ICP-MS测定红花续断膏中铅砷镉汞铜含量

黄焕霞，刘金磊，陆蓉蓉，赵晓辉*

（1. 山东明仁福瑞达制药股份有限公司，山东 济南 250104；2. 山东古金中医药科技有限公司，山东 济南 250104）

黑膏药是我国传统中药剂型，具有两千多年的历史，广泛用于多种疾病治疗[1]。红花续断膏为红花、续断、蜈蚣、象皮、血竭、川乌、草乌等多味中药制成的黑膏药，具有活血化瘀，续筋接骨，消肿止痛，补益肝肾的功能，对骨折后愈合具有促进作用。在制备过程中铅丹与麻油在高温中形成脂肪酸铅盐，有报道黑膏药中铅可能会被人体吸收而造成铅中毒[2-3]，近年黑膏药质量控制研究报道较少，现黑膏药多数仅有软化点、锥入度等物理指标检测[4-6]，安全性指标研究报道较少，故本研究对红花续断膏中铅及砷、镉、汞、铜元素含量进行研究，指导黑膏药的质量控制及临床用药。

1 仪器与材料

1.1 仪器

AUW120D型电子天平（日本岛津）；HH-6恒温水浴锅（上海力辰邦西）；ICPMS-2030电感耦合等离子体质谱仪（日本岛津）；MDS-6微波消解仪（上海新仪微波）。

1.2 试药

红花续断膏（山东古金中医药科技有限公司，50 g/贴，批号：20200818，20200819，20200820，20210222，20210223，20210224，20210225）。铅元素标准溶液（中国计量科学研究院，1000 μg/ml）；砷元素标准溶液（中国计量科学研究院，1000 μg/ml）；镉元素标准溶液（中国计量科学研究院，1000 μg/ml）；汞元素标准溶液（中国计量科学研究院，1000 μg/ml）；铜元素标准溶液（中国计量科学研究院，1000 μg/ml）；锗元素标准溶液（国家有色金属及电子材料分析测试中心， 1000 μg/ml ）；铟元素标准溶液（国家有色金属及电子材料分析测试中心，1000 μg/ml）；铋元素标准溶液（国家有色金属及电子材料分析测试中心，1000 μg/ml）；甲醇为色谱纯，乙醇、丙酮等其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 测定方法

2.1.1 供试品溶液制备 取供试品约0.5 g，精密称定，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸10 ml，密闭，置微波消解仪中消解，消解完全后，冷却，将消解液转入50 ml量瓶中，用少量水洗涤消解罐3次，洗液合并于量瓶中，加入金单元素标准溶液（l μg/ml）200 μl，用水稀释至刻度，摇匀，即得砷、镉、汞、铜供试品溶液。精密吸取上溶液1 ml置100 ml量瓶中，用10 %硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，精密吸取1 ml置100 ml量瓶中，用10 %硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得铅供试品溶液。同法制备试剂空白溶液。

2.1.2 标准贮备溶液的制备 分别精密量取铅、砷、镉、汞、铜单元素标准溶液适量，用10 % 硝酸溶液稀释制成每l ml分别含铅、砷、镉、汞、铜为l，0.5，l，l，10 μg的溶液，即得。

2.1.3 系列标准溶液的制备 精密量取铅、砷、镉、铜标准贮备液适量，用10 %硝酸溶液稀释制成每l ml含铅0，2，5，10，20，50 ng，含砷0，l，2，5，10，20 ng，含镉0，0.2，0.4，0.8，1，2 ng，含铜0，10，20，50，100，200 ng 的系列浓度混合溶液。另精密量取汞标准贮备液适量，用10 %硝酸溶液稀释制成每l ml分别含汞0，0.2，0.4，0.8，l，2 ng的溶液，临用新配。

2.1.4 内标溶液的制备 精密量取锗、铟、铋单元素标准溶液适量，用水稀释制成每l ml各含l μg的混合溶液，即得。

2.1.5 测定法 测定时选取的同位素为63Cu、75As、114Cd、202Hg和208Pb，其中63Cu、75As以72Ge为内标，114Cd以115In为内标，202Hg和208Pb以209Bi为内标，选择碰撞反应模式，选用校正方程对测定的元素进行校正。

仪器的内标进样管在仪器分析工作过程中始终插入内标溶液中，依次将仪器的样品管插入各个浓度的标准溶液中进行测定（浓度依次递增），以测量值（3次读数的平均值）为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。将仪器的样品管插入供试品溶液中，测定，取3次读数的平均值。从标准曲线上计算得相应的浓度[7-9]。

2.2 线性

取2.1.3项下铅、砷、镉、汞、铜系列标准溶液及2.1.4项下锗、铟、铋内标溶液，注入电感耦合等离子体质谱仪，以内标校正浓度为横坐标，以对应的元素响应值为纵坐标，绘制标准曲线，结果表明本法测定铅、砷、镉、汞、铜的线性关系均良好。结果见表1。

表1 线性结果

2.3 系统精密度

取2.1项下铅、砷、镉、汞、铜3号标准溶液，分别连续进样6次，结果RSD分别为5.4 %，3.3 %，5.7 %，3.4 %，4.3 %，RSD均小于10 %，表明系统精密度良好。

2.4 检测限和定量限

取空白溶液，按2.1.5项下方法测定，连续进样12次，结果显示铅元素的检测限为0.1077 ng/ml，定量限为0.3589 ng/ml；砷元素的检测限为0.0668 ng/ml，定量限为0.2226 ng/ml；镉元素的检测限为0.0052 ng/ml，定量限为0.0173 ng/ml；汞元素的检测限为0.0301 ng/ml，定量限为0.9032 ng/ml；铜元素的检测限为0.0514 ng/ml，定量限为0.1713 ng/ml。

2.5 重复性

取样品，按2.1.5项下方法测定，结果铅、砷、镉、汞、铜平均含量分别为2.40×105，0.091，0.173，<0.003，6.61 mg/kg，RSD分别为5.5 %，4.8 %，6.3 %，7.4 %，5.5 %（n=6），RSD均小于10 %，表明重复性良好。

2.6 中间精密度

取样品，分别由不同操作人员在不同日期按2.1.5项下方法分别测定6份供试品，结果铅、砷、镉、汞、铜平均含量分别为2.45×105，0.101，0.171，<0.003，6.59 mg/kg，RSD分别为6.1 %，6.9 %，7.5 %，8.2 %，6.6 %（n=6），RSD均小于10 %，表明本法测定中间精密度良好。

2.7 准确度

精密称取样品5 g，置研钵中，加热软化，精密加入硅藻土5 g，研匀备用。取适量，精密称定，置聚四氟乙烯消解罐中，分别精密加入铅单元素标准液2000 ng、砷单元素标准液25 ng、镉单元素标准液25 ng、汞单元素标准液25 ng、铜单元素标准液25 ng，加硝酸10 ml，摇匀，密闭，置微波消解仪中消解，消解完全后，冷却，将消解液转入50 ml量瓶中，用少量水洗涤消解罐3次，洗液合并于量瓶中，加入金单元素标准溶液（l μg/ml）200 μl，用水稀释至刻度，摇匀，即得砷、镉、汞、铜混合准确度溶液。精密吸取上溶液1 ml置100 ml量瓶中，用10 %硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，精密吸取1 ml置100 ml量瓶中，用10 %硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得铅准确度溶液。同法制备6份，注入电感耦合等离子质谱仪，依法测定，结果见表2。

表2 准确度结果

结果显示铅平均回收率为102.7 %，RSD为5.9 %，砷平均回收率为91.99 %，RSD为7.4 %，镉平均回收率为111.16 %，RSD为3.7 %，汞平均回收率为109.39 %，RSD为9.5 %，铜平均回收率为94.12 %，RSD为7.5 %，表明方法准确度良好。

2.8 样品测定

取7批膏药，按2.1.5项下方法测定，结果见表3。

表3 检测结果

结果显示红花续断膏中铅含量在2.07×105～2.54×105mg/kg范围内，砷含量在0.05～0.14 mg/kg范围内，镉含量在0.16～0.19 mg/kg范围内，汞含量均小于0.003 mg/kg，铜含量在6.2～8.7 mg/kg范围内。

3 讨论

研究中发现黑膏药较黏，需加热至70～80 ℃使成液态后称量。准确度试验中样品黏稠，无法与标准溶液混匀，故先用硅藻土将样品充分分散，使成固态粉末，便于试验操作，随行空白对照。研究显示红花续断膏中铅含量较高，约占样品总重的21 %～25 %，测定铅含量时需将供试品溶液稀释1×104倍后进样测定。本法所测铅含量为总铅含量，包含脂肪酸铅盐及反应剩余铅丹中铅含量，与文献报道基本一致[8]，另表明样品中砷、镉、汞、铜含量较低，膏药一般为完整皮肤应用，可吸收砷、镉、汞、铜元素量较低。

红花续断膏中铅是主要辅料铅丹的成分，又是有一定毒性的成分，其应用后铅吸收与样品中铅含量、临床应用周期之间关系有待进一步研究。