河源市源城区2 468例儿童呼吸道感染病原体核酸检测结果分析

陈运恒 邱 莉 廖翠芳 骆 红

广东省河源市妇幼保健院（河源 517000）

呼吸道感染是河源地区住院患儿最常见的疾病之一，急性呼吸道感染是儿童最常见的感染性疾病，急性下呼吸道感染是5岁以下儿童死亡的主要原因［1］，严重威胁儿童生命健康，给家庭和社会造成了严重的经济及疾病负担。近三年来，新型冠状病毒的全面爆发，严重威胁着人民生命健康，特别是免疫功能低下的老年人及儿童，事实证明呼吸道核酸检测对呼吸道疾病的早发现、早诊断发挥着重要作用［2］。因此，尽早地明确呼吸道感染的病原体对临床诊断、疾病的防控、抗生素的合理应用具有重要意义，本次研究使用PCR技术和多重微球杂交技术，对广东省河源市源城区长安街河源市妇幼保健院2020年3月—2022年2月因呼吸道感染住院患儿呼吸道分泌物进行6种常见病原体检测，现分析报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2020年3月—2022年2月在河源市妇幼保健院儿科因呼吸道感染住院的2 468例患儿。男1 493例，女975例，年龄29日～12岁，按《诸福棠实用儿科学》［3］诊断标准确诊为呼吸道感染。本研究所涉及患儿均匿名报道，研究方案经河源市妇幼保健院医学伦理委员会批准（批件号：YXLL-202304）。

1.2 方法

1.2.1 标本的采集、保存和运送 患儿入院时由儿科住院部经专业培训的护士用一次性无菌拭子擦拭两侧腭弓、咽及扁桃体，将咽拭子置入无菌管中，密封送检。标本采集后2小时内送到实验室，如无法送到可4 ℃暂存48小时以内，超过48小时则需-20 ℃低温冷冻保藏。避免反复冻融，造成假阴性。

1.2.2 标本检测 采用广州市达安临床检验中心提供的呼吸道病原体核酸检测试剂盒，本试剂盒使用PCR技术和多重微球杂交技术，针对呼吸道病原体设计PCR引物探针，PCR扩增分两管进行。通过PCR获得标记的产物后与微球上探针杂交，加入显色剂，上机检测。根据病原体对应探针的信号的高低对检测结果进行判断。

1.3 统计学处理

采用SPSSAU软件进行统计学分析。定性资料组间比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 呼吸道病原体检出的总体情况

2 468 例标本中检测出1 302例阳性，检出率为52.8%。单一病原体感染检出率有高至低依次为：呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）、肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae，Sp）、流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae，Hi）、他莫拉菌（Moraxella catarrhalis，MC）、肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae，MP）、腺病毒（adenovirus，ADV），混合感染检出率为12.4%（307/2 468），二种病原体混合感染多见，其中以Sp合并RSV感染最多见，占混合感染中43.3%（133/307）。三种病原体同时感染检出41例，排在前三位的病原体分别是：Sp、MC、RSV16例，Hi、Sp、RSV 10例，Hi、Sp、MC10例。两例为四种病原体混合感染，分别为Hi、Sp、MC、RSV，Hi、Sp、MC、MP。其他混合感染组合样式多样，无明显规律。见表1。

表1 6种呼吸道病原体核酸检测结果

2.2 呼吸道病原体检出情况

婴儿组（29日～1岁）、幼儿组（1～3岁）、学龄前组（3～6岁）、学龄组（6～12岁）。婴儿组和幼儿组中RSV检出率最高，但幼儿组Sp检出率较婴儿组明显增高。学龄前组则以Sp检出率最高，RSV较前两组明显减少，Hi检出率在这个年龄组较其他组高。学龄组Sp检出率在4个年龄组中占比最高，混合感染在各年龄组均排在前三。不同年龄组呼吸道病原体检出率比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。在呼吸道感染住院患儿中，年龄29日～3岁共1 829例，婴儿组和幼儿组中以病毒感染为主，其中RSV检出率最高，混合感染次之，而年长儿以细菌感染为主。ADV、MP在各年龄组差异不大。见表2 。

表2 不同年龄组呼吸道核酸6项检出情况 ［例（%）］

2.3 各季节呼吸道病原体检出情况

按季节分；春季（3～5月）、夏季（6～8月）、秋季（9～11月）、冬季（12～次年2月）。春季混合感染的检出率最高，单一病原体感染春季Sp检出率稍高于RSV，Hi在春季检出率占比较其他季节高。夏季则RSV检出率高于Sp，该季节MC、ADV的检出率占比均高于其他季节。秋季和冬季均是RSV检出率最高，冬季Sp检出率仅次RSV，MP全年散发，占比均较低。我院呼吸道感染住院患儿多集中在秋冬季节，不同季节呼吸道病原体的检出率不同，RSV在秋季节检出率远远高于其他病原体。不同季节样本的病原体分布比较差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 不同季节呼吸核酸6项检出情况 ［例（%）］

2.4 呼吸道病原体在不同性别的分布情况

2 468 例呼吸道感染患儿中，男1 493例，检出率54.0%，女975例，检出率50.8%，不同性别组的各病原体检出率比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表4。

表4 不同性别的呼吸道核酸6项的检出情况 ［例（%）］

3 讨 论

呼吸道疾病感染病原体多种多样，主要有细菌、病毒、支原体、衣原体等，病原学检测方法也有很多种，包括分离培养、抗原检测、抗体检测和核酸检测等［2］。分离培养为呼吸道感染病原体检测的“金标准”［4］，但耗时长、敏感性低，不能及时为临床诊疗提供依据；抗体检测因存在窗口期易导致假阴性结果；抗原检测常采用直接免疫荧光法，特异性较高，但灵敏度偏低，并且容易引起假阳性结果［5］。呼吸道核酸检测是对病原体的DNA或RNA进行检测，这种基于分子生物学的技术，具有更高的灵敏度、特异度［2］。

本次回顾性研究河源市妇幼保健院儿科住院部2020年3月—2022年2月因呼吸道感染住院的患儿2 468例，呼吸道病原体检出率为52.8%，稍高于国内不同地区多位学者报道的呼吸道病原检测阳性率，如福建为43.26%［6］，苏州为30.74%［7］，北京为50.45%［8］，可能与不同地区在收集病例、采样、检测方法、气候、病原学流行特点等方面存在差异有关。结果显示，儿童呼吸道感染最主要病原体是病毒，检出率为21.3%，这与国内张晓丽［9］、黄艳智［10］报道一致。而RSV检出率最高，占所有阳性病例的40.4%（526/1 302），研究显示河源市源城区住院儿童呼吸道感染的主要病毒是RSV。全球每年5岁以下因RSV感染住院的儿童大约有270万～380万，其中约4.8万～7.5万人死亡［11］。其次是细菌感染，以Sp病原体检出率最高，MP感染的呼吸道疾病呈散发发病。

研究显示在2 468例中有1 829例为29日～3岁的患儿，婴幼儿为呼吸道感染疾病的主要人群，这与该年龄组患儿的自身免疫、呼吸系统发育不完善、对病原体的抵抗力差有很大关系。不同年龄组呼吸道感染的病原体检出率不同，婴儿组和幼儿组病原体检出率最高的是RSV，分别为57.45%、32.86%，提示在我院呼吸道感染的婴幼儿以RSV感染为主。混合感染在婴儿组、幼儿组、学龄前组、学龄组阳性率依次为20.92%、28.13%、24.90%、9.26%，混合感染有多种模式，有一种细菌+一种病毒、二种细菌+一种病毒、三种细菌+一种病毒、一种细菌+MP+一种病毒等等，最多见的是Sp+RSV。混合感染的增多与模式多样化是否与河源市源城地区的流行病学、生活环境、临床习惯性用药等有关联？目前对混合感染和疾病严重程度的相关性的研究有限，一些报道显示多病原体合并感染可能增加疾病的严重程度［12-14］，而有些研究却表示多种病原体合并感染的临床症状之间没有显著性差异［15］，由于本检测采集标本为口咽部拭子，故对细菌阳性结果的判断还需临床医师根据患儿临床表现进行综合评估。判断是定植菌或致病菌，谨慎选择抗生素治疗。

结果表明，因呼吸道感染住院的患儿多集中在秋冬季节，其中秋季6种呼吸道病原体检出率均高于其他三季，提示该季节为呼吸道感染的高发季节，应做好防控工作。RSV在秋冬季节检出率明显高于春夏季，与池细俤等［16］报道一致，春季混合感染的检出率最高，ADV在夏季中检出率最高，占全年80%，其他病原体全年呈散发流行。

综上所述，秋冬季节是河源市源城区呼吸道感染的高发季，多见于婴幼儿群体，而RSV为秋冬季节婴幼儿的主要病原体，Sp次之。呼吸道核酸检测为我们进一步了解本地区呼吸道感染患儿的流行病学情况提供了可靠的依据，促进了我院提高临床诊疗水平，规范抗生素的合理应用，有助相关疾病的防控工作。