同型半胱氨酸联合叶酸代谢相关酶基因在妊娠期高血压疾病中的临床价值*

黄国平,徐 梅,陈月华,王 军,金 华,叶 强△

四川省自贡市妇幼保健院:1.检验科;2.产科,四川自贡 643000

妊娠期高血压疾病(HDP)是孕产妇妊娠期发病率最高的并发症之一,主要包括妊娠高血压和先兆子痫,表现为高血压、蛋白尿、水肿,并伴有严重肝肾功能损害、胎盘早剥和死产等,是孕产妇和胎儿死亡的主要原因[1]。研究表明先兆子痫和妊娠高血压在全球的发病率分别为1.8%～4.4%和0.2%～9.2%[2],在我国HDP发病率为9.2%～10.1%[3]。研究发现妊娠并发症可能是女性未来患心血管疾病最早的临床标志之一,HDP患者晚年心血管疾病及慢性高血压的发病率显著高于健康孕妇[4-5],且HDP患者子女的基础血压和心血管疾病的长期发病率更高[6]。HDP对妊娠期女性和社会造成严重负担,但HDP的发病机制尚不清楚。

同型半胱氨酸(Hcy)是蛋氨酸代谢的中间产物,正常情况下妊娠期女性的Hcy水平会逐渐下降至孕前的50.0%～60.0%,然后保持相对较低的水平直至分娩[7]。当Hcy代谢酶存在异常缺陷,如亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T或蛋氨酸合成酶(MTR)A2756G发生突变,使Hcy代谢酶活性明显下降将导致高Hcy血症,有研究发现叶酸代谢MTHFR C677T和MTR A2756G多态性与血Hcy水平呈正相关[8],并且叶酸代谢基因多态性与不明原因复发性流产及孕妇先兆子痫相关[9-10]。MARUTA等[11]的研究表明妊娠早期Hcy>7.2 μmol/L与HDP的发生相关。但Hcy代谢酶异常突变与高Hcy血症在HDP中是否扮演重要角色尚不清楚。本研究从叶酸代谢MTHFR和MTR基因多态性和Hcy水平的关系着手,分析二者在HDP中的临床意义,旨在为该病的临床诊治提供参考依据。

1 资料和方法

1.1一般资料 将2021年11月至2022年8月在自贡市妇幼保健院(以下简称本院)建档并定期产检的65例HDP孕妇作为HDP组,平均年龄(28.2±4.7)岁,平均孕周(38.4±1.3)周,平均收缩压(140.0±16.0)mm Hg,平均舒张压(89.0±7.0)mm Hg。另选取同期在本院健康体检的80例健康孕妇作为正常妊娠组,平均年龄(27.3±4.2)岁,平均孕周(38.1±1.4)周,平均收缩压(128.0±14.0)mm Hg,平均舒张压(81.0±5.0)mm Hg。纳入标准:(1)妊娠期高血压疾病诊断参照《妊娠期高血压疾病诊治指南(2015)》[12]中相关诊断标准;(2)临床资料完整;(3)单胎、初产妇;(4)无精神疾病;(5)近期未服用激素类药物。排除标准:(1)合并感染性疾病;(2)合并严重的脏器功能障碍;(3)合并原发性高血压、糖尿病;(4)合并心脏病;(5)合并血液系统疾病、甲状腺疾病、免疫系统疾病、过敏史。两组研究对象年龄、孕周、收缩压、舒张压比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。本研究经本院医学伦理委员会审批。所有研究对象签署知情同意书。

1.2方法 孕妇入院后采集空腹静脉抗凝血,以3 500 r/min离心10 min,采用全自动生化分析仪(迈瑞CL-2000)检测血清Hcy、肝功能、肾功能和血脂6项;采用奥丞生物的胎盘生长因子(PLGF)检测试剂盒检测PLGF水平;采用全自动凝血分析仪检测(日本积水CP3000)检测凝血功能水平;采用重庆鼎润血栓弹力图试验(活化凝血)试剂(凝固法)检测血栓弹力图。取3 mL的24 h尿液,以3 500 r/min离心5 min,采用全自动生化分析仪检测24 h尿总蛋白定量(24 h UP)水平;采用西安天隆微测序仪检测叶酸代谢相关酶基因MTHFR 677C>T、MTHFR 1298A>C和MTRR 66A>G的多态性,并根据检测基因位点功能、纯合、杂合及出现频率,将患者叶酸代谢障碍风险分为未发现风险、低度风险、中度风险、高度风险4个风险等级。

2 结 果

2.1对照组和HDP组血清Hcy、PLGF、肾功能、肝功能和血脂水平比较 与对照组比较,HDP组Hcy水平显著升高,而PLGF、尿酸(UA)及碱性磷酸酶(ALP)水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);而两组肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 对照组和HDP组血清Hcy、PLGF、肾功能、肝功能和血脂水平比较

2.2对照组和HDP组凝血功能和血栓弹力图比较 与对照组比较,HDP组凝血酶时间(TT)显著延长,血栓弹力图中两侧曲线的最宽距离(MA)显著增大,差异均有统计学意义(P<0.05);而两组凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、D-二聚体(DD)水平及血栓弹力图中的反应时间(R)、凝固时间(K)、α角度(Angle)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 对照组和HDP组凝血功能和血栓弹力图水平比较

2.3对照组和HDP组叶酸代谢障碍风险等级比较 HDP组孕妇叶酸代谢障碍风险(低度+中度+高度)比例(81.6%)显著高于对照组(61.5%),未发现风险比例(18.4%)显著低于对照组(38.5%),差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 对照组和HDP组叶酸代谢障碍风险等级[n(%)]

2.4对照组和HDP组叶酸代谢相关酶基因MTHFR的多态性比较 分析MTHFR677C>T基因型分布发现,对照组和HDP组携带C等位基因的频率分别为74.4%和56.9%,携带T等位基因的频率分别为25.6%和43.1%,两组C、T等位基因频率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表4。分析MTHFR 1298A>C基因型分布差异发现,对照组和HDP组携带A等位基因的频率分别为70.0%和80.0%,携带C等位基因的频率分别为30.0%和20.0%,两组携带A、C等位基因的频率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表5。

表4 对照组和HDP组叶酸代谢相关酶基因MTHFR677C>T位点基因型分布和等位基因频率比较[n(%)]

表5 对照组和HDP组叶酸代谢相关酶基因MTHFR1298A>C位点基因型分布和等位基因频率比较[n(%)]

2.5对照组和HDP组叶酸代谢相关酶基因MTRR多态性比较 分析MTHFR 1298A>C基因型分布发现,对照组和HDP组携带A等位基因的频率分别为80.6%和77.7%,携带G等位基因的频率分别为19.4%和22.3%,两组携带A、G等位基因的频率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表6。

表6 对照组和HDP组叶酸代谢相关酶基因MTRR 66A>G位点基因型分布和等位基因频率比较[n(%)]

2.6HDP孕妇叶酸代谢障碍未发现风险组和风险组间Hcy、PLGF、24 h UP和UA水平比较 根据是否发生叶酸代谢障碍,将HDP组孕妇分为叶酸代谢障碍未发现风险组(n=12)和风险组(n=53)。风险组的Hcy、24 h UP及UA水平显著高于未发现风险组,而PLGF水平显著低于未发现风险组,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表7。

表7 HDP孕妇叶酸代谢障碍未发现风险组和风险组Hcy、PLGF、24 h UP和UA水平比较

2.7HDP组中Hcy与PLGF水平的相关性分析 Spearman相关性分析结果表明,HDP组中Hcy水平与PLGF水平呈显著负相关(r=-0.543,P<0.05)。

3 讨 论

HDP常伴有严重的并发症,严重威胁母婴的安全。本研究结果表明与对照组比较,HDP组ALP、UA水平显著升高、TT延长,血栓弹力图中两侧曲线的MA增大,说明HDP孕妇伴有肝功能和肾功能损害、凝血功能和血栓弹力图异常。孕妇在妊娠期特别是孕晚期出现高凝状态是机体为了避免产后大出血的自我保护机制,但HDP孕妇较普通孕妇出现更为极端的血液高凝状态伴继发性纤溶亢进,将会大大增加HDP孕妇出现血栓和出血的风险[13]。需要加大对HDP孕妇凝血和血栓弹力图的监测,便于早期发现问题并及时进行干预。

Hcy是蛋氨酸代谢的中间产物,在人体内主要有2种代谢途径:(1)在叶酸和维生素B12的辅助作用下重新合成蛋氨酸。(2)在维生素B6依赖酶支持下形成半胱氨酸[14]。当Hcy代谢酶异常缺陷如MTHFR或MTR突变时,Hcy代谢酶活性明显下降将造成高Hcy血症。有研究发现MTHFR C677T和MTR-A2756G多态性与孕妇先兆子痫相关[10]。本研究结果发现,HDP组MTHFR677C>T位点中携带T等位基因的频率显著高于对照组,而MTHFR1298A>C位点中携带C等位基因的频率及MTRR66A>G位点中携带G等位基因的频率与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),表明HDP患者叶酸代谢障碍风险的主要原因与MTHFR677C>T位点的突变有关,与胡勤等[15]的研究结果MTHFR 677C>T基因型与妊娠期高血压的发生有关、其基因多态性增加了患妊娠期高血压的风险、而MTHFR1298A>C和MTRR66A>G基因型与妊娠期高血压的发生无关相符合。

有研究表明MTHFR 677C>T和MTR2756A>G多态性与血清Hcy水平正相关[8];MARUTA等[11]的研究表明妊娠早期Hcy水平>7.2 μmol/L与HDP的发生相关。PLGF是一种胎盘源性因子,具有调节并滋养内皮细胞的功能。对于疑似先兆子痫且孕周<35周的孕妇,筛查阳性(PLGF<100 pg/mL),对2周内发生的先兆子痫具有96.0%的灵敏度和98.0%的阴性预测值[16]。本研究结果中HDP组Hcy水平显著高于对照组,而PLGF水平显著低于对照组,且Hcy水平与PLGF水平呈显著负相关,表明Hcy水平在HDP中升高,可通过检测PLGF、Hcy水平对子痫患者进行尽早干预和处理,从而保护孕妇和胎儿的健康。

MTHFR677C>T基因多态性与中国汉族先兆子痫孕妇的肾功能受损相关,基因多态性是中国汉族先兆子痫孕妇肾功能受损的独立危险因素[17]。本研究中HDP患者叶酸代谢障碍风险的原因主要与MTHFR677C>T位点的突变有关,且在HDP患者中,叶酸代谢障碍风险组患者的Hcy、24 h UP和UA水平较叶酸代谢未发现风险组患者更高,表明HDP叶酸代谢障碍风险的患者血清Hcy进一步升高,其肾功能受损情况更严重,与YUN等[17]的研究结论吻合。此外,Hcy可激活氧化应激反应损伤血管内皮细胞,导致高血压和冠心病,是心血管疾病的独立危险因素[18]。

综上所述,在HDP中,MTHFR677C>T基因突变使叶酸代谢障碍从而导致高Hcy血症,高水平血清Hcy可能通过激活氧化应激反应损伤胎盘血管内皮细胞并导致HDP的进展。未来应进一步研究其中的发病机制及Hcy与PLGF在HDP中的作用,为HDP的治疗提供有价值的方向。