分子即时检验在病毒性呼吸道感染疾病诊断中的应用价值研究

吕文凤

天津市西青区疾病预防控制中心 300393

呼吸道感染疾病主要是因为患者身体免疫能力下降时,病毒或者细菌侵入到人体的呼吸道,使呼吸道黏膜发生急性的炎症改变的一系列呼吸道疾病,患者多表现为咳嗽、咳痰、喘息、气急等疾病症状,但仅依靠疾病症状较难判断患者病情与取得明确诊断(即除了细菌和病毒之外,一些冷空气、粉尘、有害气体等理化刺激因素也可以刺激气管黏膜引起急性损伤和炎症反应,进而造成呼吸道感染[1]。此外,还有一些过敏的因素,比如花粉、粉尘、动物毛皮以及排泄物都可以引起气管黏膜出现急性炎症反应,从而出现呼吸道感染)。而对于不同的呼吸道感染病因,需采取不同的治疗方法,以便在短时间内消除疾病症状,促进病情转归。其中病毒性呼吸道感染疾病常由流感病毒、副流感病毒、鼻病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒等感染所致,一般表现为上呼吸道感染,由于早期症状与普通感冒类似,若患者未及时采取治疗干预,当病情发展严重时可导致呼吸道的堵塞引起呼吸窘迫,甚至累及心脏,引起心肌受损,导致心肌炎。因此,加强病毒性呼吸道感染疾病患者的临床诊断十分重要。传统血清生化检验是感染性疾病的传统检验方式,虽能通过检验靶向血清标志物取得较高的感染性疾病诊断价值,但耗时较长,前提条件较多(血液样本可受病理性因素、环境因素等影响),难以为病毒性呼吸道感染患者提供早期明确诊断价值[2]。故而,寻求一项更为科学、便捷的检验方式为当前临床研究重点。分子即时检验是随着医疗科技不断发展,在近几年发展出的新型呼吸道检验技术,具有即时检验、床旁检验、就地检验等一系列便利优势,且此项检验技术可靶向数十种病原体,自动指标标本中病原体,从而取得准确的感染性诊断价值。将其用于病毒性呼吸道感染疾病的临床诊断中,可取得有效打破传统血清生化检验的地域、时间局限,取得理想诊断价值[3]。基于此,本文就分子即时检验在病毒性呼吸道感染疾病诊断中的应用价值展开研究,具体如下。

1 对象和方法

1.1 研究对象 以天津市某医院2020年1月1日—2021年12月31日收治的112例疑似病毒性呼吸道感染疾病患者为研究对象,其中男62例,女50例;年龄3～80岁 ,平均年龄(45.98±15.11)岁;感染病程1～5d,平均病程(3.02±0.34)d;入院时体温38.5～40.5℃,平均体温(39.75±0.55)℃。本研究取得所有研究对象自愿签订的知情同意书与伦理委员会批准文件。纳入标准:(1)入组时均存在不同程度的发热、咳嗽、咳痰、干啰音、呼吸窘迫等症状;(2)受教育程度均为初中及以上;(3)将病史资料完整。排除标准:(1)入组前1周内有抗感染治疗者;(2)存在精神疾病,认知障碍,心、肝、肾等重大器官功能障碍、脑血管疾病者;(3)处于哺乳、妊娠期女性患者;(4)中途转院、退出研究者。

1.2 方法 所有研究对象入组后均先行分子即时检验(美国ABI实时荧光定量PCR仪QuantStudio 6),即将水合溶液和300ml支气管灌洗液加入Cell Lysis试剂管中,FilmAr-ray工具依次进行提取和纯化核酸、反转录和多重聚合酶链反应,使用端点熔解曲线数据,FilmArray软件自动为每个目标生成结果。再行传统血清生化检验,即采集晨起空腹静脉血在北利自动平衡离心机DT5-1用3 200r/min离心10min后,吸取血清在OLYMPUSAU640全自动生化仪按SOP文件检测C反应蛋白(CRP)、前白蛋白(PAB)、降钙素原(PCT)及白细胞(WBC)等生化指标(CRP正常范围:0～5mg/L;PAB正常范围:280～360mg/L;PCT:0～0.5ng/ml;WBC:4～10×109;超过正常范围即为阳性)。

1.3 观察指标 所有研究对象均先行分子即时检验,再行传统血清生化检验,最后行实验室培养检出100例病毒性呼吸道感染疾病(以此为金标准),统计对比分子即时检验、传统血清生化检验的检查耗时(从采样要出诊断结果)与诊断效能。

2 结果

2.1 两种检验方式耗时对比 经对比,分子即时检验耗时为(1.08±0.07)h,显著短于传统血清生化检验的(5.25±0.52)h,差异有统计学意义(t=84.109,P=0.000<0.05)。

2.2 两种检验方式诊断准确率分析 金标准为90.18%(101/112),分子即时检验对病毒性呼吸道感染疾病的诊断准确率与金标准对比无统计学差异(χ2=0.174,P=0.677),传统血清生化检验对病毒性呼吸道感染疾病的诊断准确率显著低于金标准(χ2=6.985,P=0.008)。分子即时检验与传统血清生化检验对病毒性呼吸道感染疾病特异度、阳性预测值、阴性预测值等诊断效能均无统计学差异(P>0.05),但分子即时检验对病毒性呼吸道感染疾病的诊断准确率、灵敏度均显著高于传统血清生化检验(P<0.05)。见表1～2。

表1 分子即时检验和传统血清生化检验诊断准确率分析

表2 分子即时检验与传统血清生化检验对病毒性呼吸道感染疾病诊断效能对比(%)

3 讨论

病毒性呼吸道感染是临床常见呼吸道感染类型,高发于免疫力低下的老人与小孩儿,且由于早期症状不明显,大部分患者因反复发热、头晕头痛、扁桃体肿大、咽部充血、咽喉肿痛等症状就诊时,多已存在一定心肺损伤,甚至病毒性心肌炎、病毒性脑炎等严重后果。且此类患者的治疗周期较长(多需1～2周),在此期间需不断评估患者病情,灵活调整用药方案,因此,寻求一项便捷、快速、操作简单的检验技术为病毒性呼吸道感染患者的临床研究重点。

传统的血清生化检验是利用生物和化学方法对采集标本进行检测的临床检验技术,可涉及机体循环功能、代谢功能、免疫功能等多项机能,因此,适用范围极度广泛,在临床上广泛应用。对于病毒性呼吸道感染患者而言,传统的血清生化检验也可通过血清标本检验取得较高诊断价值,但传统的血清生化检验技术的血清标本可受患者年龄、免疫功能、基础性疾病、合并症、环境因素、心理因素、采样情况等多种因素影响,进而影响检验结果[4]。且传统的血清生化检验技术耗时较长,无法为病毒性呼吸道感染患者的预后监测与评估提供灵活检验,难以作为病毒性呼吸道感染患者的临床诊断与预后评估的理想检验技术。

分子即时检验是近年来随着医疗科技发展而衍生出的新型检验技术,主要由CE-IVD标记的多重巢式PCR以及自动化体外诊断系统组成,是集样品制备、扩增、检测和分析功能于一体体外诊断设备。此检验设备可靶向甲型流感病毒(H1亚型、H1-2009亚型、H3亚型)、乙型流感病毒、腺病毒、冠状病毒(HKU1、NL63、229E、OC43)、人类肺病毒、人类鼻病毒/肠病毒、副流感病毒(1型、2型、3型、4型)、呼吸道合胞病毒等数十种病原体与百日咳鲍特菌、肺炎衣原体和肺炎支原体等3种非典型病原体。其检验操作始于将300ml未处理的生物/临床样品加入反应盒中,再进行核酸提取、纯化、反转录和多重聚合酶链反应、熔解曲线分析,最后开展聚合酶链式反应。且该仪器与软件连接,可实时分析熔解曲线变化与荧光曲线变化,加之该系统可通过分析样品扩增的DNA熔解曲线,从相应的扩增中自动识别病原体,最终报告每种病原体的阴性或阳性结果[5]。此项检验技术较之其他临床检验技术具有更高灵活性,能在实验室外,于患者护理现场实地进行标本采集、检测、分析,且其便利性,还可进入患者家庭进行自我监测。其次,分子即时检验技术的结果分析耗时较短,一般在1h左右即可取得准确的检验结果,为患者的病情诊断、评估提供科学依据。将其作为病毒性呼吸道感染患者的临床诊断检验技术,可通过缩短患者检测与就诊时长,延长患者疾病鉴别与治疗决策制定时长,使患者及时取得对症治疗,消除疾病症状,这对促进患者病情转归具有重要意义。最后,分子即时检验技术的便捷与操作简单等优势,可在病毒性呼吸道感染疾病患者的预后评估与监测中起到较佳保障效果[6]。本研究结果也显示,分子即时检验检查方式的检验耗时显著低于传统血清生化检验(P<0.05);分子即时检验对病毒性呼吸道感染疾病的诊断准确率与金标准对比无统计学差异(P>0.05),而传统血清生化检验对病毒性呼吸道感染疾病的诊断准确率显著低于金标准(P<0.05);分子即时检验与传统血清生化检验对病毒性呼吸道感染疾病特异度、阳性预测值、阴性预测值等诊断效能均无统计学差异(P>0.05),但分子即时检验对病毒性呼吸道感染疾病的诊断准确率、灵敏度均显著高于传统血清生化检验(P<0.05)。但要注意的是,分子即时检验标本若采集不当也会影响检验结果,对此,应重视可影响检验结果的一系列因素,严格按照厂商归并进行采样、检验操作,避免干扰的同时,定期与临床实验室检验结果进行对比,确保医疗机构内检验结果的一致性和准确性,且定期进行治疗控制与临床监管。

综上所述,在病毒性呼吸道感染疾病诊断中,采取分子即时检验,可取得较高诊断效能,且耗时较短,可为患者的早期诊断与病情评估均提供科学依据,值得临床推广应用。在当前信息技术与医疗科技不断发展的时代背景下,分子即时检验技术的可检测项目不断增多,其检验质量也得到不断进步,随着检验设备的不断更新与完善,使其在呼吸道感染性疾病的临床诊断与治疗中得到更为广泛的认可与青睐,可持续发挥重要作用。但当前临床对于分子即时检验在病毒性呼吸道感染疾病诊断中的应用价值研究较少,有待后续深入探索。