高荧光细胞联合CEA、LDH检测对恶性胸腔积液实验室诊断价值研究*

张连杰,吴香蔚,韩清珍,邹珍珍,王 琳

苏州市独墅湖医院临床检测中心,江苏苏州 215000

原发于胸膜或其他部位的恶性肿瘤向胸膜转移引起的胸腔积液称为恶性胸腔积液(MPE)[1]。快速有效地鉴别胸腔积液的性质,对临床诊治、病情评估及预后具有重要意义。传统的脱落细胞学检查是诊断MPE的金标准之一,但因取材部位、数量等局限,加上检验人员能力的差异,检测结果重复性往往较差[2],且难以提供肿瘤细胞的筛查信息。随着全自动血液分析仪的发展,各大品牌的血细胞分析仪都开发了体液检测模式,不仅可以检测胸腔积液有核细胞总数及分类,还可以提供一些研究参数,其中高荧光细胞(HFC)可反映肿瘤细胞的存在。LARRUZEA等[3]提出,HFC可用于胸腔积液良、恶性的鉴别诊断,但HFC单项检测诊断MPE的灵敏度和特异度有限,需要与其他指标进行联合检测。癌胚抗原(CEA)和乳酸脱氢酶(LDH)作为常规肿瘤筛查指标已被广泛应用,因此本研究评估这些参数在MPE诊断中的应用情况并探索不同的诊断模型,以期为临床提供参考依据,现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2021年5月至2023年5月在本院就诊的胸腔积液患者241例作为研究对象。根据胸膜活检或胸腔积液病理检查结果分为MPE组(119例)和非MPE组(122例)。MPE组男68例,女51例;平均年龄为(65.74±13.53)岁;腺癌102例,鳞癌13例,未分化癌3例,肉瘤1例。非MPE组男72例,女50例;平均年龄为(63.52±13.57)岁;结核性胸腔积液18例,化脓性胸腔积液20例, 其他84例。两组年龄、性别等一般资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。纳入标准:有胸腔积液并遵医嘱进行胸腔穿刺或胸膜活检的初诊患者。排除标准:(1)未进行胸腔积液常规及生化免疫学检查;(2)未进行胸膜活检或胸腔积液病理学检查;(3)入院前有相关治疗史。所有研究对象及其家属均知情同意本研究并签署知情同意书,本研究经本院伦理委员会审核批准。

1.2方法 临床无菌操作穿刺抽取所有研究对象10～20 mL胸腔积液,平均分配于紫色乙二胺四乙酸二钾抗凝管和干燥清洁试管中,立即送检[4-7]。采用mindray BC-6800Plus全自动血液分析仪体液模式检测高荧光细胞绝对值(HFC#)和高荧光细胞百分比(HFC%),采用Roche cobas e 801全自动电化学发光免疫分析仪和cobas c 702全自动生化分析仪检测CEA、LDH水平。所有试剂、质控品、校准品、定标品均为原装配套,且均在有效期内。

2 结 果

2.1两组HFC#、HFC%、CEA和LDH水平比较 MPE组HFC#、HFC%、CEA和LDH水平均明显高于非MPE组,差异均有统计学意义(P<0.01)。见表1。

表1 两组HFC#、HFC%、CEA和LDH水平比较[M(P25,P75)]

2.2HFC#、HFC%、CEA和LDH单项及联合检测对MPE的诊断效能 HFC#、HFC%、CEA和LDH单项检测诊断MPE的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.820、0.694、0.838、0.712;且HFC#的AUC明显大于HFC%;CEA+LDH、CEA+HFC#和3者联合检测的AUC分别为0.880、0.918、0.919。3者联合检测的诊断效能明显高于单项检测,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 HFC#、HFC%、CEA和LDH单项及联合检测对MPE的诊断效能

2.3MPE组中不同病理类型患者HFC#、HFC%、CEA和LDH水平比较 腺癌和鳞癌HFC#、CEA和LDH水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);鳞癌类型患者HFC%水平明显低于腺癌类型患者,差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

3 讨 论

人体多种疾病均可引起胸腔积液产生[8],因此明确积液性质,是临床决策诊疗的关键。MPE的早期诊断一直困扰着临床,脱落细胞学检查是其诊断的金标准之一,但该法对取材和制片的环境及检验人员专业能力要求较高,导致整体阳性检出率不高,限制了其在医院尤其是基层医院的广泛应用。目前常规检测方法为生化免疫学检查,但该方法项目多,成本高,且准确率不高,存在一定程度的误诊、漏诊,不利于MPE早期筛查[9]。

MPE中肿瘤细胞分裂比正常组织细胞活跃,呈现明显的核异质改变,在体液检测模式下表现为高荧光性。HFC是血细胞分析仪体液模式的研究参数,其含量增多可提示肿瘤细胞存在。已经有学者提出,HFC可用于胸腔积液良、恶性的鉴别诊断[3-6]。本研究结果显示,MPE组HFC#、HFC%水平均高于非MPE组,差异均有统计学意义(P<0.05)。HFC#、HFC%单项检测对MPE诊断的AUC分别为0.820、0.694;HFC#诊断MPE的敏感度和特异度分别为84.9%、64.8%。说明HFC可灵敏反映肿瘤细胞的存在,但由于核异质间皮细胞、吞噬细胞、异型淋巴细胞等也表现为高荧光性,因此HFC用于肿瘤细胞的筛查存在一定的假阳性,这与既往研究结果一致[3-6,10-11]。

CEA是一种散在分布于癌细胞表面的酸性糖蛋白,在肿瘤尤其是腺癌的诊断方面有独特的价值。LDH是一种糖酵解酶,其广泛分布在主要组织细胞的胞质内,MPE中的肿瘤细胞可释放出大量的LDH。本研究结果显示,MPE组CEA和LDH水平均明显高于非MPE组,差异有统计学意义(P<0.05),CEA、LDH诊断MPE的AUC分别为0.838、0.712,灵敏度分别为78.2%、90.8%,特异度分别为82.8%和45.1%,与既往研究结果类似[8-9,12-19]。

本研究结果显示,HFC和CEA、LDH单独检测均存在特异度较低的问题,本研究尝试将HFC#和CEA、LDH进行多种联合检测。CEA+LDH、CEA+HFC#和3者联合检测诊断的AUC分别为0.880、0.918、0.919,3者联合检测的灵敏度为74.8%,特异度为93.4%,约登指数为0.682,3项指标联合检测诊断MPE的灵敏度稍下降,但特异度和准确性明显提高。3者联合检测诊断MPE的效能明显高于单项检测,差异有统计学意义(P<0.05),说明3项指标联合检测对MPE的诊断价值较高。

本研究结果显示,在MPE的不同病理类型中,鳞癌HFC%水平低于腺癌,差异有统计学意义(P<0.05),推测其原因为鳞癌一般为中央型,发生胸膜转移时肿瘤细胞脱落较少,且转移过程中往往破坏肺组织中的血管,血性胸腔积液有核细胞增多且肿瘤细胞被稀释,所以HFC%水平较低。但本研究鳞癌类型的样本只有13例,还需扩大样本进一步研究。

胸腔积液是多种疾病的常见并发症,其病因诊断具有挑战性[20]。HFC不能当作肿瘤细胞出现的根据,但可提供肿瘤细胞的筛查信息,尤其是在明确胸腔积液性质的诊断中。检验科应完善浆膜腔积液常规检查的标准操作规范,添加复检规则,当HFC增高时,需及时进行脱落细胞学检查,为临床诊断提供旁证。随着自动化血液分析仪和生化分析仪在各级医院的普及,HFC、CEA、LDH数据的获得比较容易,相对于脱落细胞学检查,在各医院更易开展。

综上所述,对于胸腔积液良、恶性的鉴别,HFC和CEA、LDH联合检测在早期诊断中有较好的临床应用价值,可弥补传统脱落细胞学和病理学检查的不足,但本研究仍存在样本量少等不足,且未对非MPE组进行细分类讨论,未来仍需做进一步研究。