高效液相色谱法测定3%辛硫磷颗粒剂

洪陈艳，王学林，颜高俊，安燕萍

(昆明农药有限公司，云南 昆明 650401)

辛硫磷(phoxim)属于高效、低毒、广谱硫代磷酸酯类有机磷杀虫剂[1]。辛硫磷具有触杀和胃毒作用，作用于通过抑制昆虫体内神经组织上的乙酰胆碱酯酶或胆碱酯酶的活性从而使害虫中毒死亡，无内吸性，持效期短，可用于防治危害粮食、棉花、蔬菜、果树、茶叶、桑等的害虫，以及土壤害虫(在土壤中的持效期可达一个月以上)、仓储害虫、卫生害虫和家畜体内外的寄生虫[2]。3%辛硫磷颗粒剂主要用于防治农作物上的蛴螬、地老虎等地下害虫。

3%辛硫磷颗粒剂目前尚无国家标准。本文使用以C18为填料的不锈钢柱和紫外检测器，对试样中的辛硫磷进行反相高效液相色谱分离和测定，外标法定量。

1 实验部分

1.1 试剂

辛硫磷标样(w=99.04%)；甲醇：色谱级(用于流动相)；甲醇：分析纯；水：蒸馏水(新蒸二次蒸馏水)。

1.2 操作仪器

液相色谱仪：高效液相色谱仪(具有可调节波长紫外检测器和定量进样阀)；色谱数据工作站：N2000色谱工作站；色谱柱：150 mm×φ4.6 mm 不锈钢柱，内装DOS(C18)5 μm 填充物，微量进样注射器：50 μL；定量进样器 5 μL；超声波清洗器。

1.3 操作条件

柱温：室温，温度变化不高于 2 ℃；流动相：V(甲醇)∶V(水)=80∶20，经滤膜过滤，并进行脱气；检测波长：254 nm；流速：1.0 mL/min；进样量：5 μL；保留时间：约 6 min。

1.4 操作步骤

1.4.1 标样溶液的制备

称取 0.1 g 辛硫磷标样(精确至 0.0002 g)，置于 50 mL 的容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，超声波振荡 10 min，使标样中的辛硫磷完全溶解，冷却至室温，摇匀。用移液管移取 5 mL 上述溶液于另一 50 mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，备用。

1.4.2 试样溶液的制备

称取 3.3 g 辛硫磷试样(精确至 0.0002 g)，置于 50 mL 的容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，超声波振荡 10 min，使试样中的辛硫磷完全溶解，冷却至室温，摇匀。用移液管移取 5 mL 上述溶液于另一 50 mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，备用。

1.4.3 测定

在上述色谱操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针标样溶液中的辛硫磷响应值变化小于1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进样进行分离测定[3]。3%辛硫磷颗粒剂高效液相色谱图见图1，辛硫磷的保留时间为 6.078 min。

图1 3%辛硫磷颗粒剂高效液相色谱图

1.4.4 计算

将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中辛硫磷峰面积分别进行平均。试样中辛硫磷的质量分数w(%)按公式计算：

式中：A2为试样溶液中辛硫磷峰面积的平均值；m1为标样辛硫磷的质量，g；w标为标准品辛硫磷的质量分数，%；A1为标样溶液中辛硫磷峰面积的平均值；m2为试样的质量，g；w1为试样辛硫磷的质量分数，%。

1.4.5 允许差

辛硫磷质量分数两次平行测定结果之差应不大于0.2%，取其算术平均值作为测定结果。

2 结果与讨论

2.1 液相色谱操作条件的选择

为了保证3%辛硫磷颗粒剂样品中辛硫磷的峰型能够较好地分离，分别取不同配比的甲醇和水为流动相进行分析检测。通过比较和对比分析辛硫磷以及杂质峰的峰型、出峰时间、分离完全度等因素，确定使用甲醇-水体积比80∶20为流动相时，样品色谱图基线平稳，峰型好，分离效果较好，出峰时间适宜。因此确定选用V(甲醇)∶V(水)=80∶20作为流动相。

2.2 波长的选择

使用紫外可变波长检测器，在不同波长下对辛硫磷进行扫描，当扫描波长为 254 nm 时，辛硫磷的响应值最大，并且能与杂质峰分离彻底，因此选择 254 nm 作为检测波长。

2.3 溶剂的选择

根据辛硫磷的性质，当选用甲醇为试样溶剂时，能较好地溶解试样，且峰型分离较好，满足试剂的选择条件。

2.4 分析方法线性关系测定

配制一系列质量浓度梯度的辛硫磷标样溶液，按本文1.3、1.4中的方法进行分析检测。每个质量浓度分析两次，求其峰面积的平均值，得出了一系列色谱峰面积(表1)。以辛硫磷的质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制线性相关曲线，得出辛硫磷的线性方程y=1.0×107x-14709，线性相关系数为R2=0.9998，结果表明，该方法对辛硫磷的分析具有良好的线性相关性，完全满足定量分析的要求。

表1 不同质量浓度辛硫磷标样与对应的峰面积

2.5 分析方法精密度测定

分别称取6个平行试样，按照上述色谱条件和测定步骤测定，辛硫磷的标准偏差为0.06%，变异系数为1.98%，具有良好的精密度(表2)。

表2 分析方法的精密度测定结果

2.6 分析方法准确度测定

称取辛硫磷颗粒剂试样配制成试样溶液，分别称取相同体积的上述溶液制备7份相同的样品，其中6份加入一定量的辛硫磷标样。如此配制成6个混合样品溶液和1个空白溶液，按本标准操作条件进行分析，分别测定每个样品的辛硫磷总质量，计算回收率，测定结果见表3。表3表明，该测定方法可靠性较高。

表3 分析方法的准确度测定结果

3 结论

本文建立的高效液相色谱法测定3%辛硫磷颗粒剂中有效成分辛硫磷质量分数的检测方法，具有较宽的线性范围和较好的准确度、精密度，方法方便、快捷，能满足定量分析要求，可用于该剂型质量分数检测和质量控制。