气相色谱-三重四极杆串联质谱法测定蔬菜中40 种农药残留

董浩云，贾彩霞，李 建

（常州检验检测标准认证研究院，江苏常州 213000）

近年来，食品安全已经成了人们关注的重要话题。其中，蔬菜因其种类繁多、营养丰富、口感鲜爽而备受追捧，是人们餐桌上必不可少的佳肴。然而，在蔬菜的种植过程中，为了防治病虫害，保证蔬菜的产量和品质，使用农药是一种必要手段[1]。但是，若长期过量使用农药，会导致蔬菜中农药的残留量超标，其对食品的安全性和人们的身体健康会造成严重影响，因此，国家出台了《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》（GB 2763—2021），对蔬菜中各类农药的残留限量进行了规定限制[2]。

目前，常见的农残检测技术包括分光光度法、酶抑制法、气相色谱法、高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、气相色谱-串联质谱法等[3]。气相色谱-串联质谱法的灵敏度较高，离子对选择好，可以满足日常的农残检测。但是，随着进样的增加，样品基质会对进样口和离子源造成污染，影响仪器的灵敏度和准确度。虽然可以通过更换衬管、切割色谱柱、清洗离子源等方法来维护仪器，但这些方法无疑会增加检测成本，因此，前处理过程中需要对样品进行净化[4]。在《食品安全国家标准 植物源性食品中208 种农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱- 质谱联用法》（GB 23200.113—2018）中，选择QuEChERs 前处理法，萃取包中的无水硫酸镁脱水效率高，可提升农药提取率，PSA 能有效消除脂肪、有机酸等杂质，净化效果显著[5]。通过参考不同蔬菜中农药残留检测方法，对黄瓜基质中多种农药分析的线性、定量限、精密度等进行了验证分析。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

QuEChERs 萃取包（安捷伦）：4 g 硫酸镁，1 g 氯化钠，1 g 柠檬酸钠，0.5 g 柠檬酸氢二钠；QuEChERs净化管（安捷伦）：900 mg 硫酸镁，150 mg PSA；坛墨农药混标（100 μg·mL-1）和坛墨外环氧七氯B 内标（100 μg·mL-1）；乙腈（色谱纯，CNW）。

1.2 仪器与设备

GCMS-TQ 8040 NX气相色谱仪-三重四极杆串联质谱仪（Shimadzu 岛津）；AOC 20i Plus 自动进样器（Shimadzu 岛津）；TGL21 台式高速冷冻离心机（长沙英泰仪器有限公司）；KQ-400KDE 数控超声波清洗仪（昆山超声仪器有限公司）；MS-3 涡旋振荡器（德国IKA）。

1.3 实验方法

1.3.1 标准溶液配制

（1）内标使用液。准确移取外环氧七氯B 内标溶液（100 μg·mL-1），乙腈稀释定容为质量浓度10 mg·L-1的内标使用液。

（2）标准溶液。准确移取农药混标（100 μg·mL-1）1 mL，用乙腈稀释配制成质量浓度为10.0 mg·L-1的混合标准中间液备用，然后分别吸取适量10.0 mg·L-1的混合标准中间液，用空白基质逐级稀释配制成质量浓度为0.005 mg·L-1、0.010 mg·L-1、0.020 mg·L-1、0.050 mg·L-1、0.100 mg·L-1、0.200 mg·L-1、0.500 mg·L-1的基质标准工作溶液，在进样小瓶中各加入20 μL 内标使用液，分别加入1 mL 上述各浓度的基质标准工作溶液，涡旋混匀后待上机测定。

1.3.2 样品前处理

称取10.00 g 样品于50 mL 塑料离心管中，加入10 mL 乙腈、QuEChERs 萃取盐包（内含4 g 硫酸镁、1 g 氯化钠、1 g 柠檬酸钠、0.5 g 柠檬酸氢二钠）及1 颗陶瓷均质子，振荡1 min，6 000 r·min-1离心5 min。吸取5 mL 上清液至QuEChERs 净化管（内含900 mg 硫酸镁及150 mg PSA）中，涡旋1 min，6 000 r·min-1离心10 min，上清液过0.22 μm 有机滤膜后，吸取1 mL 于2 mL 进样小瓶中，加入20 μL的内标使用液，涡旋混匀，待上机测定。

1.3.3 仪器条件

（1）气相色谱条件。色谱柱：Agilent DB-5ms（30 m×0.25 mm，0.25 µm）；载气：高纯氦气；载气流速：1 mL·min-1；进样方式：不分流进样；进样口温度：280 ℃；进样量：1 μL；程序升温：初始柱温80 ℃，保持1 min，以40 ℃·min-1升温至120 ℃，再以6 ℃·min-1升温到280 ℃，再以12 ℃·min-1升温到300℃，保持3 min。

（2）质谱条件。电子轰击源：80 eV；离子源温度：280 ℃；传输线温度：280 ℃；溶剂延迟：3 min；多反应监测模式，参考《食品安全国家标准 植物源性食品中208 种农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱-质谱联用法》（GB 23200.113—2018），每种化合物选择一对定性离子对和一对定量离子对，每组所需要检测离子对按出峰顺序，分时段分别检测。

2 结果与分析

2.1 方法优化

乙腈是强极性的溶剂，穿透性强，能有效提取样品中的农残，且不会像丙酮等试剂溶解过多的杂质，因此本方法选择乙腈作为最终溶剂。同时，省略了氮吹后乙酸乙酯复溶的过程，可避免氮吹和复溶过程中造成的农残损失，也使得前处理更简单快速。通过分析40 种农残的出峰时间，以6 ℃·min-1升温到280 ℃可保证一些菊酯类农残的分离度，而300 ℃保持3 min 可以对检测器高温烘烤，保证一些高沸点杂质快速流出色谱柱。此升温程序分离效果理想，比GB 23200.113—2018 中缩短10 min 的分析时间。

2.2 标准曲线与定量限

按1.3.1 配制的多种农药混合基质标准曲线上机检测，最终结果表明，40 种农药残留在0.005 ～0.500 mg·L-1线性关系良好，相关系数R2在0.990 0 ～0.999 9，同时，以S/N≥10 确定方法定量限均低于GB 23200.113—2018 中10 μg·kg-1的要求，具备检测可行性。为检测中筛选方便，所以统一将定量限定为10 μg·kg-1。详细结果见表1。

表1 40 种农药的线性方程、相关系数、定量限

2.3 精密度和回收率

本方法用内标法定量，以黄瓜为空白基质进行加标回收实验，添加水平分别为0.01 mg·kg-1、0.02 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1，每 个 质 量 分 数 水 平 均以相同方法处理6 份，以其相对标准偏差（Relative Standard Deviation，RSD）验证方法精密度，以平均回收率验证方法准确度，回收率见表2。3 个水平加标回收率范围在60%～130%，精密度RSD 均小于15%，添加水平较低时，农残易受基质影响，回收率跟精密度也会相对偏高，需单独优化方法[2]。

表2 40 种农药残留加标回收率及精密度表

3 结论

本文采用QuEChERs 前处理法，结合GC-MS/MS 对黄瓜基质中40 种农药残留进行分析，优化了国标中现有方法和仪器条件，从线性、回收率、精密度等方面展开验证，证实了本方法在日常农残检测中的可行性。该方法具有前处理简单快速，分析准确度高、重复性好等优点，通过PSA 净化样品，可减少仪器污染，节约仪器维护成本。但是，各种农药性质存在差异，仍需在实际检测过程中不断调整优化。