榆林市某肉牛场球虫感染情况的调查研究

沈娜，麻文静，苏红萍，李直，冯平

（榆林学院，陕西榆林 719000）

榆林市地处陕西省北部，是黄土高原与内蒙古高原的过渡区，四季分明，地域辽阔，北部为风沙草滩区，发展养殖业具有较大的优势。 近年来，由于政府“3+2+X”产业发展战略的提出与实施，榆林市肉牛存栏量迅速增长， 肉牛养殖场迅速增多且养殖标准较高，在榆林市畜牧业中的产值占比逐年增加[1]。在肉牛实际生产中， 各种疾病暴发会造成养殖效益不佳，寄生虫病便是其中之一。 牛球虫病是肉牛养殖中常见的慢性、消耗性疾病，是指由艾美尔属球虫寄生在牛消化道内所引起的寄生虫病， 通常可引起患畜肠道出血、消瘦、免疫力及生产性能下降等，严重可致死。 病牛和带虫牛是该病的主要传染源，成年牛多数呈隐性感染，不表现出临床症状，犊牛因其抵抗力较低，易感性较强，所以发病率和病死率较高[2-3]。

榆林地区肉牛养殖业具有较大的发展潜力，球虫病会造成养殖效益低下。 在此背景下，球虫感染情况调研和防治显得尤为重要。 本研究对榆林某肉牛场的球虫感染状况及感染种类进行调查，以期为该牛场球虫病的防治提供参考，从而提高养殖效益，促进肉牛养殖业发展。

1 材料与方法

1.1 样本采集

随机采集榆林地区某规模化肉牛场1～2 月龄犊牛新鲜粪便样14 份、成年牛新鲜粪便样40 份，共计54 份， 分别装入标记好其年龄和编号的自封袋中，置于4 ℃冰箱保存待检。

1.2 主要仪器与试剂

主要仪器：生物显微镜（麦克奥迪实业集团有限公司）、恒温培养箱（上海博泰实验设备有限公司）、离心机（上海菲恰尔分析仪器有限公司）。 主要试剂：饱和食盐水、2.5%重铬酸钾溶液、4%氢氧化钠溶液。

1.3 测定指标与方法

1.3.1 粪样检查。 采用饱和食盐水漂浮法：从样品的不同部位挑取大小适中的粪便块，放入干净且干燥的青霉素小瓶中，加饱和食盐水至瓶口下方，用细玻璃棒或小镊子将其充分搅碎，除去液面的杂质，滴加饱和食盐水使青霉素小瓶内粪液凸出瓶口呈半球形。 静置15 min，用干净载玻片蘸取球面最上端粪液，盖上盖玻片，置于显微镜下进行观察。

1.3.2 卵囊计数。采用斯陶尔氏法进行卵囊计数进而得出感染强度： 在100 mL 三角烧瓶中加入56 mL 0.4%氢氧化钠水溶液，加入适量待检粪样，使混合液体总容积达到60 mL，再加10 个小玻璃珠，充分振荡使粪便完全破碎混匀， 然后用胶头滴管吸取0.15 mL混合粪液，滴于载玻片上，在显微镜下进行卵囊计数，观察时按照“弓”形移动载玻片，避免遗漏或重复。 为保证试验结果的准确性，每份粪样检查3 个玻片，以3个玻片观察所得卵囊的平均值乘以100， 为每克粪便中含有的卵囊数（oocysts per gramme，OPG），即感染强度。

1.3.3 卵囊收集与培养。 取适量球虫阳性粪便置于烧杯中，加适量清水进行捣碎并搅拌均匀。 用3 层脱脂棉纱布过滤至离心管中， 置于离心机中3 000 r/min继续离心10 min，倾倒管内上层液体，加蒸馏水搅拌均匀，离心。如此反复进行2～3 次，直至上清液清亮为止，取沉淀物用胶头滴管吹吸均匀，移至培养皿中，根据培养皿体积大小注入适量的2.5%重铬酸钾溶液混匀，置于27 ℃恒温箱中培养，每隔4～6 h 对培养皿进行摇晃吹打，直至85%以上球虫的卵囊孢子化。

1.3.4 卵囊发育形态观察。 对孢子化卵囊的颜色、大小、形状和有无卵膜孔等生物学特征进行观察，并统计不同种类球虫卵囊孢子化所需要的时间。 参考文献[4-6]对观察到的卵囊进行种类鉴定。

2 结果与分析

2.1 肉牛场球虫感染情况

2.1.1 感染率。 在检查的54 份肉牛粪便样品中， 检出22 份阳性粪便，总感染率达40.74%。 其中14 份犊牛粪便样品中阳性粪便8 份， 感染率为57.14%；40 份成年牛粪便样品中阳性粪便14 份，感染率为35.00%。 详见表1。

表1 肉牛球虫感染率

2.1.2 感染强度。感染强度即为OPG。在检出的22份粪样中，平均OPG 为236.36 个/g，犊牛平均OPG 为362.50 个/g，成年牛平均OPG 为164.29 个/g。 详见表2。

表2 肉牛球虫感染强度（OPG）

2.2 球虫感染种类及所占比例

通过观察100 个孢子化卵囊，并按其虫种进行分类、计数。 结果显示，共检出8 种艾美耳属球虫，所占比例分别为牛艾美耳球虫19%、 邱氏艾美耳球虫11%、椭圆艾美耳球虫25%、加拿大艾美耳球虫9%、柱状艾美耳球虫7%、亚球形艾美耳球虫21%、奥博艾美耳球虫1%及阿拉巴艾美耳球虫7%，优势虫种为椭圆艾美耳球虫和亚球形艾美耳球虫所占比例分别为25%和21%，详见表3。

表3 球虫感染种类及所占比例

2.3 各种类球虫生物学特征描述

本次试验检出的8 种艾美耳属球虫其孢子化形态详见图1。 8 种艾美耳属球虫的主要生物学特征详见表4。

图1 球虫卵囊孢子化形态（40×）

表4 各种类球虫生物学特征描述

3 讨论

本研究共检测54 份样品，1～2 月龄犊牛新鲜粪便样14 份、成年牛新鲜粪便样40 份，其中阳性样品22份，总感染率为40.74%。 此结果高于宁夏（27.46%）[7]、河北部分地区（33%）[8]的球虫感染率，接近于新疆库车县（40.82%）[9]的球虫感染率。 造成差异的原因可能与采样地区、采样季节和牛场的饲养管理有关，球虫发育需要较高的温度和湿度，多发于雨水较多的季节或地区，一般呈季节性流行[10]，各地区间的气候差异可能会造成感染率的差异，气候温润潮湿的地区球虫感染率相较于气候干燥的地区感染率较高；同时，牛场的饲养环境也是影响感染率的一大因素，定期清除堆积的粪便、保持饲养环境干燥通风也会在一定程度上降低感染率。

本次检测结果发现，榆林地区某肉牛场犊牛与成年牛均存在感染情况，1～2 月龄犊牛的感染率为57.14%、 感染强度为362.5， 均高于成年牛的感染率（35%）和感染强度（164.29），这与叶莉莎等[11]、倪晓婷等[12]和花丽茹[13]的结果基本一致。 这说明犊牛较成年牛更易感染球虫，符合牛球虫病的发病特点。 造成此种现象的原因可能是，成年牛感染球虫后一般不表现临床症状，呈隐性感染，但带虫牛是重要的传染源，而犊牛免疫系统尚未成熟，感染球虫后自身清除机制较弱，发病率较高。 本研究共鉴定出8 种艾美耳属球虫，鉴定种类与冯平等[5]研究结果相似，但由于饲养品种、采样时间等原因导致优势虫种略有差异。

在实际生产中养殖场工作人员应定期将牛舍、饲喂槽和运动场等进行消毒， 保证牛舍内空气流通，保持牛舍、饲喂槽干燥清洁。 定期清理粪便与垫草，防止粪便污染。 饲喂料草尽量离地饲喂，避免饲料被污染，定期更换饮水，确保饮水干净。 尽量将成年牛与犊牛分开养殖，哺乳期母牛在哺喂犊牛前后均应当保持其乳房干净。 合理制定饲料配比，提高机体抵抗球虫感染的能力。 制定相应的驱虫方案，定期用氨丙啉、莫能菌素等抗寄生虫药物进行药物预防治疗，减少球虫的感染。 一旦发现病牛，及时隔离、治疗。

4 结论

通过对榆林地区某肉牛场感染情况的调查研究发现，该肉牛场球虫感染情况比较普遍，犊牛的感染率和感染强度均高于成年牛，共检出并鉴定出8 种艾美尔属球虫，分别为牛艾美耳球虫、邱氏艾美耳球虫、椭圆艾美耳球虫、加拿大艾美耳球虫、亚球形艾美耳球虫、柱状艾美耳球虫、奥博艾美耳球虫和阿拉巴艾美耳球虫，其中椭圆艾美耳球虫和亚球形艾美耳球虫为该牛场的优势虫种。 在实际生产中要注意保持牛舍环境通风干燥，定期清理粪便与垫草，制定安全可行的驱虫方案，定期驱虫，尽可能降低寄生虫对牛只的危害，减少由此产生的损失。