东海县小规模蛋鸡养殖场高致病性禽流感抗体检测与分析

闫颖颖，陈士星，胡传利，李艳阳，陈新华

（1.江苏省东海县畜牧兽医站，江苏 东海 222300；2.江苏省东海县石榴街道农村经济和农业技术服务中心，江苏 东海）

禽流感是严重危害养禽业发展的烈性传染病，尤其是高致病性禽流感的发病率和致死率均较高，一旦发生，对养殖业造成巨大的危害和经济损失，被世界动物卫生组织认定为A 类动物疫病，我国也将其列为一类动物疫病[1]。目前，我国对高致病性禽流感采取强制免疫的方式进行防控。东海县是传统的蛋鸡养殖县，蛋鸡养殖多为存栏1～3 万羽的小规模养殖场。为全面评估东海县小规模蛋鸡养殖场高致病性禽流感免疫效果，本研究收集了47 个小规模蛋鸡养殖场在不同时间的血清样本共计1 460 份，并进行了检测分析，以期为本地区更好地防控高致病性禽流感提供理论依据和参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清采集 血清样本来源辖区内的小规模蛋鸡养殖场，免疫注射的高致病性禽流感疫苗均为政府采购疫苗（青岛易邦、吉林冠界、哈药），分别于于4 月、8 月、12 月采集血清样本1 460 份，见表1。

表1 采样情况

1.1.2 器材 采血器、离心机、2 mL 离心管、微量移液器、96 孔V 型微量凝集试验板、微量振荡器等。

1.1.3 试剂 高致病性禽流感H5N6 Re-13、H5N8 Re-14、H7N9 Re-4 血凝抑制试验抗原及阴阳性血清。

1.2 方法

抗体检测参照《高致病性禽流感诊断技术》（GB/T 18936-2020），采用血凝与血凝抑制试验（HA/HI）对血清样品进行禽流感抗体检测。抗体效价≥24（4log2）判定为免疫合格，标准差与平均值的比值（变异系数）可反映出抗体效价的离散度。

2 结果

2.1 不同时间高致病性禽流感抗体检测合格率

东海县小规模蛋鸡养殖场不同时间高致病性禽流感抗体检测合格率见表2。

表2 高致病性禽流感不同时间检测合格率

由表2 可知，东海县小规模蛋鸡场4 月检测高致病性禽流感487 份，H5N6 Re-13 抗体合格数为452 份，抗体合格率为92.81%，H5N8 Re-14抗体合格数为446 份，抗体合格率为91.58%，H7N9 Re-4 抗体合格数为441 份，抗体合格率为90.55%；8 月检测462 份，H5N6 Re-13 抗体合格数为395 份，抗体合格率为85.50%，H5N8 Re-14 抗体合格数为 382 份，抗体合格率为82.68%，H7N9 Re-4 抗体合格数为394 份，抗体合格率为85.28%；12 月检测511 份，H5N6 Re-13 抗体合格数为 497 份，抗体合格率为97.26%，H5N8 Re-14 抗体合格数为505 份，抗体合格率为98.93%，H7N9 Re-4 抗体合格数为495 份，抗体合格率为96.87%。

由图1 可知，12 月高致病性禽流感免疫抗体合格率最高，平均97.65%，8 月高致病性禽流感免疫抗体合格率最低，平均84.49%。

图1 不同时间段禽流感抗体检测结果

2.2 高致病性禽流感抗体滴度

东海县小规模蛋鸡养殖场高致病性禽流感抗体滴度见表3。

表3 高致病性禽流感检测抗体滴度

由表3 可知，东海县小规模蛋鸡养殖场高致病性禽流感抗体合格率均达到了农业部规定（≥70%）的标准，但是整个群体的抗体滴度不整齐，存在较大差异。12 月的样品抗体滴度最高，H5N6 Re-13、H5N8 Re-14、H7N9 Re-4 的抗体滴度平均值达到了8.23、8.46、8.35。从全年的情况来看，8 月的抗体滴度平均值最低，与12 月的抗体滴度平均值相比，两者差异显著（P＜0.01）。

2.3 不同厂家高致病性禽流感抗体检测合格率

东海县小规模蛋鸡养殖场不同厂家高致病性禽流感抗体检测合格率见表4。

表4 不同厂家高致病性禽流感抗体检测合格率

由表4 可知，不同疫苗厂家高致病性禽流感抗体合格率均超过农业部规定的标准，差异不明显（P＞0.05）。

3 讨论

高致病性禽流感是影响养禽业健康发展的一个重要因素，并且对公共卫生安全产生很大的威胁，强制免疫工作是避免和减少疫情发生的关键[2]。动物免疫抗体监测是疫病监测、免疫质量评估、疫情预警、疫病控制等工作的重中之重[3]。

从检测结果来看，东海县小规模蛋鸡养殖场4 月、8 月和12 月高致病性禽流感的免疫抗体合格率都比较高，免疫应答效果显著，群体合格率超过国家规定标准，对防控高致病性禽流感提供有效的免疫保护作用[4]。其中8 月高致病性禽流感免疫抗体合格率较低为84.49%，这可能是由于8 月的时候天气炎热，养殖场的免疫人员将疫苗从冰箱里拿出后直接免疫，导致鸡体免疫应答效果不好而导致免疫失败，建议在夏季进行疫苗免疫接种应选择早晚气温较低时进行。12 月抗体合格率较高，这可能是由于下半年天气寒冷，是禽流感的高发期，养殖户比较重视免疫接种工作。

小规模蛋鸡养殖场的饲养管理、免疫接种工作主要由养殖场主自己进行，很少请专业的防疫人员和技术人员，因此，受免疫注射规范性、接种剂量以及鸡体的个体差异，鸡群高致病禽流感抗体滴度高低不齐，群体免疫抗体状况不均匀。

从对不同厂家的样品检测结果来看，三个厂家的高致病性禽流感免疫抗体合格率没有明显差异，表明强制免疫政府采购疫苗免疫抗体均能达到农业部规定的标准，免疫效果较好，可以防控禽流感的侵袭。

4 结论

东海县小规模蛋鸡养殖场高致病性禽流感免疫抗体合格率已经达到国家标准，同时，应对小规模养殖场户开展技术培训和指导，规范其免疫操作。定期开展采样检测活动，开展高致病性禽流感免疫抗体效价评估，提高防疫密度和防疫质量，筑牢免疫屏障，有效控制禽流感疫情的发生[5]。