振荡提取-高效液相色谱法测定土壤中6种邻苯二甲酸酯

卢嘉棋，梁志尧

(1 广东德量环保科技有限公司，广东 东莞 523000；2 珠海市标定检测技术有限公司，广东 珠海 519090)

随着我国塑料工业的日渐发展以及塑料制品的广泛应用，作为增塑剂的邻苯二甲酸酯(PAEs)也随之通过塑料制品的生产、贮存、使用及处理等过程中不断造成环境污染[1]。据有关研究表明，PAEs能在生物体内聚集，增加致癌、致畸、致突变的风险和干扰内分泌的危害[2]。由于PAEs易在土壤中残留积累，并能通过污染土壤和农产品危害人体健康[3]，因此，研究土壤中PAEs的残留分析显得尤为重要。

目前PAEs的测定可以采用气相色谱法、高效液相色谱法、气相色谱质谱法、液相色谱质谱法等[4-7]，相比其他检测方法，高效液相色谱法更具有简便高效的优点。PAEs土壤样品的前处理方法主要有振荡提取法、快速溶剂萃取法、超声微波法、超声提取法等[4-7]。有研究表明，实验室的检测系统中有可能引入空白的干扰[8]，快速溶剂萃取法、超声微波法、超声波提取法等复杂的前处理过程极易带入空白污染。本文采用振荡提取-高效液相色谱法测定土壤中6种PAEs，具有前处理设备易得、简单便捷、干扰较少，且精密度和准确度较高的优点，适用于批量快速测定PAEs土壤样品。

1 实 验

1.1 仪 器

U3000高效液相色谱仪(配紫外检测器)，赛默飞世尔科技公司；Hypersil GOLD CN HPLC 色谱柱(4.6 mm×250 mm×5 μm)；DYYB-18真空冷冻干燥机，上海德洋意邦仪器有限公司；HY-4A数显调速多用振荡器，常州普天仪器制造有限公司；MV-5多通道平行浓缩仪，北京莱伯泰科仪器股份有限公司；中性氧化铝小柱(自制)。

1.2 试 剂

正己烷(色谱纯)；二氯甲烷(色谱纯)；中性氧化铝(300～70目，在马弗炉400 ℃灼烧6 h)；石英玻璃棉(在马弗炉400 ℃灼烧6 h)；石英砂(100～20目，在马弗炉400 ℃灼烧6 h)；6种PAEs混合标准溶液：邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)、邻苯二甲酸丁基苄酯(BBP)、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)和邻苯二甲酸二正辛酯(DNOP)，标准溶液中各组分的质量浓度均为1 000 mg/L(AccuStandard)；超纯水。

1.3 液相色谱条件

液相色谱采用Hypersil GOLD CN HPLC色谱柱，流动相流速1.5 mL/min，柱温30 ℃，进样量10 μL，用正己烷作流动相进行梯度洗脱，梯度洗脱程序：65%正己烷+35%水，保持10 min；以5%正己烷/min的增量至100%正己烷，保持10 min，0.5 min正己烷减少至65%，保持至35 min。紫外检测器波长为224 nm。

1.4 氧化铝小柱制备

将预先处理好的石英玻璃棉填在玻璃小柱底部，加入灼烧过后的氧化铝1 g，轻敲玻璃小柱外壁使氧化铝均匀分布在柱内。用5 mL二氯甲烷活化，再加入5 mL正己烷淋洗，晾干后备用。

1.5 样品处理

将土壤样品放入真空冷冻干燥机中进行干燥脱水。干燥后的样品研磨后过60目筛，准确称取5 g(精确到0.01 g)样品于锥形瓶中，加入20 mL正己烷，稍微摇晃使样品充分混匀，放置10 min，将锥形瓶固定在数显调速多用振荡器上，在150 r/min频率，振幅为20 mm，提取20 min。提取完成后静置将上清液转移到浓缩瓶中，再次加入10 mL正己烷重复提取1次。合并两次提取液待净化。将提取液全部通过到氧化铝小柱，再用10 mL正己烷分3次润洗装提取液的容器，将洗涤液合并转移到净化柱上，收集净化液于浓缩瓶中，温度控制在40 ℃，浓缩至1 mL以内，最后用正己烷定容至1 mL待测。

2 结果与分析

2.1 标准曲线与检出限

表1 6种PAEs线性方程与检出限Table 1 Linear equations and detection limits for 6 PAEs

分别量取适量的6种PAEs标准溶液，用正己烷稀释，配制成PAEs质量浓度分别为0.50 μg/mL、1.00 μg/mL、1.50 μg/mL、2.00 μg/mL、2.50 μg/mL和5.00 μg/mL的标准系列，在仪器最佳工作状态下对标准溶液系列进行测定，以PAEs的质量浓度为横坐标，其对应的峰高为纵坐标，绘制标准曲线，得到标准曲线和线性相关系数。以石英砂代替样品，加入含量为0.5 μg的PAEs标准溶液，按实验步骤1.5进行前处理，进行空白加标实验7次，按照《环境监测分析方法标准制订技术导则》(HJ 168-2020)附录A 1.1方法[9]，以3.14倍标准偏差计算各组分方法检出限，并且以4倍方法检出限作为测定下限，具体结果见表1。由表1结果可知：6种PAEs在0.50～5.00 μg/mL范围内线性良好，相关系数r≥0.999，当取样量为5.00 g时，6种PAEs检出限在0.02～0.05 mg/kg之间，本方法灵敏度较高，满足土壤中PAEs的分析要求。

2.2 方法精密度与准确度

使用东莞龙昌智能技术研究所编号为RUM113的土壤中6种PAEs标准物质作为测试样品，平行测定6次，计算6种PAEs的相对误差及相对标准偏差，具体结果见表2。

由表2结果可知：土壤中6种PAEs标准物质(RUM113)的测定值均在标准值范围内，相对标准偏差为3.26%～5.80%，本方法精密度和准确度高，结果准确可靠。

对东莞市某地块土壤样品进行分析，并以此为本底进行加标回收实验，具体结果见表3。

由表3结果可知：实际土壤样品中6种PAEs的加标回收率在80.4%～101%之间，加标回收实验结果良好，结果可靠。

表3 土壤样品中6种PAEs加标回收测定Table 3 Recovery determination of six PAEs in soil samples

3 结 论

本文建立了水平振荡萃取，高效液相色谱测定土壤中6种邻苯二甲酸酯的分析方法。结果表明该方法前处理设备易得、简单便捷、干扰较少，且精密度和准确度较高的优点，适用于批量快速测定邻苯二甲酸酯土壤样品。