EGFR、P53、Ki-67在结直肠癌患者癌组织中的表达及与临床病理学特征、预后的相关性分析

栾焕玲 徐 强 杜晓楠

山东省乳山市中医院 264500

结直肠癌是源于结直肠黏膜的恶性肿瘤,早期病情隐匿,随着病情发展出现大便习惯改变、腹痛、便血等症状,未引起患者重视,诊断时往往为晚期,失去手术治疗机会[1]。并且该病病因尚不明确,临床治疗得不到根本控制,故寻找结直肠癌的标记物,对结直肠癌患者预后具有重要的意义[2]。表皮生长因子受体(EGFR)能够诱导肿瘤细胞增殖、分化和侵袭;突变型P53能够抑制肿瘤细胞凋亡;Ki-67是一种核基质,能够促进肿瘤细胞增殖,增强其侵袭性,三者与结直肠癌的发生发展密切相关[3-4]。鉴于此,本文为了探究EGFR、P53、Ki-67在结直肠癌患者癌组织中的表达,分析其与临床病理学特征、预后的相关性,对我院收治的79例结直肠癌患者进行研究,现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2018年11月—2021年11月我院收治的79例结直肠癌患者。其中男45例,女34例;年龄51～68(59.51±8.03)岁;肿瘤直径1.8～4.5(3.42±1.03)cm;肿瘤部位:结肠、直肠分别为41、38例;病理类型:管状腺癌、乳头状腺癌、黏液细胞癌分别为34、33、12例;分化程度:低/中/高分化分别为14、58、7例;TNM分期:Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ期分别为7、28、38、6例;浸润深度:T1/T2/T3/T4分别为5、28、40、6例。纳入标准:依据《中国结直肠肿瘤早诊筛查策略专家共识》并经病理学检查确诊者[5];预计生存期不低于6个月者;知情本次研究者。排除标准:意识障碍者;自身免疫性疾病者;1周内接受化疗或放疗者;伴有影响本次研究检测指标疾病者。本次研究获得我院伦理委员会的认证。

1.2 试剂及药品 兔多克隆抗体EGFR、鼠抗人单克隆抗体P53、Ki-67及免疫组染色(SP)试剂盒、二氨基联苯胺(DBA)显色试剂盒均采购于福州迈新生物技术开发有限公司。

1.3 方法 结直肠癌切除术后取结直肠癌患者癌组织及癌旁组织,依次经甲醛固定、石蜡包埋切片、SP染色处理。阴性对照为自制磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗,阳性对照为阳性组织切片,按照购买试剂盒操作说明操作。结直肠癌患者癌组织及癌旁组织标本EGFR、P53、Ki-67的表达情况:EGFR阳性细胞依据组织标本中细胞膜呈棕色判定;P53、Ki-67阳性细胞均依据细胞核出现棕黄色颗粒判定。在400倍镜下随机选取500个细胞中,EGFR阳性细胞≥25%判定为EGFR阳性;P53阳性细胞≥10%判定为P53阳性;Ki-67阳性细胞≥10%判定为Ki-67阳性,反之则阴性。研究EGFR、P53、Ki-67的表达状况与临床病理参数(包括性别、年龄、临床分期、肿瘤直径、肿瘤部位、病理类型、分化程度、TNM分期、浸润深度)的相关性。术后随访12个月后,统计结直肠癌患者术后生存率,分析末次检查结直肠组织标本EGFR、P53、Ki-67表达情况与预后的关系。

2 结果

2.1 结直肠癌患者癌组织及相对应的癌旁组织标本EGFR、P53、Ki-67的表达情况比较 相比结直肠癌患者癌旁组织标本,结直肠癌患者癌组织EGFR、P53、Ki-67阳性率明显更高(P<0.05)。详见表1。

表1 结直肠癌患者癌组织及相对应的癌旁组织标本EGFR、P53、Ki-67的表达情况比较[n(%)]

2.2 结直肠癌患者癌组织中EGFR、P53、Ki-67的表达与临床病理参数的相关性分析 结直肠癌患者性别、年龄、肿瘤部位、病理类型与结直肠癌组织中EGFR、P53、Ki-67的阳性表达无相关性(P>0.05)。结直肠癌患者肿瘤直径、分化程度、TNM分期、浸润深度与结直肠癌组织中EGFR、P53、Ki-67的阳性表达呈正相关(r均>0,P<0.05)。详见表2。

表2 结直肠癌患者癌组织中EGFR、P53、Ki-67的表达与临床病理参数的相关性分析[n(%)]

2.3 结直肠癌患者癌组织中EGFR、P53、Ki-67的表达与预后的相关性分析 随访12个月,结直肠癌患者生存率为77.22%(61/79),其中EGFR、P53、Ki-67阳性表达患者生存率分别为39.29%(11/28)、69.09%(38/55)、74.29%(52/70),比阴性表达患者的98.04%(50/51)、95.83%(23/24)、100.00%(9/9)明显更低(P<0.05)。

3 讨论

近年来,随着我国人民饮食结构的改变,结直肠癌发病率逐年增加[6]。并且到目前为止该病发病原因、早期诊断标志物、改善患者预后的标志尚不清楚,临床上虽然常用手术、放疗、化疗、靶向治疗该病,但是5年生存率约为60%,生存率仍然不高[7-8]。故研究结直肠癌的病因,寻找新的特异性标志物,进一步改善结直肠癌患者预后,延长生存周期成为新的研究热点[9]。

EGFR是上皮生长因子细胞增殖和信号传导的受体,能够促进细胞的生长、增殖和分化;P53在肿瘤细胞中表现为突变型,空间构象发生改变,失去对细胞生长、凋亡和DNA 修复的调控,促进细胞增殖;Ki-67是一种增殖细胞的相关抗原,其功能与有丝分裂密切相关,在细胞增殖中是不可缺少的[10]。并且近年来临床研究表明[11],三者与结直肠癌的发生、发展及患者预后密切相关。本次研究发现,相比结直肠癌患者癌旁组织标本,结直肠癌患者癌组织EGFR、P53、Ki-67阳性率明显更高。分析原因为EGFR贯穿细胞膜,高表达引起下游信号传导的增强,持续自活化,进而破坏受体下调机制,并通过自分泌形式激活EGFR促进细胞增殖,使得结直肠癌细胞增殖;P53蛋白是一种肿瘤促进因子,可以消除正常P53的功能,进而使得结直肠癌细胞增殖、分化;Ki-67在肿瘤细胞周期S、G1、G2、M期均有表达,与结直肠癌肿瘤的分化程度、浸润、转移及预后密切相关,故三者在结直肠癌组织中出现高表达。

并且本次研究发现,结直肠癌患者肿瘤直径、分化程度、TNM分期、浸润深度与其癌患者癌组织中EGFR、P53、Ki-67的阳性表达呈正相关。分析原因为EGFR、P53、Ki-67的阳性表达,促进结直肠癌细胞增殖、分化,使得结直肠癌患者肿瘤直径变大、分化程度增高,进而使得TNM分期更严重。另外,肿瘤直径增大,分化程度增高,会增加结直肠癌浸润深度。

同时本次研究发现,随访12个月,结直肠癌患者生存率为77.22%,其中EGFR、P53、Ki-67阳性表达患者生存率分别为39.29%、69.09%、74.29%,比阴性表达患者的98.04%、95.83%、100.00%明显更低。分析原因为EGFR、P53、Ki-67阳性表达,促进结直肠癌细胞增殖、分化、浸润、转移,使得结直肠癌患者肿瘤直径、分化程度、TNM分期、浸润深度增加,预后越差,缩短患者生存周期。这与焦俊霞等[12]研究的检测EGFR、P53和Ki-67在结直肠癌中的表达有利于对肿瘤恶性程度和预后的评估相似。

综上所述,EGFR、P53、Ki-67在结直肠癌患者癌组织中呈现高表达,结直肠癌患者癌组织中EGFR、P53、Ki-67的阳性表达与患者肿瘤直径、分化程度、TNM分期、浸润深度呈正相关,且与患者术后生存率有密切的关系。