GeneXpert结核分枝杆菌/利福平耐药检测在肺结核诊断中的价值评估

曹广秀

天津市滨海新区塘沽传染病医院检验科，天津 300454

在临床上肺结核作为传染性疾病极为常见，对人类健康造成严重的威胁［1］。肺结核是结核分枝杆菌直接所致的一种慢性传染病，患病情况下累及诸多脏器，其中，肺部结核感染是最为常见的［2］。排菌者是重要传染源，人体感染结核菌后不一定发病，人体抵抗力降低情况下临床发病风险增高［3］。基于此疾病的传染性特点，防治肺结核疾病工作就显得尤其重要［4］。当前，虽然我国较为重视肺结核的预防工作，但是其发生率仍较高，防治工作需进一步加强［5］。在临床上，现阶段肺结核的检测和诊断方法诸多，主要包括痰涂片检测，药敏试验、痰液的固体与液体培养等，虽然开展率广泛，但是都存在缺点。痰涂片检测，较低阳性率；药敏试验则需要较长的周期；而细菌培养，则需要较高的培养条件；使得误诊情况极易发生［6］。伴随近些年来，不断深入分析基因组（结核杆菌）和分子生物学不断发展，越来越关注GeneXpert MTB/RIF（结核分枝杆菌/利福平耐药检测），改进常规检测和痰涂片方法，可快速检测耐药性和结核杆菌，应用价值较高［7］。本次研究评估在肺结核临床诊断中应用GeneXpert MTB/RIF 的价值，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

评估对象选择2020年3月—2021年3月天津市滨海新区塘沽传染病医院就诊的60例肺结核疑似与确诊患者，年龄：22～79 岁，平均年龄（55.20±3.55）岁，其中男29例、女31 例，12 例患者年龄＜40 岁，30 例患者年龄在40～59岁间，18例患者年龄≥60岁。17例干酪样痰，31例黏液痰，12 例血痰。入选标准：此次研究对象均为成人，病例信息完整，参与者对研究知情且自愿配合研究。排除标准：排除合并传染类疾病、重大脏器疾病等情况。本次研究获得医院医学伦理委员会审核通过。

1.2 方法

本次研究应用的试剂和仪器设备如下：显微镜与玻璃玻片、中性培养基、GeneXpert MTB/RIF 试剂及检测系统。以检验规程为依据实施各项操作。具体检测方法为：（1）痰标本实行涂片与抗酸染色，干燥后显微镜镜检观察阳性率；（2）痰分枝杆菌培养为固体培养法（碱处理），将处理后标本用无菌滴管均匀接种于中性罗氏培养基上，（36±1）℃观察，每周记录一次，直致第8个周末，根据肉眼观察进行结果判定。（3）GeneXpert MTB/RIF 方法，比例原则以1∶2为依据，在处理液中溶入标本1 mL，轻轻振动，摇匀混合液，15 min静置；混合液采用菌吸管进行吸取，2 mL吸取量，向反应盒（一次性）中转移，在检测系统中放入，以操作要求为依据实行检测，2 h 对数据进行读取。

1.3 观察指标

肺结核的诊断“金标准”为痰培养结核杆菌阳性，比较三种检测方法耐药菌和结核杆菌的阳性率；并比较GeneXpert MTB/RIF、抗酸染色法的特异性和灵敏度。

1.4 统计学方法

采用SPSS 23.0 软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验。计数资料以例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对比GeneXpert MTB/RIF和固体培养法检测结果

相比固体培养法，GeneXpert MTB/RIF 的实行，阳性检出率提升明显，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 GeneXpertMTB/RIF和固体培养法检测结果 例（%）

2.2 抗酸染色法与固体培养法检测结果

与固体培养法相比，抗酸染色法的实行，阳性检出率降低明显，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 抗酸染色法与固体培养法检测结果 例（%）

2.3 GeneXpert MTB/RIF、抗酸染色法的特异性和灵敏度

与抗酸染色法相比，GeneXpert MTB/RIF 的实行，特异性和灵敏度均明显提升，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 GeneXpertMTB/RIF、抗酸染色法的特异性和灵敏度 例（%）

3 讨论

肺结核在临床上为传染性疾病之一，患者出现盗汗、乏力、消瘦等症状表现［8］。分析该疾病多发群体，主要是由于老年人以及患有糖尿病、呼吸道慢性疾病患者、从未接种此类疫苗的患者，所以，关于肺结核疾病主张早诊断、早治疗，以促进患者预后［9］。随着临床工作的开展，现阶段具有严重耐药情况，社会关注度极高。结核菌在临床上检测方法有很多，主要包括传统药检、涂片镜检法等，检测方式较为有效，然而以上检测方法却需要较长时间，具有较低特异度，对时效性（药敏报告）造成影响［10］。药敏试验（比例法）和固体培养法一般要4～8周才能获得结果，在肺结核临床诊治中，早期诊治时机被延误，进而影响预后效果［11］。因此，必须选择一个有效的诊断方式，快速获得诊断结果，为治疗争取最佳时机。伴随近些年来医疗诊断技术的不断进步，在肺结核临床诊断中引进先进的技术，有效提升了诊断水平［12］。GeneXpert MTB/RIF作为一种检测技术，为实时荧光定量生物学聚合酶链反应（PCR）半巢式体外检测技术，基于rpoB，利福平耐药（81bp）核心区间，对探针和引物进行设计，检测突变是否发生，对肺结核是否发生进行检测，并且可检测对利福平耐药与否［13-14］。纵观各项肺结核检测技术，Gen⁃eXpert MTB/RIF检测技术在现阶段作为首选，社会认可度较高，利用检测系统，检验便可完成，获得的诊断结果也较为准确［15］。GeneXpert MTB/RIF 检测技术优势为可靠、准确，一般2 h 之内可回报结果，该技术在反应盒（封闭）中整合检测与扩增PCR，加入样本后，反应盒中自动完成试验，操作得以简化，检验人员工作量得以减少，次技术仅需简单处理样本，所用试剂存在MTB灭活能力，可将生物污染发生风险减少，针对实验组设施无较高要求，适合在基层医疗机构推广和应用［16］。本次研究结果表明，相比固体培养法，GeneXpert MTB/RIF 的实行，阳性检出率提升明显，可见，相比固体培养法，GeneXpert MTB/RIF检测方法阳性率更高，检测价值更高。对其原因进行分析，固体培养法，前处理需要对碱、酸进行应用，会对标本结核菌活性造成损伤，对结果准确性造成影响，有的患者痰液样本并不是出自于肺深部，少含菌量，较差黏附在玻片上，在染色时，会大量丢失部分成分，降低阳性检出率。而GeneXpert MTB/RIF 检测技术对扩增技术（实时荧光定量）进行应用，全自动运行，操作方便，污染降低，可实现快速检测，高阳性率［17-18］。本次研究还显示，与固体培养法相比，抗酸染色法的实行，阳性检出率降低明显，与抗酸染色法相比，固体培养法的检测效果更佳，同时也证实了，GeneXpert MTB/RIF 检测方法比抗酸染色法诊断价值更高；对其原因进行分析，抗酸染色法虽然快速、简单，然而低灵敏度，漏诊情况极易发生，对诊断结果造成影响，然而，检测人员素质和技术水平，操作是否完全依靠操作要求进行等，也会影响检测结果。固体培养法作为传统方法，可对感染结核杆菌耐药菌进行准确判断［19-20］。另外，对比GeneXpert MTB/RIF 与抗酸染色法的特异性和灵敏度，结果显示：与抗酸染色法相比，GeneX⁃pert MTB/RIF的实行，特异性和灵敏度均明显提升，证实GeneXpert MTB/RIF 的特异性和灵敏度更高。对其原因进行分析，固体培养法需要较长的检测时间，不能对肺结核快速检测，而抗酸染色法虽快捷、简便，却呈现较低阳性率，痰标本检测结核菌数在5 000条/mL以上，结果才能判断为阳性，较差特异性和灵敏度［21-22］。GeneXpert MTB/RIF技术高准确性，操作快速、便捷、方法简单、敏感性高，同样适合应用于基层医院中，可使得肺结核尽早诊疗，改善患者预后［23-24］。

综上所述，肺结核疾病对患者造成的危害性较大，基于疾病的传染性，增加患者的心理负担。所以，需要尽早进行诊断与治疗，考虑疾病用药的耐药性问题，需要加强对患者的诊断工作，确保用药的有效性、合理性，促进患者治疗预后。在肺结核临床诊断中应用GeneXpert MTB/RIF价值较高，特异性、灵敏度和准确性均较高。