耐药肺结核患者血清可溶性白细胞分化抗原14、降钙素原、白介素-22水平变化及对抗结核疗效的预测价值

韩 莉,徐红艳,王 立,高 瑜

(陕西省结核病防治院,陕西 西安 710100)

肺结核是一种由结核分枝杆菌所致慢性传染病,近年来,结核分枝杆菌耐药性变异尤为突出,我国耐药肺结核发生率约占全球的25%,其病情发展急骤、变化迅速,常累及多器官系统[1-2]。研究认为耐药肺结核治疗效果较差的原因在于未对特异性指标进行探究,血清学指标具有检测便捷、可重复性高等优势,可用于评估耐药肺结核患者耐药情况有[3]。可溶性白细胞分化抗原14(sCD14)属于急性期蛋白,其与肺结核发展进程存在一定相关性[4]。降钙素原(PCT)是由甲状腺滤泡旁细胞合成,机体受到细菌感染时,全身多种细胞可刺激PCT分泌,其水平升高表明多重耐药肺结核患者体内仍存在未清除细菌[5]。白介素-22(IL-22)水平升高可参与耐药肺结核发生过程[6]。由此可知,sCD14、PCT、IL-22可能反映耐药肺结核发展进程,推测其可能作为监测治疗过程的生物标志物,但尚未得到临床证实。基于此,本研究主要探讨耐药肺结核患者血清sCD14、PCT、IL-22水平变化及对抗结核疗效的预测价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年6月至2022年12月本院196例肺结核患者为研究对象,根据耐药情况分为耐药组97例、非耐药组99例,两组患者一般资料比较差异无统计学意义(均P>0.05),见表1。研究经本院伦理委员会批准,所有患者及其家属知情且签署知情同意书。病例纳入标准:符合肺结核诊断标准[7];符合耐药肺结核诊断标准[8],且经实验室痰培养证实;未伴有其他肺部疾病;自主行为能力良好且无沟通交流障碍;对本研究治疗方法有耐受性;近期未使用激素类药物;各项辅助检查均已完成。排除标准:合并恶性肿瘤者;合并乙型肝炎等其他传染性疾病者;近期有严重创伤、手术史者;血液系统疾病、自身免疫性疾病者;长期应用免疫制剂者;对本研究使用药物过敏者;广泛耐药者。

表1 两组患者一般资料比较

1.2 研究方法

1.2.1 治疗方法:耐药组均根据结核菌培养、药敏试验结果,依据《耐药结核病化学治疗指南》(2019简版)制定治疗方案。非耐药组采用2HRZE/4HRE方案抗结核治疗,前2个月为治疗强化期,口服吡嗪酰胺(国药准字H13020806),0.5 g/次,3次/d;异烟肼(国药准字H22020805),0.3 g/次,1次/d;利福平(国药准字H64020181),0.45 g/次,1次/d;乙胺丁醇(国药准字H14022593),0.75 g/次,1次/d。后4个月为巩固期,口服异烟肼,0.3 g/次,1次/d;利福平0.45 g/次,1次/d;乙胺丁醇0.75 g/次,1次/d。治疗6个月后采集痰液标本进行结核菌培养,连续3次痰菌检查呈阴性则为转阴,否则为未转阴[9]。

1.2.2 临床资料的收集:收集研究对象的一般资料,包括性别、年龄、体重指数、吸烟史、肺部空洞、耐药程度、病情程度。肺结核病情程度评价标准[10]:病灶≥3个肺野或毁损肺,且并发呼吸衰竭或低氧血症,为重症肺结核;病灶≤2个肺野,血气分析指标正常,为轻症肺结核。耐药程度评价标准[11]:单耐药:感染的结核分枝杆菌对1种抗结核药耐药;多耐药:感染的结核分枝杆菌对不同时包括利福平、异烟肼在内的2种以上抗结核药物耐药;耐多药:感染的结核分枝杆菌至少对一线抗结核药物中的利福平、异烟肼耐药。

1.2.3 血清sCD14、PCT、IL-22水平检测:分别采集所有肺结核患者治疗前、治疗1、3、6个月后空腹静脉血5 ml,500 r/min离心15 min留取上清液,冻存于-80 ℃冰箱待检。采用ELISA法检测血清sCD14水平,上海研启生物公司提供检测试剂盒。采用免疫荧光法检测血清PCT水平,美国RD公司提供检测试剂盒。采用LFF-LC-1781全自动生化分析仪(美国贝克曼库尔特公司)检测血清IL-22水平。

1.3 观察指标 ①比较(入组时)不同组别、不同临床特征患者血清sCD14、PCT、IL-22水平。②比较耐药组转阴、未转阴患者治疗前、治疗1、3、6个月后血清sCD14、PCT、IL-22水平,并计算其变化值,分别记为△1、△2、△3。③分析血清各指标变化值△1、△2、△3与抗结核疗效的关系,并分析其对抗结核疗效的预测价值。

2 结 果

2.1 两组患者血清sCD14、PCT、IL-22水平比较 耐药组血清sCD14、PCT、IL-22水平均较非耐药组高(均P<0.05),见表2。

表2 两组患者血清sCD14、PCT、IL-22水平对比

2.2 耐药组不同临床特征患者血清sCD14、PCT、IL-22水平比较 耐药组不同肺部空洞、耐药程度、病情程度患者血清sCD14、PCT、IL-22水平比较差异有统计学意义(均P<0.05),见表3。

表3 耐药组不同临床特征患者血清sCD14、PCT、IL-22水平对比

2.3 血清sCD14、PCT、IL-22水平与耐药肺结核临床特征的相关性 相关性分析显示,耐药组血清sCD14、PCT、IL-22水平与肺部空洞(赋值:无空洞=1,有空洞=2)、耐药程度(赋值:单耐药=1,多耐药=2,耐多药=3)、病情程度(赋值:轻症=1,重症=2)呈正相关(均P<0.05),见表4。

2.4 不同疗效患者血清sCD14、PCT、IL-22水平及变化值比较 耐药组治疗6个月后转阴57例,未转阴40例。重复测量方差分析:组间比较,未转阴患者治疗前、治疗1、3、6个月后血清sCD14、PCT、IL-22水平均较转阴高(均P<0.05);组内比较,转阴患者治疗1、3、6个月后血清sCD14、PCT、IL-22水平均较治疗前低,未转阴治疗3、6个月后血清sCD14、PCT、IL-22水平均较治疗前低(均P<0.05);组间-时间点交互作用比较,差异有统计学意义(P<0.05)。未转阴患者治疗1、3、6个月后血清sCD14、PCT、IL-22水平变化值均较转阴低(P<0.05)。见表5、6。

表5 不同疗效患者血清sCD14、PCT、IL-22水平比较

表6 不同疗效患者血清sCD14、PCT、IL-22水平变化值比较

2.5 治疗前后血清sCD14、PCT、IL-22水平变化值与抗结核疗效的关系 相关性分析显示,耐药组治疗1、3、6个月后血清sCD14、PCT、IL-22水平变化值与抗结核疗效(赋值:未转阴=1,转阴=2)呈正相关(均P<0.05)。见表7。

表7 治疗前后血清sCD14、PCT、IL-22水平变化值与抗结核疗效的关系

2.6 治疗前后血清sCD14、PCT、IL-22水平变化值预测抗结核疗效的价值 以未转阴患者为阳性样本,转阴患者为阴性样本,绘制治疗1、3个月后血清sCD14、PCT、IL-22水平变化值预测抗结核治疗未转阴的ROC曲线,结果显示sCD14△1、PCT△1、IL-22△1单独预测的AUC分别为0.773、0.732、0.769,sCD14△2、PCT△2、IL-22△2单独预测的AUC分别为0.795、0.801、0.826,sCD14△2、PCT△2、IL-22△2联合预测的AUC大于sCD14△1、PCT△1、IL-22△1联合预测的AUC(Z=1.923,P=0.045),见表8(图1)。

表8 治疗前后血清sCD14、PCT、IL-22水平变化值预测抗结核疗效的价值

3 讨 论

机体感染结核杆菌后,机体免疫系统启动T细胞亚群介导细胞免疫,可清除病原菌;若机体免疫力低下则可能进一步发展为肺结核,免疫功能障碍可减弱机体抵抗结核杆菌能力,促使耐药性发生,而高耐药性可逐步发展成为耐药肺结核,进一步损伤免疫机制,增加治疗难度[12-14]。因而寻求预测耐药肺结核患者抗结核疗效的指标,有助于提高整体治疗效果,改善患者预后。

CD14属于脂多糖-脂多糖结合蛋白复合体的受体,sCD14是CD14亚型之一,可激活炎性级联反应,介导内皮细胞、上皮细胞发生炎性反应,其水平升高可增加肺部感染发生风险[15]。结核杆菌感染后血清sCD14水平升高,并可参与肺结核发生发展过程[16]。本研究结果显示,耐药组血清sCD14水平高于非耐药组,且与肺部空洞、耐药程度、病情程度呈正相关,提示sCD14可能参与耐药肺结核发生发展过程。sCD14与细胞上相应受体结合,促使细胞黏附分子等多种细胞因子、趋化因子生成,激活气道炎性细胞,加重肺组织损伤程度[17]。由此推测sCD14水平升高可引起全身炎性反应,不利于病原菌清除,进而参与耐药肺结核发展过程。正常生理条件下PCT水平较低,若机体受到病原菌感染后PCT水平升高,可参与耐药肺结核发生过程[18-19]。本研究结果显示,耐药组血清PCT水平高于非耐药组,随着肺部空洞发生及耐药程度、病情程度增加,血清PCT水平呈上升趋势,提示PCT水平变化与耐药肺结核病情进展、耐药程度密切相关。机体出现感染、全身炎性反应时,全身多种组织、细胞释放PCT,PCT水平随着肺结核病情加重而逐渐升高[20-21]。由此推测耐药肺结核患者自身免疫功能下降,炎性细胞、细菌分泌的内外毒素可刺激PCT分泌,PCT可能作为评估耐药肺结核病情严重程度的潜在指标。

肺部免疫细胞中IL-22水平降低可引起机体免疫功能紊乱,增加肺部感染发生风险[22]。另有研究表明IL-22水平升高与肺结核发病机制、病情严重程度有关[23]。本研究结果显示,耐药组血清IL-22水平高于非耐药组,其水平升高与肺部空洞、耐药程度、病情程度呈正相关,表明IL-22水平升高与耐药肺结核病情进展有关,这与既往研究结果相似[24]。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)过量表达可增加抗结核杆菌感染的敏感性,但IL-22水平升高后引起机体免疫失衡,促使TNF-α表达量降低,导致其敏感性降低[25]。本研究发现未转阴患者治疗前后血清sCD14、PCT、IL-22水平变化值低于转阴患者,且与抗结核疗效呈正相关,提示血清sCD14、PCT、IL-22水平变化可能用于预判抗结核治疗方案的临床疗效。目前sCD14、PCT、IL-22在耐药肺结核患者抗结核治疗中的应用价值尚未明确,本研究结果显示,sCD14△2、PCT△2、IL-22△2联合预测抗结核治疗时可提高AUC至0.931,sCD14△1、PCT△1、IL-22△1联合预测抗结核治疗时可提高AUC至0.875,且sCD14△2、PCT△2、IL-22△2联合预测的AUC大于sCD14△1、PCT△1、IL-22△1联合预测的AUC,提示sCD14、PCT、IL-22联合预测对耐药肺结核患者抗结核疗效具有一定预测价值。

综上所述,耐药肺结核患者血清sCD14、PCT、IL-22水平升高,且与耐药程度、病情程度呈正相关,各指标联合预测抗结核疗效具有临床应用价值,可为临床评估耐药肺结核病情、预测疗效提供参考,有利于指导临床治疗。