复合益生菌配合功能性寡糖在早期断奶犊牛上的应用效果

■ 梁金逢 贾银海 熊敏芬 周晓情 朱 文 黄华强 唐明娟 肖正中

（广西农业职业技术大学，广西南宁 530007）

随着规模化养殖场的发展，早期断奶已成为提高牧场养殖经济效益的重要手段之一。断奶是犊牛面临的最大应激，会引起犊牛厌食、机体免疫力下降、消化功能混乱，严重时会引起腹泻，严重影响犊牛的生长发育和健康，因此缓解断奶应激成为犊牛养殖过程中亟待解决的问题。犊牛早期补饲含益生菌可竞争性抑制致病微生物的生长，减少腹泻等疾病的发生；此外复合益生菌产生的大量的菌体蛋白和多肽活性物质，能够促进犊牛的生长发育[1]。功能性寡糖包括果寡糖、壳寡糖、甘露寡糖、低聚乳糖等，在动物体内不被消化，但到达消化道内时可作为有益微生物的营养物质促进有益微生物的快速繁殖，同时不被病原微生物所利用，抑制病原菌的生长[2]。犊牛饲养提倡早期饲喂开食料，有助于刺激消化系统的发育，对犊牛的生长发育至关重要的作用[3]。

试验在开食料中添加两种不同的功能性寡糖配合复合益生菌饲喂娟西杂犊牛，研究复合益生菌和功能性寡糖对早期断奶犊牛生长性能、免疫功能、粪便评分及应激指标的影响。为犊牛的健康养殖模式和提高养殖经济效益做一些基础性研究工作。

1 材料与方法

1.1 试验材料

功能性寡糖甘露寡糖、果寡糖购自安琪酵母股份有限公司；复合益生菌剂购自山东宝来利来公司。用于检测血液中免疫指标免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、干扰素（IFN-γ）和白细胞介素-1（IL-1），血液中应激指标超敏C 蛋白、结合珠蛋白和皮质醇的试剂盒均由Sigama 公司提供。血液中免疫指标和应激指标通过酶联免疫吸附试验（ELISA）进行测定。

试验动物选择出生日龄相近、健康的娟西杂犊牛30头。

1.2 饲喂试验

30头娟西杂犊牛随机分为试验组和对照组，每组15头。对照组饲喂的饲料为正常开食料，开食料的组成及营养水平见表1。试验组犊牛每天除饲喂正常的开食料外，另加2 g/（头·d）的甘露寡糖、3 g/（头·d）的果寡糖及15 g/（头·d）的复合益生菌。试验期为67 d，前7 d 为预试期，后60 d 为正试期。复合益生菌由枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸杆菌3种组成。

表1 开食料组成及营养水平

采用传统饲养管理模式，犊牛分娩后2 h 内喂优质初乳，犊牛自由饮水，7 日龄开始补充干草，开食料自由采食。开食料日饲喂量为0.1 kg/头，随后开始逐渐增加，断奶前一周为0.8 kg/d，完全断奶为1 kg/d。犊牛至60 日龄断奶，饲喂的日粮由精饲料和苜蓿干草组成。

1.3 检测指标

试验期在犊牛第30 日龄和第67 日龄时进行称重。试验期间每日观察犊牛排粪情况，粪便评分标准为：粪便的流动性1～4 分别对应为正常、柔软、流淌、水状；粪便稠度1～5 分别对应为正常、泡沫、黏液成形、成形较硬、便秘；排泄物气味1～4 分别对应为正常、轻微厌恶、高度厌恶。试验期间收集试验组和对照组犊牛的粪便和饲料，用内源指示剂法测定牛的饲料表观消化率。

在断奶前2 d 和断奶后4 d 采集各组牛的血样，血样离心后收集上清。用ELASA 酶联免疫法检测血液中IgA、IgG、IFN-γ、IL-1、超敏C 蛋白、结合珠蛋白和皮质醇的含量。

1.4 数据的分析

运用 软件SPSS 17 对试验数据进行差异显著分析。数据采用“平均值±标准误”表示。P＜0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 复合益生菌和功能性寡糖对早期断奶犊牛生长性能的影响

由表2 可知，犊牛67 日龄时，试验组平均体重显著高于对照组（P＜0.05）；且试验组平均日增重显著高于对照组（P＜0.05）。

表2 功能性寡糖和复合益生菌对犊牛体重增长的影响

2.2 复合益生菌和功能性寡糖对早期断奶犊牛养分表观消化率的影响

由表3 可知，试验组粗蛋白（CP）和粗脂肪（EE）的表观消化率要显著高于对照组（P＜0.05）；总干物质（DM）和粗纤维（CF）的表观消化率试验组与对照组之间无显著差异（P＞0.05）。

表3 试验犊牛的表观养分消化率（%）

2.3 复合益生菌和功能性寡糖对早期断奶犊牛粪便评分的影响

由表4 可知，饲喂开食料初期犊牛均有腹泻现象，粪便得分较高，随着犊牛对开食料的适应，粪便得分逐渐降低。到了60 日龄犊牛断奶，断奶后犊牛出现了断奶应激，粪便得分又逐渐升高，随后又下降。整个试验期试验组粪便得分一直低于对照组，且在42、56日龄和70日龄时试验组犊牛的粪便得分显著低于对照组（P＜0.05）。

表4 试验犊牛粪便评分结果（分）

2.4 复合益生菌和功能性寡糖对早期断奶犊牛免疫功能的影响

由表5 可知，试验组犊牛血清中的IgG 含量显著高于对照组（P＜0.05）；试验组血清中IL-1含量显著低于对照组（P＜0.05）。断奶前后比较发现，试验组血清中IL-1没有显著差异（P＞0.05）；而对照组血清中IL-1与断奶前相比，断奶后4 d 的对照组血清中IL-1 水平显著升高（P＜0.05）。其他指标试验组与对照组无显著差异（P＞0.05）。

表5 试验犊牛的免疫功能

2.5 复合益生菌和功能性寡糖对犊牛断奶应激的影响

由表6 可知，断奶前后比较发现，试验组血清中超敏C 蛋白含量断奶后显著升高（P＜0.05），但是结合珠蛋白含量和皮质醇含量没有显著变化（P＞0.05）；对照组血清中超敏C 蛋白、结合珠蛋白和皮质醇水平白断奶后均显著升高（P＜0.05）。此外断奶后4 d，试验组的皮质醇显著低于对照组（P＜0.05）。

表6 试验犊牛断奶应激指标

3 讨论

益生菌如枯草孢杆菌、酵母菌、乳杆菌等已被报道证实在促生长、提高营养物质消化率、减少消化系统疾病等方面具有很好的效果[4]。本试验饲喂功能性寡糖和复合益生菌犊牛的平均日增重显著性高于对照组，说明日粮添加功能性寡糖和复合益生菌改善了犊牛的生长性能。分析这可能与饲喂功能性寡糖和复合益生菌犊牛具有较高的粗蛋白和粗脂肪的表观消化率和较低的腹泻发生率有关。 本试验饲喂功能性寡糖和复合益生菌，试验组粗蛋白和粗脂肪的表观消化率要显著高于对照组，说明寡糖和益生菌提高动物对营养物质的消化吸收。推测益生菌利用功能性寡糖进行繁殖生长，从而产生的一系列消化酶能将大分子物质转化为易消化物质。

犊牛由于自身免疫力较弱，饮食上的变化、环境的刺激，极易造成犊牛腹泻的发生。本试验中，试验组粪便得分一直低于对照组，且在42、56日龄和70日龄时候试验组犊牛的粪便得分显著低于对照组的犊牛。这可能是因为益生菌在犊牛肠道内的生长和定植，可通过空间和营养的竞争抑制大肠杆菌等致病菌的繁殖，进而降低犊牛腹泻率。功能性寡糖作为营养物质，可促进有益菌生长，同时抑制致病菌的繁殖，维持体内环境稳定，降低犊牛的粪便评分[5]。此外机体血液IgG 和犊牛血液 C 反应蛋白可协助机体发挥免疫增强作用，提高机体对抗病菌的能力，降低犊牛腹泻率。

免疫球蛋白在幼龄动物断奶后起到增强免疫应答能力的重要作用。IgG 是主要免疫球蛋白之一，在体液免疫应答发挥主要作用。IL-1是由巨噬细胞分泌的一种淋巴细胞刺激因子，可以诱导强大的炎症反应[6]。饲喂功能性寡糖和复合益生菌后犊牛血清中的IgG含量有了显著的提高。这说明添加功能性寡糖和复合益生菌能够提高免疫因子含量。断奶前2 d，试验组血清中IL-1 显著低于对照组。这可能是因为断奶前2 d，由于对照组犊牛的免疫力低，受到病菌的感染出现可炎症反应，这个结果与粪便的结果相一致，对照组犊牛的粪便得分在56 日龄粪便评分升高， 犊牛此时出现轻微的腹泻。

皮质醇和急性期蛋白如超敏C 蛋白和结合珠蛋白等常被作为犊牛产生断奶应激的重要参考指标。断奶应激通常会引起血浆中皮质醇水平的升高，急性期蛋白分泌量的增加。研究表明，血液急性期蛋白含量在断奶后第1 天达到高峰值，第7 天才恢复到断奶前水平[7]。本研究试验组断奶后4 d 血清中超敏C 蛋白显著升高，但是结合珠蛋白和皮质醇没有显著变化。对照组血清中超敏C 蛋白、结合珠蛋白和皮质醇水平都显著升高。分析可能是因为断奶后4 d试验组中的结合珠蛋白和皮质醇水平恢复到断奶前水平，但对照组的超敏C 蛋白、结合珠蛋白和皮质醇都没有恢复到断奶前水平。试验结果表明饲喂功能性寡糖和复合益生菌具有很好的缓解断奶应激效果。

上述临床试验研究表明，在犊牛开食料中添加功能性寡糖和复合益生菌，能够提高早期断奶犊牛的平均日增重，提高机体消化吸收能力，降低犊牛腹泻发生概率，促进犊牛健康生长。此外开食料中添加功能性寡糖和复合益生菌，还可以提高早期犊牛断奶犊牛的机体免疫功能，缓解犊牛的断奶应激。