益阳地区鸡滑液囊支原体感染的血清学调查与分析

孙杰龙，丁 宁，刘颂阳，班 博，冷电波，李清林，戴 维，王莹芳

（益阳市农业科学院，湖南益阳 413046）

鸡滑液囊支原体是介于细菌和病毒之间的微生物，能够引起鸡气囊炎、关节滑液囊膜炎以及生殖道损伤，是一种急性或慢性传染病[1]。滑液囊支原体病发生至今，已对我国养鸡业造成了重大经济损失。肉（种）鸡或蛋（种）鸡养殖场均有发生，发病率为3%～50%，正常情况下，感染鸡不表现明显的临床症状，仅少部分鸡出现临床症状，呈慢性或隐性感染[2,3]。该病既可通过空气、饮水、饲料、鸡笼等直接接触传播，也可经吸血昆虫、蚊蝇、老鼠等间接接触传播，还可通过种蛋垂直传播。由于该病发展缓慢，病程较长，一旦在鸡群中感染，根本无法彻底清除，造成感染鸡终生带菌[4]。程祥琴等[5]报道，感染鸡群饲料利用率低、生长发育迟缓、淘汰率高，产蛋率低、甚至没有产蛋高峰期等，还影响鸡的正常疫苗免疫应答能力，导致疫苗免疫后抗体水平低且均匀度差，鸡群抗病能力低，易感染其他疾病等。药物治疗效果不理想，易反复，张惠茹等[6]研究发现，21 株滑液囊支原临床分离株对大环内酯类、氟喹诺酮类抗菌药耐药性严重。为了查明益阳地区鸡滑液囊支原体的感染状况，为防控该病提供依据，本试验采用酶联免疫分析试剂盒测定了益阳地区各区县鸡群滑液囊支原体血清抗体水平，以期为益阳地区鸡滑液囊支原体防控提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试剂

鸡滑液囊支原体抗体（MS-Ab）ELISA 检测试剂盒购自上海臻科生物科技有限公司，于2～8℃保存，批号：ZK-14658。

1.1.2 样品采集

采样要求：鸡群存栏量在2000～30000 只的养鸡场，采样鸡群均未进行鸡滑液囊支原体疫苗的免疫接种。2000～10000 只采样比例0.5%；10000 只以上采样比例0.2%。采用随机抽样法无菌采集益阳地区7 个区县，不同规模、品种、用途和日龄的健康鸡群翅静脉血液950 份，然后按要求提取血清，尽快进行试验。若不能马上进行试验，可将血清放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

1.2 方法

按鸡滑液囊支原体抗体（MS-Ab）酶联免疫分析试剂盒使用说明书进行。每板设阴性、阳性对照孔各2 孔，空白对照孔1 孔，分别在阴、阳性对照孔中加入阴性、阳性对照液50μL。然后在待测样品孔中加样品稀释液40μL，再加待测血清10μL。温育1 次，洗涤5 次，拍干。每孔再加入酶标试剂50μL，空白孔除外。又温育1次，洗涤5 次，拍干。再加入显色剂A 50μL，然后加入显色剂B 50μL，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10min，加终止液50μL，此时蓝色立转黄色。测定应在加终止液后15min 以内进行，以空白孔调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。样品OD 值<0.35 判为滑液囊支原体抗体阴性；样品OD 值≥0.35 判为滑液囊支原体抗体阳性。

2 结果与讨论

2.1 不同区县鸡群滑液囊支原体血清学检测结果

由表1 可见，7 个不同区县的鸡场均普遍存在不同程度的鸡滑液囊支原体感染，抽检样品阳性率在36.36%～57.14%，平均阳性率为43.68%，其中资阳区阳性率最高，与该区以中小规模鸡场和家庭养殖农场为主，养鸡场户数量多密度大，鸡场与农村居民区之间距离较近，农村住户家家有养鸡的传统，易造成滑液囊支原体水平传播引起区域性感染有关；还可能与没有选择敏感药物预防有关。

表1 不同区县鸡群滑液囊支原体血清学检测结果

2.2 不同品种鸡群滑液囊支原体血清学检测结果

由表2 可知，青脚麻鸡、湘黄鸡、桃源鸡、海兰鸡、罗曼鸡和京粉鸡都有不同程度的滑液囊支原体感染，感染率在35.13%～72.22%，平均阳性率为48.65%。分析其原因主要是与鸡场使用时间的长短、自动化程度高低和精细化管理措施是否执行到位有关外，与鸡品种无关。追溯现场采样，鸡场的使用时间短、自动化程度高、精细化饲养管理措施执行到位，滑液囊支原体感染率就低。还可能与采集的样品数量较少，不具备充分的代表性有关。至于不同品种的鸡是否对鸡滑液囊支原体具有不同的抗感染性，还有待进一步论证[7]。

表2 不同品种鸡群滑液囊支原体血清学检测结果

2.3 不同用途不同日龄鸡群滑液囊支原体血清学检测结果

由表3 可知，不同用途不同日龄的鸡都可感染鸡滑液囊支原体，20～30 日龄的血清阳性率在21.43%～27.08%，31～60 日龄的血清阳性率在37.50%～44.44%，61～90 日龄的血清阳性率在51.11%～60.42%，91 日龄以上的血清阳性率在56.52%～64.58%，蛋鸡血清平均阳性率为41.99%，肉鸡血清平均阳性率为48.95%。肉鸡血清样品阳性率高于蛋鸡样品阳性率，可能原因是肉鸡饲养周期短，出栏快，一栋鸡舍年出栏鸡4批左右，鸡舍存在清洗和消毒不彻底，空舍时间达不到2 周以上，没有执行严格的全进全出生产制度，一些体重不达标的鸡没有及时清栏处理，还是养在鸡场内，造成滑液囊支原体等病原微生物在鸡场内循环传播，致使肉鸡阳性率偏高。不同用途的鸡随着饲养日龄的增长，阳性率越高的问题，可能与鸡场周边家禽滑液囊支原体感染严重，采样鸡没有免疫滑液囊支原体疫苗、药物防控效果差和没有执行严格的生物安生措施等因素有关；还可能与经上呼吸道感染滑液囊支原体的鸡不产生抗体或者产生抗体需要2～4 周，在这个时间段酶联免疫分析试剂盒检测不敏感有关。

表3 不同用途不同日龄鸡群滑液囊支原体血清学检测结果

3 改进措施

3.1 注意引种

据调查，益阳地区本地没有规模种鸡场，养鸡场大多从周边省、市引进种蛋或鸡苗。滑液囊支原体既可垂直传播、又可水平传播，引入后根本无法彻底清除[8]。故在引进种蛋或鸡苗时，不从疫点疫区或支原体感染严重的地方引种，必须选择健康鸡场，滑液囊支原体阴性场引种，从种源上杜绝感染。

3.2 疫苗免疫

疫苗接种是预防鸡滑液囊支原体病的有效手段，鸡滑液囊支原体疫苗包括活疫苗和灭活疫苗，王艳丰等[9]研究表明，活疫苗无法保护已感染鸡群，接种后会诱发鸡群发病或加重症状；活疫苗只能免疫阴性鸡场，并且使用条件苛刻，免疫前1 周和免疫后3 周在饲料或饮水中不能含有抗支原体病的药物，否则影响免疫效果。本次检测阳性样品多，阳性鸡场只能使用灭活疫苗免疫，灭活疫苗虽然无法阻止滑液囊支原体野毒感染和定殖，却能有效减轻鸡群感染后的发病症状，降低对鸡只造成的损伤和影响[10]。建议灭活疫苗作二次免疫，首免在3～4 周龄，二免在10～12 周龄。

3.3 药物预防

药物治疗是防控鸡滑液囊支原体感染的一个重要手段。虽然应用药物很难将存在于鸡群中的滑液囊支原体根除，但是将泰乐菌素、泰万菌素、泰妙菌素、替米考星、二氟沙星和氧氟沙星等敏感药物添加在饲料和饮水中可有效防治鸡滑液囊支原体的感染。但使用泰乐菌素、泰妙菌素等抗支原体病药物时应注意与（甲基）盐霉素等聚醚类药物的配伍禁忌。有条件的鸡场建议在用药之前做药敏试验，选择敏感药物采取轮换用药的方式，分阶段使用，并严格遵守休药期。

3.4 实行精细化管理

滑液囊支原体与鸡场管理有很大的相关性，回顾调查发现，卫生打扫不及时、管理松散的鸡场鸡滑液囊支原体血清样品阳性检出率高。为降低发病风险，需要改善饲养条件、加强精细化管理，减少各种诱发因素与应激因素。加强鸡场环境控制，严格把控鸡舍内温度和湿度，为鸡群提供舒适的生长环境。针对鸡群不同生长阶段，对养分的需求不同，科学搭配日粮，确保鸡群获取充足、全面的营养[11]。同时在饲料内补充微量元素、维生素等，提升鸡群免疫力。适当降低饲养密度，及时淘汰病、弱、残次鸡，保持舍内整洁卫生，及时清除圈舍内的灰尘、羽毛和废弃物等；加强通风，保持舍内空气新鲜。严格落实全进全出的生产制度，切断场内病原微生物的传播链。鸡舍内鸡群出栏后必须彻底清洗、干燥和消毒，适当增加空舍时间，使舍内病原微生物得到全面净化。全面执行绩效考核制度，所有员工工资与生产成绩挂钩，加强员工责任心和主人翁精神，提升员工工作的主观能动性；对员工实行末尾淘汰制，营造认真负责的工作氛围。

3.5 执行严格的生物安全措施

加强员工滑液囊支原体病防控知识培训，强化员工防疫意识。对鸡场实行封闭式管理，严格按照鸡场防疫要求对进出的人员、车辆、物品等进行彻底消毒。进出门口消毒池、洗手盆等长时间连续使用的消毒药必须定期更换，防止使用时间过长分解失效。选择刺激性小的消毒剂2～3种（如戊二醛、百毒杀等），现配现用，采取轮流交替的方式进行带鸡消毒。加强鸡场内外道路、生活区、生产区消毒，消毒工作责任到人，并加强监管。按照鸡场具体生产情况，制定适合鸡场自身的防疫激励制度，人人担责、人人都是防疫主体，减少鸡滑液囊支原体的传入风险。

4 小结

本次调查发现，不同区县、不同品种、不同用途和不同日龄的鸡群均存在不同程度的滑液囊支原体感染。畜牧主管部门应高度重视，开展更广泛的血清学检测，进一步摸清本区域滑液囊支原体感染的真实状况，同时积极配合养鸡场从业人员采取注意引种、疫苗免疫、药物预防、实行精细化管理和执行严格的生物安全措施等综合防控技术才能切断其传播链，保护易感鸡群，降低滑液囊支原体病的感染率，才能更好地促进益阳地区养鸡产业持续健康稳定发展。