究结果之间存在一定的差异,这可能与研究对象的纳入标准不同有关。杨炜婷等[14]报道,孕妇高龄、文化程度低、既往有阴道炎史、有流产史是导致生殖道GBS感染的主要因素;也可能与地区差异有关,GBS感染有很大的区域性和种族性差异,因此南北地区感染的菌株表型也有所差异;还有可能与样本量的大小及是否进行预防性使用抗菌药物有关。

本研究结果显示,孕妇GBS感染株共检出Ⅰa型、Ⅰb型和Ⅲ型3种血清型,其中Ⅲ型占比最高,其次是Ⅰa型和Ⅰb型,阳性组中感染Ⅰb型和Ⅲ型GBS的孕妇不良妊娠结局发生率高于Ⅰa型,差异有统计学意义(P<0.05)。GBS不同血清型菌株毒力基因的表达与其定植力和侵袭力密切相关,不同地区血清型分布也有很大的差异。有文献报道GBS致病性与血清型相关[15];徐亿力等[16]报道,Ⅲ型GBS的定植、侵袭能力更强且与不良妊娠结局有关,妊娠晚期孕妇有必要进行GBS筛查及血清型鉴别。

综上所述,GBS感染增加了围生期孕妇胎膜早破、产后出血等不良妊娠结局的发生率,感染Ⅰb型和Ⅲ型GBS的孕妇不良妊娠结局发生率更高,因此临床需加强对孕妇的健康宣教,早期预防GBS感染,重视围生期孕妇生殖道GBS及其血清型筛查并及时进行干预,这对改善孕妇妊娠结局具有重要意义。由于一些客观条件的限制,本研究仍存在一定的局限性,本研究对围生期孕妇仅采集阴道分泌物通过一般细菌培养法检测GBS,可能会造成GBS漏检而对检测结果有所影响;本研究仅探讨了围生期孕妇GBS感染与不良妊娠结局的关系,并未对孕妇GBS感染妊娠后新生儿的结局进行探讨,因此仍需进一步研究。