软枣猕猴桃高效快速成苗技术

朱星樽，顾地周，邹佳楠，3

软枣猕猴桃Actinidia arguta（Sieb. et Zucc.）Planch. ex Miq.在现有技术中，多采用种子、扦插、嫁接、组培等方式进行常规繁殖，种子繁殖性状产生分离，扦插生根率和嫁接成活率极低［1-5］.组织培养不仅投入成本高且操作性差，而且组织培养繁殖大多以愈伤组织再分化、嫩芽、嫩茎为试材，采用愈伤组织诱导、愈伤组织再分化、继代增殖、生根或初代培养、继代增殖、生根等多步方式才能达到成苗，尽管生根率可观，但在愈伤组织诱导、愈伤组织再分化和继代增殖时，可能产生了变异或突变，即使成苗，也与亲本性状出现差异［6-7］.所以，开展软枣猕猴桃高效快速成苗技术研究，具有重要的生产应用价值.

1 材料与方法

1.1 实验材料及处理

6—8 月份，剪取软枣猕猴桃枝条（嫩条或半木质化条），切割成一叶一段的茎段（去除叶片）作为材料备用；将切割后的茎段在硫酸钾（K2SO4）溶液（浓度范围0.03~0.08 mg·L-1）内浸泡45 min.

1.2 软枣猕猴桃茎段生根发芽

从硫酸钾溶液中捞出茎段放入容器（盆等）中，用厚度为3 mm 左右的湿布盖住茎段，置于适宜温度（范围18~28 ℃）和湿度（范围50%~75%）环境下培养，期间，每天早晚用25 ℃的水刷洗茎段各1 次，15 d 左右统计生根发芽（既生根又发芽）率，生根发芽率=（生根并发芽的茎段数/茎段总数）×100%.

1.3 软枣猕猴桃小植株炼苗移栽

茎段生根发芽后去除湿布，在容器边沿上用塑料薄膜封住（薄膜不接触茎段），在薄膜上开直径为5 mm 左右的孔（孔数根据容器大小而定，保证内部不积热），放置在阳光暖和的地方繁殖2~3 d 后即可将单株苗移至营养钵内，15 d 后统计成活率，成活率=（成活的小植株数/茎段生根并发芽的小植株总数）×100%.

1.4 数据分析与处理

采用均匀设计法进行全回归性分析处理数据，应用均匀设计软件（Uniform Design 3.0 V）.

2 结果与分析

2.1 硫酸钾、温度和湿度对软枣猕猴桃茎段生根发芽的影响

实验所得数据（表1）经均匀设计软件分析处理后可得回归方程为Y=74.8＋90.0X1＋0.193X2＋0.189X3，显著性水平α=0.05，复相关系数R=0.999 0，剩余标准差S=0.163，检验值Ft=328.5>临界值F（0.05，3，2）=19.16，回归方程具有显著性.硫酸钾、温度和湿度对软枣猕猴桃茎段生根发芽的影响均具有显著性.通过计算硫酸钾、温度和湿度对软枣猕猴桃茎段生根发芽的贡献值和贡献率可知，U1=13.2，U1/U=50.3%；U2=2.43，U2/U=9.25%；U3=14.5，U3/U=55.3%，说明温度对软枣猕猴桃茎段生根发芽的影响最小，对其进行单项显著性检验可知，检验值F（2）=91.12>临界值F（0.05，1，2）=18.51，说明温度对软枣猕猴桃茎段生根发芽的影响显著.通过回归方程可知，因硫酸钾、温度和湿度对软枣猕猴桃茎段生根发芽率呈正相关，由此推测，硫酸钾、温度和湿度分别高于0.08 mg·L-1、28 ℃和75%可能有更高的生根发芽率.为验证此推测，又以硫酸钾质量浓度为0.08、0.09、0.10、0.11、0.12、0.13 mg·L-1，温度为（28、29、30、31、32、33、34、35）（±1）℃，湿度为75%、77%、79%、81%、83%、85%，开展6 个补充验证试验，重复3 次，15 d 后发现，硫酸钾质量浓度为0.08~0.10 mg·L-1，温度在28~33 ℃，湿度在75%~77%时软枣猕猴桃茎段生根发芽率最高，均达98%以上，平均高于表1所列6 个处理（平均值）的生根发芽率，且根和芽生长状况最好.温度超过33 ℃时芽尖干枯且芽体黄色，湿度超过77%时根出现腐烂现象.

表1 影响软枣猕猴桃茎段生根发芽的因素筛选的U6（63）试验设计与结果

通过以上实验数据处理和分析可知，硫酸钾质量浓度为0.08~0.10 mg·L-1，温度在28~33 ℃，湿度在75%~77%时软枣猕猴桃茎段生根发芽率最高，均达98%以上，小植株生长状况最好，如图1 所示.

图1 软枣猕猴桃一步高效快速成苗不同时期的形态

2.2 软枣猕猴桃植株高效再生体系建立

软枣猕猴桃种苗的快繁通过茎节增殖方式，增殖倍数为2（在小植株上再切2 段），按100 个茎段为基源，每年有24 个周期（软枣猕猴桃15 d 一个周期）进行扩繁，年生产种苗数为：∑年产成活种苗=（100×224×98%×97%）株，可以满足软枣猕猴桃工厂化育苗和规模化人工栽培的需要.

2.3 软枣猕猴桃小植株的炼苗和移栽

根据1.3 中的方法，当小植株炼苗2~3 d后即可移植到营养钵中，将栽有幼苗的营养钵集中置于塑料大棚内，控制棚内温度为25~30 ℃、湿度为50%~60%、透光率为50%，经统计，小植株成活率可达到97%以上.

3 讨论

刘晓晗等［8］以0.2、0.5、1 g·L-1硫酸钾与0.5、1、1.5 g·L-1氯化镁9 个组合处理（以未经药剂处理为对照），浸泡种子，处理8 h 后，检测其发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数，结果表明，硫酸钾与氯化镁9 个组合处理的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数几乎都高于对照，不同浓度硫酸钾与氯化镁组合对甜菜种子引发均有促进作用，但引发效果不同，0.5 g·L-1硫酸钾加0.5~1.5 g·L-1氯化镁对甜菜种子引发效果较好.冯岳等［9］研究纯水、-0.3、-0.7 MPa NaCl 溶液处理对小麦种子萌发过程及生理指标的影响.结果表明：经-0.3 MPa NaCl 溶液处理可提高小麦种子的最终萌发率，且细胞膜相对透性和MDA 质量摩尔浓度最低，而可溶性蛋白质量分数、α-淀粉酶活性和总淀粉酶活性最高.适度的NaCl 胁迫引发对小麦种子的萌发有促进作用，这种作用是通过促进细胞膜修复和提高α-淀粉酶活性实现的.

低渗溶液引发可促进种子萌发，但低渗溶液引发促进植物茎段生长不定根及促进侧芽萌发，进而形成完整幼苗，尚未见报道.本文研究直接以优质软枣猕猴桃的嫩茎或半木质化茎段为材料，用0.03~0.08 mg·L-1浓度的硫酸钾浸泡45 min 后，置于敞开的容器内，在18~28 ℃和50%~75%湿度环境下培养15 d，即可生根发芽成为完整植株，说明硫酸钾既能促进软枣猕猴桃的茎段生根，又能促进软枣猕猴桃的茎段的侧芽萌发，对保证软枣猕猴桃的茎段快速成苗发挥了重要作用，但其作用机理尚需进一步研究.