■ 张国欣 王永海 宋志刚*
(1.山东农业大学动物科技学院,山东泰安 271018;2.高密市畜牧业发展中心,山东潍坊261500)
豆粕具有极高的营养价值,其蛋白质含量丰富,常作为家禽营养中蛋白质的主要来源。随着家禽集约化养殖程度的提高、规模的扩大、市场上对豆粕的需求量也越来越大。然而,豆粕中存在抗营养因子,制粒后颗粒较硬,难以消化,且家禽从摄入食物到排泄时间较短,因此还没来得及消化的豆粕便随之排出,造成了资源的浪费和成本的增加。
发酵豆粕通过微生物发酵,有效地降解了豆粕中的主要抗营养因子,可改善饲料适口性,对促进动物的健康成长具有重要意义[1-2]。目前学者对发酵豆粕对蛋鸡的影响研究中发现,发酵豆粕组产蛋率、哈氏单位、蛋壳厚度和蛋形指数均有所提升[3-4]。目前鲜有在海兰褐蛋鸡试验上进行发酵豆粕与40%豆粕高比例的替代研究,本试验以海兰褐蛋鸡为研究对象,研究用发酵豆粕替代40%豆粕对海兰褐蛋鸡生产性能、蛋品质及免疫功能的影响,旨在为发酵豆粕替代正常豆粕在家禽饲粮中的应用提供科学依据。
试验材料为湿态发酵豆粕,由某公司提供,以豆粕为原料,使用乳酸菌、酵母菌和丁酸梭菌等益生菌发酵制成,活菌总数为1×108CFU/g。试验地点在山东农业大学科技创新院畜牧科技实验站进行。试验鸡舍及配备的蛋鸡福利养殖设备均由山东农业大学动物科技学院提供。
选用48 周龄144 只体型和产蛋率基本一致的海兰褐蛋鸡,随机分为2 组,每组6 个重复,每个重复12 只。对照饲喂基础饲粮,试验组用发酵豆粕替代40%的正常豆粕(饲粮组成及营养水平见表1)。试验期为8 周,每天统计生产性能,第4 周和第8 周结束时测蛋品质,采集血清。
表1 饲粮组成及营养水平(风干基础)
1.3.1 生产性能和蛋品质
生产性能:试验期内以重复为单位统计采食量、产蛋数、产蛋重,计算平均产蛋率、料蛋比、平均蛋重和平均日采食量。
产蛋率(%)=产蛋数/试验蛋鸡数量×100
合格蛋率(%)=合格蛋数/总产蛋数×100
平均蛋重(g)=产蛋总重量(g)/产蛋总数(个)
平均日采食量(g)=总采食量(g)/[试验蛋鸡数量(只)×试验天数(d)]
料蛋比=总耗料量(g)/总产蛋重量(g)
蛋品质:第4周和第8周时,分别从每个重复随机抽取3 个鸡蛋,测定蛋品质。采用色差仪(CR-410型,日本美能达公司)测定蛋壳颜色,电子天平称蛋重,游标卡尺测定鸡蛋的长、短径,蛋壳厚度测量仪(ETG-1061 型,日本Robot-mation 公司)测定蛋壳厚度,蛋壳强度测试仪(EFG-0503 型,日本Robotmation 公司)测定蛋壳强度,多功能蛋品质检测仪(EMT-5200 型,日本Robot-mation 公司)测定蛋白高度、蛋黄颜色、哈氏单位。
1.3.2 外周免疫指标
第4 周和第8 周时,分别于每个重复中选取体重接近的1 只鸡翅下静脉采血3 mL,收集血清,标记好后于-20 ℃保存待测。用酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒(上海酶联生物科技有限公司)检测血清中内毒素(ET)、白细胞介素-1β(IL-1β)和免疫球蛋白A(IgA)的含量。所有的测定程序都严格按照制造商的说明进行。批内和批间变异系数(CV)均小于10%。
试验数据用“平均值±标准误”表示,采用Excel进行初步处理,再用SAS 9.1.3 统计软件ANOVA 进行单因子方差分析,P<0.05 表示差异显著,0.05≤P<0.10 表示具有差异显著趋势,P>0.05表示差异不显著。
由表2、表3 分析可得,饲粮中用发酵豆粕代替蛋鸡饲粮中40%豆粕可显著提高海兰褐蛋鸡1~4 周的合格蛋率(P<0.05),对1~4 周产蛋率、平均日采食量和5~8周的合格蛋率有提升的趋势(0.05≤P<0.10),对其他生产性能指标无显著影响(P>0.05)。
表2 发酵豆粕对海兰褐蛋鸡1~4周生产性能的影响
表3 发酵豆粕对海兰褐蛋鸡5~8周生产性能的影响
由表4 分析可得,饲粮中用发酵豆粕代替蛋鸡饲粮中40%豆粕对海兰褐蛋鸡第4 周的蛋黄颜色和哈氏单位有降低的趋势(0.05≤P<0.10),对其他蛋品质指标没有显著影响(P>0.05)。
表4 发酵豆粕对海兰褐蛋鸡第4周蛋品质的影响
由表5 分析可得,饲粮中用发酵豆粕代替蛋鸡饲粮中40%豆粕对海兰褐蛋鸡第8 周蛋品质没有显著影响(P>0.05)。
表5 发酵豆粕对海兰褐蛋鸡第8周蛋品质的影响
由表6 分析可得,发酵豆粕代替蛋鸡饲粮中40%豆粕显著提高了海兰褐蛋鸡第4 周和第8 周血清IgA水平(P<0.05),降低了第4 周血清ET 水平(P<0.05),且第4 周血清IL-1β有降低趋势(0.05≤P<0.10),其余指标没有显著差异(P>0.05)。
表6 发酵豆粕对海兰褐蛋鸡血清生化指标的影响
评估产蛋率与合格蛋率是衡量蛋鸡生产性能的主要指标。本试验研究表明,用发酵豆粕代替40%普通豆粕对海兰褐蛋鸡第1~4 周合格蛋率有显著影响,对产蛋率和平均日采食量有提升的趋势。王伟锋等[5]研究发现,饲料中分别添加1%和3%的发酵豆粕,与对照组相比,产蛋率出现了显著降低的现象,其余指标则无显著差异。而孙亚楠等[6]发现用2%的发酵豆粕代替豆粕不仅提高了蛋鸡产蛋率,而且还降低了破蛋率;也有学者研究发现5%的发酵豆粕使合格蛋率得到显著提高,而料蛋比等其余指标则无显著变化[7]。合格蛋率和采食量的显著提升,是因为豆粕在进行发酵过程中,使得其中的蛋白质分解为多肽和氨基酸等小分子物质,有利于机体对营养物质的吸收,并且豆粕在发酵完后会产生一种酸香味,诱食效果较强,可以促进动物的采食[8]。
蛋品质是区分蛋鸡所产鸡蛋好坏的主要依据,从而直接影响鸡蛋的商业价值和种用价值,其外在品质和内在品质都是验证鸡蛋好坏的重要指标[9]。蛋黄颜色是蛋黄色泽的一个反映指标,其值越大表示蛋黄颜色越深。在本试验中,发酵豆粕替换40%豆粕使海兰褐蛋鸡第4 周蛋黄颜色有所降低,这与李彬等[9]添加5%湿基豆粕显著降低蛋黄颜色结论相一致,而与吴俊峰等[10]发现饲料中添加发酵豆粕使得蛋黄颜色提高则不同,这可能与此次替换豆粕比例较大有关。哈氏单位可以衡量蛋白的新鲜程度,其数值越大,表示蛋越新鲜。陈庆达[4]等研究表明,日粮中添加7.5%湿性发酵豆粕可以提高哈氏单位,改善蛋品质。而本试验结果显示,用40%发酵豆粕代替普通豆粕,蛋鸡第4周哈氏单位有下降趋势,结果的差异可能与发酵豆粕高剂量使用的影响有关,内在机制影响还需做进一步的研究。
免疫系统的存在是为了免受致病性细菌的入侵和其他有毒有害物质的侵害[11],而动物机体免疫力的强弱可由血清中白细胞介素水平和抗体水平来体现[12]。白细胞介素可介导免疫细胞的活化、增殖和分化以及对炎症反应的调控,以此来保持机体炎症反应的平衡[13-14]。
IL-1β通过参与细胞生命周期活动来介导机体的炎症反应[15],同时还可与TNF-α共同介导其他细胞因子来调节炎症反应[16]。
本试验研究结果显示,用发酵豆粕代替蛋鸡饲粮中40%豆粕显著提高了海兰褐蛋鸡第4 周和第8 周IgA 水平,并且显著降低了第4 周血清ET 水平,同时第4周血清IL-1β有降低趋势。第8周的蛋鸡血清ET含量对照组和试验组差异不显著。肠道菌群与肠道炎症的产生十分密切,益生菌的减少会降低对致病菌的抑制作用,致病菌可通过破坏肠道黏膜,打破肠道稳态,引起炎症反应[17],而陈国营等[18]用枯草芽孢杆菌发酵的豆粕饲喂蛋鸡时,发现其肠道有害菌数量显著下降,有益菌数量则显著上升。由此可得出,发酵豆粕所使用的菌种也起到了至关重要的作用,在目前的研究中,丁酸梭菌有利于维持肠道健康和菌群平衡,还可以缓解肠道损伤,有利于增强动物机体抵抗力[19-20]。乳酸菌同样作为益生菌的一种,不仅可以抑制细菌的附着[21],还可以产生氨基酸等营养物质,可提高动物机体对营养物质的吸收,维护肠道健康[22-23]。这也可能是许多学者在进行发酵豆粕试验时所得出来试验结果不尽相同的原因。许丽惠等[24]在发酵豆粕对黄羽肉鸡血清生化指标的影响结果显示,与对照组相比,试验组的血清蛋白有不同程度提高,而Nie 等[25]和Ruan 等[26]以及Chiang 等[27]在试验中同样也得到了相似的结果。球蛋白是B淋巴细胞所分泌的一种抗体,在体液免疫中发挥着重要作用,球蛋白含量的增加使得机体抵抗力有所提升,而IgA 水平的提高也进一步印证了Cheng 等[28]的研究结果,发酵豆粕的添加应用可提高机体的免疫力。
在本试验条件下,用发酵豆粕代替饲粮中40%豆粕可提高海兰褐蛋鸡合格蛋率和采食量,降低IL-1β因子和ET水平,提高海兰褐蛋鸡IgA水平从而增强了机体免疫力和抵抗力。