木醋鱼蛋白对平菇菌丝生长及产量影响研究

樊玉萍 杨凤仙 张 姣 杜 丹 林静雅 程雪绒

（咸阳市农业科学研究院，陕西 咸阳 712034）

平菇Pleurotus ostreatus，又名北风菌、蚝菌、杂蘑，隶属担子菌亚门、伞菌纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属[1-2]。平菇不仅味道鲜美，而且蛋白质、氨基酸、维生素含量丰富，特别是人体必需的八种氨基酸含量高于其他动植物产品[3-5]；还有一定的保健作用，可降低胆固醇、降血压，增强机体免疫力[6-8]。平菇广泛分布于我国河北、吉林、辽宁、山西、湖南、四川、云南等省，是栽培最多的四种食用菌之一[9-10]。

“中医农业”技术是把中草药具备的某些性能以水平传递的方式，进入农作物的生命代谢过程，是一种高效的生态农业绿色种植模式[11]。木醋液是由木材干馏后导出的蒸汽，经冷凝分离后而得，富含氨基酸、黄酮类、多酚类等活性物质，为纯天然物质。由木醋液添加鱼蛋白、多肽酶、中草药成分制成木醋鱼蛋白，能有效促进植物的生长。

为探索木醋鱼蛋白在食用菌生产中的效果，笔者以平菇615 菌株为材料，考察不同体积分数木醋鱼蛋白对平菇菌丝生长及产量的影响，以期为“中医农业”技术（添加木醋鱼蛋白）在平菇生产中应用提供数据支撑。

1 材料与方法

1.1 试验材料

（1）供试菌株：平菇615，引自江苏天达食用菌研究所，母种保存于咸阳市农业科学研究院食用菌中心。

（2）培养基

母种培养基：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂粉14 g，磷酸二氢钾1.0 g，硫酸镁（MgSO4·7H2O）0.5 g，水1 000 mL，pH 7；原种培养基：小麦88%，麸皮10%，石灰1%，石膏1%；栽培种培养基：棉籽壳90%，麸皮8%，石灰2%。

栽培料配方：棉籽壳40%，木屑30%，麦草粉28%，石灰2%。

（3）木醋鱼蛋白：购自陕西省中农厚朴农业科技有限公司。将木醋鱼蛋白原液用无菌水分别稀释到体积分数1%、2%、3%、4%和5%备用。

1.2 试验方法

1.2.1 平板培养基添加木醋鱼蛋白培养平菇菌丝试验

将冰箱4 ℃保藏的平菇615 菌株转接PDA 平板培养基，然后置23 ℃生化培养箱内培养7 d活化。

将PDA 培养基分装至250 mL 三角瓶内，每瓶100 mL，于121 ℃灭菌30 min，待温度降至40 ℃左右，注入不同体积分数的木醋鱼蛋白液，摇匀后快速倒入无菌培养皿（90 mm）内，每个处理5个重复。

然后用直径5 mm 的无菌打孔器取活化的平菇615 菌饼，转接至不同处理的培养皿中央，于23 ℃，空气相对湿度70%～75%避光培养。

1.2.2 栽培料添加木醋鱼蛋白栽培平菇试验

1.2.2.1 建堆发酵

按照比例称原料，在拌料前将棉籽壳、木屑混合搅拌2～3 次，石灰溶于水预湿原料。原料含水量为60%～65%，pH 8.5～9.0。建堆，堆高1.2 m，宽1.5 m，长度不限，从料堆顶部每隔40 cm打一个直径80 mm 通气孔至料堆底部。当料堆内部温度升至65 ℃时，第一次翻堆，以后每隔1～2 d 翻堆一次，7～15 d料堆内出现大量白色放线菌时，即发酵完成。

1.2.2.2 装袋、接种

待发酵料温度降至28 ℃以下，将其分成6 等份，再分别添加1%、2%、3%、4%、5%体积分数的木醋鱼蛋白液，以不添加木醋鱼蛋白液（0%）为对照，然后拌匀，料含水量为65%。采用规格15 cm×30 cm，厚0.004 cm 低压聚乙烯塑料袋装料，每袋装料折干500 g，每个处理50 袋。装袋完成后，采用分层式接种，料袋两头必须接种。

1.2.2.3 培养、采收

接种后，将菌袋移入培养室，温度为15～18 ℃，空气相对湿度为50%～70%，CO2体积分数小于0.2%，黑暗或避光培养。菌丝满袋后培养7～15 d，移入出菇大棚，光照强度为500～1 000 lx，空气相对湿度为80%～90%，昼夜温差8～10 ℃，CO2体积分数小于0.15%，待原基形成时揭去封口物。每天定时通风，遇到不良天气少通风或不通风。

平菇子实体菌盖边缘由内卷转向平展时为采收的最佳时期。采收时，一手压住培养料，一手捏住菌柄轻轻转动摘下子实体，采菇后应及时清理菇体表面残留物。

1.3 考察项目及方法

测定平板菌丝长速、菌丝满袋时间、平均袋产量，计算生物转化率。

菌丝长速：采用十字划线法[12]，测定菌丝长速S（mm/d）。每隔2 d 标记1 次菌落直径，培养7 d 后，测定不同体积分数木醋鱼蛋白平板培养基上平菇菌丝长速。每个处理重复3次，取平均值。

其中：D为菌落平均直径（mm），T为培养天数（d）。

菌丝满袋时间：接种到菌丝长满料袋所需时间的平均值。

平均袋产量：称量3潮鲜菇，计算每袋的平均产量，计算生物转化率。

1.4 数据处理

采用Graph prism8.0 和SPSS 22.0 软件进行数据分析。

2 结果与分析

2.1 平板培养基添加木醋鱼蛋白对平菇615 菌丝生长的影响

由图1 可知，随着添加的木醋鱼蛋白体积分数的上升，平菇菌丝生长速度加快，添加体积分数2%时，菌丝生长最快，为0.325 mm/d，之后随着添加木醋鱼蛋白体积分数上升，菌丝生长变慢，但均显著快于对照。由图2 可知，当添加木醋鱼蛋白体积分数为2%时，与对照相比，平菇菌落洁白，气生菌丝浓密，菌丝长势较好。而添加木醋鱼蛋白体积分数高于2%时，虽然平菇菌落仍洁白，但菌丝生长受到抑制，气生菌丝较稀疏，长势变差。

图1 平板试验不同处理平菇菌丝长速

图2 平板试验不同处理平菇菌丝生长状态

以木醋鱼蛋白体积分数与平菇菌丝生长关系进行模拟，拟合公式见式1，对公式1 进行显著性分析，F=8.642＜F（0.05），说明公式1 能够较好反映木醋鱼蛋白体积分数与平菇菌丝生长的关系。由式1可知，随着木醋鱼蛋白体积分数的上升，平菇菌丝长速加快，对式1进行求极值，得出木醋鱼蛋白体积分数为2.21%时，菌丝长速最快，为0.31 mm/d。因此，当添加木醋鱼蛋白体积分数为2.21%时，其对平菇菌丝生长的促进作用最强。

2.2 栽培料添加木醋鱼蛋白试验结果

由表1 可知，添加体积分数为3%木醋鱼蛋白时，平菇子实体单袋产量最高，为645 g，与对照相比，每袋增产95 g。当添加体积分数为2%木醋鱼蛋白时，平菇子实体单袋产量为620 g，与对照相比，每袋增产70 g。添加体积分数为1%、4%、5%木醋鱼蛋白时，与对照相比，均有一定增产作用，但没有添加体积分数3%木醋鱼蛋白作用显著。添加不同体积分数木醋鱼蛋白对平菇生物转化率的影响同产量一致，即添加体积分数3%木醋鱼蛋白效果最佳。由图3 也能看出当添加木醋鱼蛋白体积分数为3%时，平菇出菇较好。

表1 栽培料添加木醋鱼蛋白栽培平菇试验结果

图3 栽培料添加木醋鱼蛋白各处理平菇出菇状态

3 小结

中医农业技术体系，即利用中医原理和方法来满足植物健康生长的需求，应用中医思想和中医药技术及产品，解决作物的健康生长问题[13-15]。木醋鱼蛋白是一种中医农业制剂，含鱼蛋白、多肽酶、中草药成分，能有效促进作物的生长[16-18]。以平菇615菌株为材料，探究PDA 及栽培料添加不同体积分数木醋鱼蛋白对平菇菌丝生长和子实体产量的影响。结果表明，最初随着木醋鱼蛋白体积分数的上升，平菇菌丝长速加快，当木醋鱼蛋白体积分数达2%时，平菇菌丝长速最快，之后随着体积分数的上升，菌丝长速变缓，但显著高于对照。从平菇菌落长势来看，添加木醋鱼蛋白体积分数为2%时，平菇菌落洁白，气生菌丝浓密，菌丝长势较好，随着木醋鱼蛋白体积分数的上升，菌丝生长受到抑制，气生菌丝较稀疏，菌落长势变差。因此，木醋鱼蛋白体积分数为2%时，对平菇菌丝生长影响最显著。栽培料添加木醋鱼蛋白栽培平菇试验结果表明，添加木醋鱼蛋白能提高平菇产量及生物转化率，添加木醋鱼蛋白体积分数为3%时，效果最明显，研究为“中医农业”技术在平菇生产中应用提供了数据支撑。