福建泉州石香薷萃取物的GC-MS分析

杨晓烨 李赞锦 张鸿燕 赖晨楠 苟文韬 洪铃冰 叶明星 郭琳娟 张伟云，*

1.厦门医学院药学系/厦门市中药生物工程重点实验室，福建 厦门 361023；2.福建医科大学药学院，福建 福州 350122

石香薷(MoslachinensisMaxim.)系唇形科 (Labiatae)荠宁属一年生草本植物，别名青香薷、土香薷、野香薷、还魂草、七星剑等[1]。石香薷作为我国特有中药材，性味温辛，归肺、胃经，常用于治疗中暑发热、感冒恶寒、头痛无汗、腹痛吐泻等症[2]。现代研究[3]表明，石香薷中含有挥发油类、黄酮苷类及酚酸类等多种化学成分，挥发油是石香薷发挥药理活性的主要成分，具有抗菌抑菌[4]、抗氧化[5]、抗流感病毒[6]等生理活性。

我国石香薷资源分布广泛，主产于广西、广东、湖南、湖北、浙江、江西、四川、福建等地，具有广阔的应用前景[7]。研究[8]表明，产地是影响石香薷药材质量的重要因素之一，可能与其土壤、气候有关。目前有较多针对湖南、江西及浙江等产地的石香薷化学成分的研究报道，对福建泉州产石香薷的研究报道较少。本研究通过超临界流体萃取法对福建泉州产石香薷中挥发油等化学成分进行了提取，运用薄层色谱法和气质联用仪对其化学成分进行分析，分析比对不同产地石香薷成分及其含量之间存在的差异，以期为研究石香薷相关药效物质基础提供文献参考，也为今后石香薷的开发研究利用打下基础。

1 材料与仪器

1.1 药品与试剂 石香薷产于福建泉州，经厦门大学药学院陈全成副教授鉴定为石香薷MolsachinensisMaxim.的干燥地上部分。2，4-二硝基苯肼、1%香草醛-浓硫酸试剂、0.05%溴酚蓝试剂，均为分析级，购自海晟泰化工(厦门)有限公司；甲醇为色谱级，购自上海安谱实验科技股份有限公司。

1.2 仪器 QEY-300 g高速粉碎机，浙江屹立工贸有限公司生产；六号(100目)标准药筛，浙江省绍兴上虞华丰五金仪器有限公司生产；JCS-W5003电子天平，哈尔滨众汇衡器有限公司生产；硅胶薄层板，海晟泰化工(厦门)有限公司生产；气质联用仪，型号：7890B/7000，美国安捷伦科技有限公司生产；超临界流体萃取仪，型号：*LC-2000，日本分光株式会社生产。

2 方法与结果

2.1 方法

2.1.1 福建泉州石香薷SFE提取 参照参考文献中的方法[9-11]，将福建泉州产石香薷粉碎，过六号标准药筛，称取10.00 g石香薷用于超临界流体萃取，萃取温度45 ℃，压力20 MPa，CO2流量3 mL/min，90 min后得到石香薷萃取物。吸取少量黄褐色的萃取物置于未使用且干净的EP管中，加入适量色谱甲醇溶解，经0.45 μm微孔滤膜过滤，作为石香薷萃取物GC-MS分析用样品。

2.1.2 TLC薄层检测条件 取福建泉州石香薷萃取物适量，分别点样于硅胶G-CMC-Na薄层板的三处，分别用2，4-二硝基苯肼，1%香草醛-浓硫酸试剂和0.05%溴酚蓝试剂进行显色，然后分别观察颜色变化。

2.1.3 GC-MS条件 参照参考文献中的方法[10，12-15]，气相色谱的色谱柱为HP-5MS 5%苯基甲基硅氧烷毛细管柱(30 m×250 μm×0.25 μm)，设置初始柱温为50 ℃，保持5 min，程序升温5 ℃/min，260 ℃保持5 min。柱子参数：柱内流量为1 mL/min，氦气作为载气，进样量为1 μL，流速1 mL/min，无分流进样，溶剂延迟5 min。质谱条件：选用电子轰击离子源，电子轰击能量70 eV，离子源温度230 ℃，四极杆温度150 ℃，质量扫描范围为40～550 m/z。

2.2 结果

2.2.1 SFE提取的石香薷萃取物状态及提取率 SFE提取所得萃取物呈黄褐色，液体呈浓稠状，提取率为2.85%。

2.2.2 TLC显色结果 如图1所示，石香薷SFE萃取物分别在薄层板点样三处，经0.05%溴酚蓝试剂显色，呈现黄色斑点，提示可能含有中含有酸性化合物；经2，4-二硝基苯肼试剂显色，呈现黄色斑点，提示可能含有醛或酮类化合物；经1%香草醛-浓硫酸试剂显色，呈现紫色斑点，提示可能含有油脂类化合物。

图1 超临界流体萃取法提取福建泉州-产石香薷的TLC显色图

2.2.3 超临界萃取及其GC-MS成分 在上述实验条件的操作分析中，采用超临界流体萃取法得到萃取物并进行GC-MS分析，得到福建泉州产石香薷的GC-MS总离子流图。谱图如图2所示。

图2 超临界流体萃取法提取福建泉州产石香薷的GC-MS总离子流图

使用Agilent Mass Hunter Qualitative Analysis B.06.00(AgtQual)分析软件分析福建泉州产石香薷萃取物的总离子流图(TIC)，通过NIST MS谱库进行检索比对，共发现有198个色谱峰，初步确定了112个化合物。具体见表1。

表1 SFE提取所得福建泉州产石香薷化学成分表

表1(续)

表1(续)

表1(续)

分析结果表明，福建泉州产石香薷所得化合物以烯烃、醇、酚、有机酸、酯类化合物为主，使用AgtQual软件通过峰面积归一法测定萃取物中化合物相对含量，总峰面积为140558316.30，所得鉴定峰峰面积合计为133901135.89，所得鉴定峰峰面积占总峰面积的95.26%，其中6个化合物占比>1%，从高到低依次为百里香酚(66.23%)；乙酸瑞香[草]酯(5.68%)；α-石竹烯(3.77%)；叶绿醇(3.57%)；反式角鲨烯(2.31%)；顺-8，11，14-二十碳三烯酸(1.30%)。

3 结果与讨论

经过与文献[16]对比分析，湖南邵东产石香薷采用SFE得到萃取物，萃取条件为萃取压力为20 MPa，萃取温度为45℃，与本实验的萃取条件相同，因此比较两产地超临界萃取物的化学成分差异，其所得萃取物的化学成分含量由高到低依次是百里香酚、香薷酮和邻异丙基甲苯。两种产地的石香薷萃取物中含量最高的化学成分均为百里香酚。两种产地的石香薷所得化合物有部分相同，仅有6种化合物为共有成分，具体为百里香酚、萜品烯、β-石竹烯、α-石竹烯、邻异丙基甲苯和松油烯。现代相关研究[17]表明，百里香酚是石香薷的主要活性成分之一，又称麝香草酚，对常见食源性真菌、金黄色葡萄球菌、黄曲霉孢子等均有抑制作用，而上述两个产地石香薷萃取物中主要活性成分含量的不同，可能对其药理活性产生影响，可能是由采摘时间、储存时间不同所致，尚且需要对应实验验证和深入研究。

本实验通过超临界流体萃取法萃取福建泉州产石香薷中挥发油等多种化学成分并进行了GC-MS成分分析，丰富了其化学成分研究，为今后的石香薷药用资源的开发利用提供一定的理论依据。