血清MMP-9、AFABP和PLGF水平联合检测对妊娠期肝内胆汁淤积症临床评估价值

李娟 沈晓亚 郑丽

妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)是女性最常见的与妊娠相关的肝脏疾病,主要临床表现为血清总胆汁酸(TBA)升高、皮肤瘙痒和肝功能异常[1]。高TBA水平和肝功能异常影响胎儿肺和肺表面活性剂活性,降低胎盘有效灌注量,导致胎儿生长受限(FGR)的发生,增加多种围产期并发症, 易致不良妊娠结局[2]。研究报道[3],ICP与机体的炎症氧化应激、脂质代谢紊乱、免疫功能失调和细胞异常分化凋亡等相关。基质金属蛋白酶-9(MMP-9)是与多种妊娠合并症相关的炎性反应标志物[4];脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(AFABP)可参与脂质代谢紊乱和炎症反应导致肝脏病变[5];胎盘生长因子受体(PLGF)通过调节滋养层细胞和内皮细胞功能促进新生血管生成[6]。本研究探讨血清MMP-9、AFABP和PLGF水平联合检测对ICP病情程度和FGR的评估价值。

资料与方法

一、一般资料

选择南京江北医院妇产科2020年1月—2022年6月收治的70例ICP孕妇,列入观察组;选择同期在本院产检和分娩的健康产妇40例,列入对照组。诊断标准:根据病史、症状体征和实验室检查,符合《肝内胆汁淤积症诊治专家共识(2021年版)》中的诊断标准[7]。纳入标准:①年龄18～35岁,单胎妊娠;②研究对象知情同意和医学伦理审批。排除标准:①其他肝胆系统疾病,肝功能衰竭;②其他严重妊娠合并症,胎儿及产妇先天性、炎症性、免疫性、血液性疾病;③智力或精神障碍不能配合研究等。剔除标准:病例资料不完整,中途退出研究,失访等。观察组20～35岁,平均(28.09±2.36)岁;体质指数(BMI)为21.7～30.6 kg/m2,平均(26.29±1.43)kg/m2;孕周33～38周,平均(36.49±0.61)周;初产妇43例,经产妇27例;产次0～3次,平均(1.46±0.25)次。对照组20～35岁,平均(28.03±2.38)岁;BMI为21.6～30.4 kg/m2,平均(26.24±1.45)kg/m2;孕周33～38周,平均(36.52±0.63)周;初产妇42例,经产妇28例;产次0～3次,平均(1.43±0.27)次。两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),具可比性。

二、研究方法

(一)指标检测 观察组于确诊次日(对照组于产检当日),采集清晨空腹静脉血样5 mL,室温中静置2 h待血液凝固,以3500 r/min速度离心10 min,分离出血清置于-80 ℃ 冰箱中保存待检。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清MMP-9、AFABP和PLGF水平,MMP-9和AFABP试剂盒购自上海科博瑞生物科技公司,PLGF试剂盒购自武汉华美生物工程公司。使用迈瑞BS-600M全自动生化分析测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白蛋白(Alb)、总胆红素(TBil)、总胆汁酸(TBA)、甘胆酸(CG)水平。采用Ribalta评分法评价瘙痒症状的严重程度,无瘙痒为0分,偶发瘙痒为1分,间断性瘙痒以不痒为主2分,间断性以痒为主3分,持续性瘙痒4分。

(二)临床分组 ①病情程度:将观察组根据血清TBA和TBil水平分成3个亚组,其中轻度组31例,10 μmol/L≥TBA<40 μmol/L,TBil<20 μmol/L;中度组24例,40 μmol/L≥TBA<80 μmol/L,20 μmol/L≥TBil<40 μmol/L;重度组15例,TBA>80 μmol/L,TBil>40 μmol/L。②妊娠结局:根据是否出现FGR分为未合并FGR组(n=57)和合并FGR组(n=13)。

(三)评价方法 ①比较观察组和对照组的ALT、Alb、CG、MMP-9、AFABP和PLGF水平。②比较观察组中不同病情严重程度和是否合并FGR亚组的MMP-9、AFABP和PLGF水平。③Pearson分析MMP-9、AFABP和PLGF水平与血清ALT、Alb、CG水平和Ribalta评分的相关性。④绘制受试者工作特征曲线(ROC),分析单独和联合检测MMP-9、AFABP和PLGF水平对ICP病情和FGR的评估效能。

三、统计学方法

结 果

一、两组血清学指标水平的比较

观察组的ALT、CG、MMP-9和AFABP水平高于对照组,PLGF水平低于对照组(P<0.05);两组Alb水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组血清学指标水平的比较(±s)

二、不同病情程度亚组MMP-9、AFABP和PLGF水平的比较

观察组中重度亚组的MMP-9和AFABP水平显著高于中度和轻度亚组,呈递减趋势;PLGF水平低于中度和轻度亚组,呈递增趋势(P<0.05)。见表2。

表2 不同病情程度亚组MMP-9、AFABP和PLGF水平的比较(±s)

三、是否合并FGR亚组MMP-9、AFABP和PLGF水平的比较

观察组中合并FGR亚组的MMP-9和AFABP水平高于未合并FGR亚组,PLGF水平低于未合并FGR亚组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 是否合并FGR亚组MMP-9、AFABP和PLGF水平的比较(±s)

四、MMP-9、AFABP和PLGF水平与ALT、ALB、CG和Ribalta评分的相关性分析

Pearson分析显示,观察组的MMP-9和AFABP水平与ALT、CG和Ribalta评分呈正相关;PLGF水平与ALT、CG和Ribalta评分呈负相关(P<0.01)。见表4。

表4 MMP-9、AFABP和PLGF水平与ALT、Alb、CG和Ribalta评分的相关性

五、MMP-9、AFABP和PLGF水平检测对ICP的评估效能分析

以血清MMP-9、AFABP和PLGF水平为检验变量,以ICP严重程度和是否合并FGR为状态变量,绘制ROC结果显示,MMP-9、AFABP和PLGF水平联合检测的效能显著高于任一单项检测(P<0.01)。见表5。

表5 MMP-9、AFABP和PLGF水平检测对ICP的评估效能

讨 论

高TBA水平的毒性作用损伤ICP孕妇的胎盘血管内皮功能,导致胆汁淤积影响肝脏代谢功能,降低胎盘灌注和屏障功能,显著增加多种围产期并发症[8]。FGR是ICP常见的并发症之一,不仅影响胎儿的生长发育,还对胎儿娩出后产生远期的不良影响,是围生儿死亡的第二大原因[9]。

本研究结果显示,ICP孕妇的MMP-9水平显著高于健康孕妇,且随着病情严重程度增加和合并FGR而逐渐升高,可作为预测不良妊娠结局的指标。MMP-9是中性粒细胞和血管内皮细胞分泌的内源性蛋白水解酶,能促使细胞外基质降解,增加血管通透性,调节血管生成,参与炎症反应和动脉粥样硬化等病理过程[10]。血管活性肠肽由围生期门静脉周围间充质细胞产生,能调节胆汁和肝脏间充质细胞在肝内胆管的代谢过程,异常表达的MMP-9水平能拮抗血管活性肠肽功能,不利于胆汁淤积损伤和高胆红素血症的改善[11]。ICP孕妇的高TBA水平诱发机体的过氧化应激反应,产生大量的炎症介质和细胞因子,导致内皮细胞功能损害和滋养层细胞侵入异常,使血清MMP-9水平异常表达,增强降解纤维粘连蛋白和Ⅳ型胶原等能力,发挥细胞外基质重建作用[12-13]。桂凌等[14]报道,ICP孕妇的血清 MMP-9水平显明显增高,疾病严重程度和不良妊娠结局发生率显著增加,可作为ICP早期预警或辅助诊断的敏感指标,与本研究结果一致。

ICP的发病机制与雌激素水平异常升高降低钠钾离子活性有关,从而影响胆汁酸代谢,导致胆固醇代谢紊乱和影响胆汁排泄,肝细胞合成蛋白质能力下降,诱发ICP的发生[15]。AFABP是分布于脂肪细胞和巨噬细胞中的新型脂肪因子,参与脂肪酸的吸收、转运和代谢过程,炎症过氧化应激和血脂代谢紊乱均可诱导血清AFABP过表达,对非酒精性脂肪性肝病的预测价值较高[16]。AFABP可通过激活核因子e2相关因子2转录活性和抑制活性氧活性促进细胞增殖,与肥胖、糖尿病和胰腺癌的发病密切相关[17]。胆汁淤滞性、炎症性、脂毒性等肝损伤时,肝细胞膜和线粒体酶功能障碍,肝细胞膜中的磷脂和胆固醇的比例明显升高,肝细胞与星状细胞肝脂肪酸结合蛋白能力缺失,导致血清AFABP呈高表达[18]。本研究显示,ICP孕妇的AFABP水平显著高于健康孕妇,且随着病情严重程度增加和合并FGR而逐渐升高,可作为预测不良妊娠结局的指标,与钟萍娇等[19]研究结果一致。

本研究中ICP孕妇的PLGF水平显著低于健康孕妇,且随着病情严重程度增加和合并FGR而逐渐降低,可作为预测不良妊娠结局的指标。ICP孕妇的机体呈高炎症和脂质代谢紊乱状态,胎盘发生过氧化应激反应,损伤胎盘血管内皮功能,滋养细胞侵袭能力减弱,导致胎盘发育不良和降低胎盘灌注量,从而诱发FGR[20]。高TBA的毒性作用导致机体的免疫调节功能紊乱,T细胞功能下降抑制了PLGF对血管内皮生长因子的调节能力,影响滋养细胞迁移和增殖,胎盘新生血管的生成以及血液灌注和屏障功能,参与FGR的发生和发展过程[21-22]。PLGF是由合体滋养层细胞合成酪氨酸酶受体结合蛋白,能特异性调节滋养层细胞和内皮细胞功能,促进胎盘新生血管形成,维持胎盘血管生长和有效的血管通透性[23]。姜方清等[24]报道,ICP孕妇血清PLGF水平低于健康孕妇,重度ICP组血清PLGF水平显著低于轻度ICP组,与ICP发生、发展及FGR密切相关,可作为ICP病情评估和早期预警FGR的敏感指标,有力佐证了本研究结果。

高TBA水平和内分泌激素失调导致胆汁代谢功能紊乱,氧化应激和炎症反应损伤肝细胞功能,ALT和CG作为最常用的肝酶指标和妊娠晚期血清最主要的胆汁酸组分,血清水平均明显升高;胆酸沉积于外周循环中刺激感觉神经末梢产生皮肤瘙痒症状,降低患者的生活质量[25]。本研究Pearson分析显示,观察组的MMP-9和AFABP水平与ALT、CG和Ribalta评分呈正相关;PLGF水平与ALT、CG和Ribalta评分呈负相关(P<0.01),提示ICP的病情越严重,血清MMP-9和AFABP水平越高,PLGF水平越低,可作为反映ICP病情程度和预后的可靠指标。本研究进一步ROC分析显示,MMP-9、AFABP和PLGF联合检测的敏感度和特异度均高于任一单项检测(P<0.01),对ICP具有较高的诊断、预测和评估效能。

综上所述,ICP孕妇的血清MMP-9、AFABP和PLGF水平与病情严重程度和不良妊娠结局显著相关,在早期诊断、病情预测和预后评估分娩具有较高的临床价值。

利益冲突声明：所有作者均声明不存在利益冲突。