基层动物疫病检测现状分析与改进建议

葛洪玲

（山东省临沂市临沭县临沭畜牧兽医站，山东临沂 276700）

近年来，随着畜牧业的高质量、高标准的快速发展和免疫无高致病性禽流感、免疫无口蹄疫省创建工作的完美收官，以及各类无疫小区、牛羊布鲁氏菌病、结核病等净化场的积极推行，各地的动物疫病检测工作也得到了足够的重视和快速的发展。多地实现了从无到有，从实验单一到血清学和病原学齐举的转化，甚至出现了一批设备精良、技术人员本领过硬，业务水平高的专业性的第三方检测机构，在动物疫病的防控中越来越多地发挥了重大作用。就山东省而言，为创建免疫无口蹄疫和免疫无禽流感省，全省所有县级以上的实验室均通过了省级的实验室验收考核，对规范实验室的检测行为和提高实验室的检测能力和标准化功不可没。不可否认，检测工作将在重大动物疫病的防控和动物产品的质量安全控制中发挥着重要的技术支撑作用，并对疫情的提前预警和政策的正确决策产生积极影响。所以，做好检测工作是动物疫情防控的重中之重。由于目前乡镇级的官方实验室尚不能开展全面的动物疫病检测工作，本文所指基层仅指县级的检测机构。

1 基层动物疫病检测工作的现状

本文简要地介绍一下目前基层检测工作开展的种类、工作流程、检测进行的时间、常用的实验方法、检测结果的处置等方面工作开展的情况。

1.1 基层动物疫病检测工作的种类

1.1.1 被动检测

养殖场、屠宰场、无害化场点等日常巡查发现的问题，比如动物表现异常:有与某种传染病十分相似的症状或者特征性的解剖特征，需要紧急采样确诊的；或者某些畜禽产品在检疫过程中发现异常，比如有病灶，某器官有特征性的病变组织，或者有囊包、淋巴结异常等，需要通过试验验证的：比如无害化场在进行病死畜禽无害化处理的时候，发现体表的皮肤特征或者耳朵出现某种重要传染病的特异性临床特征，而且最近这种症状出现的比较多，怀疑某种重要传染病正在流行时，需要进行实验室的进一步确诊的。以及来自诊疗单位和基层畜牧兽医站、兽药饲料行业发现的动物疫病风险，需要进行检测的情况等等都属于被动检测的范围。发生重大疫情时的应急检测，是为排除风险而必须紧急进行的检测活动。特殊时期的重点监测。比如冬春季节是非洲猪瘟、高致病性禽流感等动物疫病高发的时间节点，国家省市会开展一些专项的攻坚活动，开展相关检测。都属于此类检测。

1.1.2 主动检测

行业主管部门文件通知下达各种动物疫病检测方面的检测任务。比如动物免疫后的免疫效果评价，病原学的检测，以及针对某种重要传染病的流行病学调查的配合抽检，还有配合省市实行“先打后补” 工作的监督抽检等等。都是围绕着政府的指令，有计划、有步骤，逐步分时段完成的检测任务。强制免疫是长久以来我们国家一直实行的一项免疫政策，是指国家对严重危害养殖业生产和人体健康的动物疫病，采取制定强制免疫计划，确定免疫用生物制品和免疫程序，对免疫效果进行监测的一系列预防控制动物疫病的强制性措施，以达到科学高效地预防、控制、扑灭动物疫病的目的。因此，强制免疫是国家统一的一项防疫政策。强制免疫后的效果评价即血清学的检测是检测工作的重中之重。但近年来，随着“先打后补” 工作的持续推进，国家的免疫政策逐渐由强制免疫向自购疫苗免疫并给予养殖户一定的补贴鼓励自行免疫靠拢，因此免疫抗体效果评价的检测将逐渐被 “先打后补” 的监督抽检所代替。另外，病原学的检测是比血清学发展慢的一项检测，但随着实验新技术的不断推广，近几年的病原学检测发展很快，过去一些基层不会做的试验，比如非洲猪瘟的荧光PCR 试验、高致病性禽流感的RT-PCR 试验、炭疽杆菌的荧光PCR试验都在陆续开展。“先打后补” 的监督抽检的内容也逐渐涵盖血清学和病原学的检测。

1.2 基层动物疫病检测工作的流程

政府部门的行业监管的实验室已经全部纳入了省行业部门考核体系，拥有自身完善的管理体系，按照省级标准运行管理，检测工作的大致流程如下：

1.2.1 样品采集

有的实验室是据监管需要自己下场采样，有的实验室是由基层的畜牧兽医站联合村级防疫员完成采样。实验室完成样品的集结后批量或者单独开展样品的前期处置和准备工作，包括审核采样单，核对疫苗的毒株类型，为后续的抗体水平检测或病原学检测做初步的准备。

1.2.2 签订委托书

样品审核合格被收取后，根据需要决定是否留样，与客户签订委托书，遵从保密规定出具试验的委托编号，标识样品，为保密不能体现客户的任何信息，样品进入样品保存室待检。

1.2.3 下达检测任务书

实验室根据客户的检测需要和自身任务的需要向相关科室下达检测任务书，抗体检测任务归血清学室，病原检测任务归分子生物学室或病原学室，由不同的室领取样品，完成样品的流转与标识的转换。

1.2.4 按标检测

各检测室根据自己的任务按照作业指导书规定的检测方法进行检测，收集数据，填写相关表格，在规定的时间内完成检测任务。血清学检测记录出抗体滴度，病原学检测导出图谱。可以使用国标、行标，也可以使用非标准方法，非标方法必须通过验证才可使用。

1.2.5 记录结果，出检验报告

结果记录必须详细：包括实验的简化程序、使用的仪器设备、检测的时间，对照值的情况，实验的真实结果等等。然后，进一步整理后出检验报告，盖好印章。正本下发，副本存档，将原始记录与采样单、委托书、检测任务书和检验报告副本一起装订成册，一场户一档，完整易追溯。

1.2.6 分析、总结、预警

汇总分析实验数据，写总结分析报告，对疫情做出预警，通过系统逐级上报检测结果。

1.3 基层动物疫病检测工作的开展时间

常规检测主要根据上级文件制定的年度计划来进行。一般在每年的春秋两季进行动物强制免疫后的集中检测，包括相关的病原学检测。病原学检测主要包括口蹄疫初筛阳性的定性检测、日常必须检测的任务和对风险较高的某种疫病的紧急或者加强检测，还有针对本地流行特点进行的有针对性的提前预警检测，或者是饲料、肉品污染后去疑检测等。应急检测随时进行，风险检测根据本地实际有针对性进行，“先打后补” 的监督抽检根据养殖户提报的情况自行决定抽检时间，一般都是按方案逐步施行。

1.4 基层动物疫病检测工作的实验方法

目前常用的实验方法是平板凝集、血凝与血凝抑制，酶联免疫吸附试验和RT-PCR、荧光PCR 等。

1.5 基层动物疫病检测的结果处置

检测抗体水平不合格时：对于抽检的养殖场(户)，山东省规定的强制免疫后抗体水平的合格判定标准是：口蹄疫必须达到80%以上，其他70%以上即可，对于强制免疫后抗体水平不合格的养殖场(户)，及时通知基层畜牧兽医站和养殖场(户)，由乡镇畜牧兽医站监督养殖场(户)补免，间隔一段时间后，重新抽检，直到抗体合格为止。

检测出现病原学阳性时：对于养殖场(户)，立即将阳性动物隔离、限制流动、强化消毒、紧急流行病学调查，并采样去更高级别的实验室强化检测、确诊，但疫情的发布权归农业农村部。屠宰场出现检测病原阳性时，立即封锁产品，强化消毒、禁止出库、溯源、进一步采样送检、确诊后依法依规处置。无害化场点出现病原学阳性时，立即展开调查，溯源、强化消毒、防止疫情的进一步扩散，采样送检，确诊后依法依规处置。引入动物出现病原学阳性后，隔离、强化消毒、流调、溯源、进一步采样送检、确诊后依法依规处置。隔离场动物检测出阳性后，即使隔离期满也要限制移动、强化消毒、采样送检确诊后依法依规处置。

2 基层动物疫病检测工作中存在的突出问题

2.1 检测的需求方面

履行动物疫病检测功能的实验室业务发展速度还是跟不上畜牧业快速增长的检测需求。主要表现在部分实验室的基础设施相对落后，有的虽然拥有合格的场地、合规的功能室划分，业务检测量也很多，但依然存在部分仪器设备老化，更新速度慢，业务范围窄、经费不足等一系列突出问题。实验室的资源分配不均衡，实验室的科学化、标准化程度和业务拓展度均有待提高。

2.2 检测技术人员情况

从事动物疫病检测的技术人员青黄不接。技术人员因年龄老化，因退休、升迁或者岗位调动而退出实验岗位，但后续的实验人才还没培养出来，实验新手面对严格的实验室考核标准、厚重的体系文件，超难的国标、行标，不经过数年的理论与实践的摸索与摸爬滚打，短期内根本无法做到独立实验和撑起一片天。基层中最缺的是全能型检测人才和能长期留在检测岗位的人才。

2.3 基层的配合程度

不配合动物疫病检测的事件时有发生，相关法律法规意识淡薄。动物疫病检测工作是一个系统性的工作，是由养殖场户、村级防疫员、基层畜牧兽医站和各相关部门团结协作完成的一项工作，而实际生产中，经常有养殖场户不配合采样的情况发生。虽然 《动物防疫法》 规定饲养动物的单位和个人必须履行如下9 条法定义务：①依法履行动物疫病强制免疫义务，按照兽医部门的要求做好免疫、消毒等动物疫病预防工作；②按照兽医部门的规定建立免疫档案，加施畜禽标识；③及时向兽医部门报告动物疫情，不对社会发布动物疫情信息；④按照兽医部门的规定处理病死或者死因不明的动物尸体及其排泄物、垫料、包装物、容器等污染物；⑤遵守县级以上人民政府及其兽医主管部门依法作出的有关控制、扑灭动物疫病规定；⑥接受并配合动物卫生监督机构的监督检查；⑦接受并配合动物疫病预防控制中心对动物疫病的检测；⑧开办的养殖场要具备国务院兽医主管部门规定的动物防疫条件，并取得县级以上地方人民政府兽医主管部门颁发的动物防疫条件合格证⑨销售动物前要向动物卫生监督机构申报检疫。但总有养殖场户以各种各样的理由，比如怕动物应激，怕采样人员给动物带来传染病等等各种理由拒检。有的养殖户想检测饲料，怀疑污染了某种病原体，却表达不清楚，让检测人员无法有针对性地开展检测工作。

另外，动物疫病检测与动物诊疗的结合不够紧密。机构改革取消了门诊，强化行业的监管和服务职能，动物疫病检测人员虽然不再门诊与检测工作并举，不再受风里来雨里去的看诊之苦，但失去了直接接触临床病例的机会，也失去历练自己的机会，对基层动物疫情的辨识度降低，采样的针对性弱化，对动物疫病的正确诊治非常不利。

2.4 样品采集方面的问题

实验样品采集中存在不足，主要表现为以下3 个方面：

2.4.1 偶有分样

由于经常遇到养殖户不配合的情况，有时采鸡血，实际采30 份，养殖户却只肯抱出10 只或20 只鸡，为完成任务，有些人便采取分样，浪费检测人员的精力和试剂。

2.4.2 实验人员亲自采样带来后续的风险问题

有的基层实验室人手短缺，实验人员不得不亲自采样，很容易把病毒细菌带进实验室，到时候一旦病原学实验阳性，说不清楚到底是样品阳性还是来自环境的污染。

2.4.3 样品采集和运输不规范

有的采样人员不穿防护装备，易得人畜共患病；有的样品采集量过少，影响实验结果；夏季不使用或者缺乏冷藏设备，导致样品保存不当；有的本来是应该采体内血的却采集了体外血；有的心脏采血扎针不当导致了牲畜死亡，引发了索赔争议等等。

2.5 实验操作不规范

2.5.1 个人防护疏松

个别实验员在做简单实验的时候图省事穿戴不整齐，有时候只戴口罩穿白大褂，不戴帽子，有的仅戴个手套。

2.5.2 样品标识不正确

为图省事，不贴规定的标签，只用记号笔简单记录。

2.5.3 实验废弃物处理不及时

试验后的废弃物应当立即高压蒸汽灭菌后交由专业的机构处理，但为了节省时间攒一起高压灭菌，处理的不够及时，增加了病原微生物的散播风险。

3 改进动物疫病检测工作的建议

3.1 多方借力，不断提高基层动物疫病检测工作的硬件与软实力

多方筹措资金，改善实验室的基础设施，对老破小的实验室，特别影响检测工作质量的破旧仪器设备，布局不合理的实验室能淘汰的尽快淘汰，无法淘汰的升级改造，把防火、防水、防泄漏、防扩散作为所有实验生物安全防护工作的重中之重。更加科学与标准地做好兽医实验室的整体运营工作。多方联动，防疫人员搞好防疫，认真分析检测结果、数据、并选择免疫效果最好的厂家。养殖场户搞好日常的饲养管理和生物安全工作，检疫与监管人员控制好移动动物的传染病控制，检测人员配合好畜牧部门做好疫病的综合防控，并积极地参与到专业化的系统培训中，尤其是新的检测技术的推广与学习中，不断提升检测工作质量，为做好动物疫病的预防与控制出一把力。

3.2 加强对动物疫病检测后继和储备人才的实验技能培训

除了组织检测技术人员参加国家、省、市的外部培训，还要注意加强实验室人员的内部培训。尤其是实验基础理论和实操的培训。实验的精确度主要靠的就是不断重复与练习，还要有针对性地参与到实验室间比对和实验室人员内部的比对实操中，不断地提高实验的精度，拓展实验业务的广度。

3.3 多措并举，保障检测工作的流畅性

要与产地检疫、动物卫生监督、养殖场户和基层防疫员保持紧密沟通和高度配合，保证从采样、样品运转到实验与实验结果的处置等各个环节的流畅性，各负其责又密切配合地把动物疫病防控好。

3.4 坚持一畜禽一样品，杜绝分样陋习

建立起实验人员与采样工作相分离的工作机制，加强个人消毒和防护，增强对试验环境的净化工作，防止病原微生物的外溢和传入。定期培训，加强采样人员标准化操作和合格运输的控制，确保所有样品都合规。

3.5 加强实验室的规范化操作和正确标识与废弃物处置方面的培训

严格不定期的巡查实验过程中的规范化操作，发现疏漏及时纠正，严格实验室废弃物的处置，确保实验规范、及时规避风险隐患，提高整体的防护水平。

4 小结

基层动物疫病检测工作千头万绪，要想做到完美无缺很难，需要多部门配合，需要政府的大力支持，也需要业务部门的重视与扶持。但既然设立了这个业务，就要努力改进，把工作做扎实了，发挥为动物疫病防控提供好技术支撑的功效。抓好疾病监测活动，做好动物诊断与治疗工作，提高检测人员的诊断水平，至关重要。近30年的基层检测工作的实践让我对这项工作进行了深度思考。笔者认为要想进一步提高检测工作的效率和标准化必须做到以下几个方面：一是要有足够的财力支撑，检测工作花费高，检测文件要和财政局一起发，才能确保检测经费到位。二是要提高检测技术人员的福利待遇，改变技术人员培养难和流动性大的难题，要用高薪吸引和留住人才，提高卫生津贴标准并执行到位。三是有序开展一些重要疾病的检测计划，并把计划与培训相结合，计划的内容要接基层的地气、充分考虑基层的实际，而不是一味的加码却不关心基层的实际承受力，并坚持培训一项新技术开展一项新的检测项目的运行模式。